Exonuclease I có nguồn gốc từ một gen được biến đổi Vi khuẩn E. coli chủng biểu hiện gen Exo I, thể hiện hoạt động exonuclease tiêu hóa DNA mạch đơn từ đầu 3' đến đầu 5'. Nó giải phóng tuần tự deoxyribonucleotide 5'-monophosphate, bảo toàn tính toàn vẹn của các dinucleotide đầu 5'. Enzym này chủ yếu được sử dụng để phân hủy và loại bỏ các đoạn mồi sau khi khuếch đại PCR. Nó vẫn không hoạt động đối với DNA mạch đôi và các sợi DNA có đầu hydroxyl 3' bị chặn bởi quá trình phosphoryl hóa hoặc acety hóa.

Đặc trưng

Không có exonuclease còn sót lại (sợi đôi), endonuclease hoặc RNase

Bị bất hoạt chỉ bằng cách xử lý ở 80°C trong 15 phút

Ứng dụng

Loại bỏ các đoạn mồi đơn khỏi hệ thống phản ứng PCR trước khi giải trình tự DNA Sanger hoặc phân tích SNP

Loại bỏ các đoạn mồi đơn khỏi hệ thống phản ứng PCR lồng nhau

Loại bỏ DNA mạch đơn tuyến tính khỏi mẫu, để lại DNA mạch đôi

Thông số kỹ thuật

Thành phần

Vận chuyển và lưu trữ

Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25 ~ -15℃ trong 2 năm.

Các con số

Hình 1. Khả năng tiêu hóa của Exonuclease I trên DNA sợi đơn

Lưu ý: Trong hệ thống phản ứng 20 μL, nồng độ cuối cùng là 15 pmol/μL chất nền DNA sợi đơn đã được thêm vào. Các lượng khác nhau (0,63, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 U) Yeasen's và Exonuclease I của Nhà cung cấp A đã được sử dụng và ủ ở 37°C trong 15 phút, sau đó là bất hoạt nhiệt ở 80°C trong 15 phút. Điện di gel polyacrylamide đã được sử dụng để phát hiện sự phân hủy của DNA sợi đơn. Kết quả chứng minh rằng YeasenExonuclease I của Supplier A có khả năng tiêu hóa DNA mạch đơn giống như Supplier A.

Tài liệu:

Bảng dữ liệu an toàn

14535_MSDS_Phiên bản EN20241210.pdf

Hướng dẫn sử dụng

14535_Hướng dẫn sử dụng_Phiên bản EN20241210.pdf