Sự miêu tả
ArCas12a, có nguồn gốc từ hệ thống CRISPR của Agathobacter trực tràng vi khuẩn và còn được gọi là Cpf1, là một protein đơn phân gồm 1263 axit amin. Là thành viên lớp II (loại V) của hệ thống CRISPR/Cas, ArCas12a hoạt động chỉ thông qua một protein hiệu ứng duy nhất và thể hiện sự khác biệt đáng kể so với Cas9, chẳng hạn như nhắm mục tiêu vào các họa tiết giàu T, không yêu cầu crRNA hoạt hóa trans, tạo ra các đầu dính khi đứt sợi đôi DNA, tham gia vào quá trình xử lý RNA và sở hữu hoạt động của nuclease DNA.
ArCas12a thiếu miền HNH và có thể sử dụng miền RuvC của nó một cách độc lập để nhận ra vùng PAM giàu thymine (T) ở đầu 5' của axit nucleic mục tiêu dưới sự hướng dẫn của RNA CRISPR (crRNA), bắt đầu cắt DNA mục tiêu. Nó đã được sử dụng thành công để chỉnh sửa bộ gen ở nhiều loài động vật có vú và thực vật. Ngoài ra, ArCas12a thể hiện hoạt động cắt xuyên, có khả năng cắt DNA sợi đơn (ssDNA) không phải mục tiêu một cách bừa bãi trong hệ thống phản ứng.
So với các LbCas12a/AsCas12a khác, ArCas12a thể hiện khả năng thích ứng nhiệt độ cao hơn (25-55ôiC), khiến nó phù hợp cho các ứng dụng chỉnh sửa bộ gen và phát hiện axit nucleic.
Đặc trưng
Phạm vi nhiệt độ phản ứng rộng: Thể hiện hoạt động phân cắt trong phạm vi nhiệt độ từ 25-55ôiC
Dư lượng nuclease thấp: Không có exonuclease, nickase hoặc RNase còn sót lại
Hoạt động phân cắt cis: Phân cắt DNA sợi đôi hiệu quả cao trong ống nghiệm
Hoạt động xuyên phân cắt: Hoạt động cắt xuyên gen cao, thích hợp để phát hiện axit nucleic
Ứng dụng
Chỉnh sửa gen CRISPR/Cas
Chẩn đoán và phát hiện dựa trên hệ thống CRISPR/Cas
Các ứng dụng phát hiện khác kết hợp với công nghệ khuếch đại axit nucleic đẳng nhiệt (RPA và LAMP), v.v.
Thông số kỹ thuật
| Nguồn | Gen Cpf1 từ Agathobacter trực tràng được thể hiện thông qua biểu hiện tái tổ hợp trong Vi khuẩn E.coli |
| Trọng lượng phân tử | 149 KDa |
| Trình tự PAM | TTTN hoặc TTTV |
| Điều kiện phản ứng | 50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, pH 7.9 @25ôiC |
| Sự tập trung | 10 µM |
| Độ tinh khiết | >95% (TRANG SDS) |
| Điều kiện bất hoạt | 85ôiC, 5-10 phút |
Thành phần
| Thành phần KHÔNG. | Tên | 14702ES65 | 14702ES80 |
| 14702-A | Nuclease ArCas12a (10 μTôi) | 100 μL | |
| 14702-B | 10×Đệm phản ứng ArCas12a | 1mL | 1mL |
Vận chuyển và lưu trữ
Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25 ~ -15ôiC trong 2 năm.
Các con số
Nhân vật 1. Kiểm tra hoạt động cắt cis của ArCas12a: M: Đánh dấu; C: DNA sợi đôi khuôn mẫu (dsDNA)
Ghi chú: Dưới sự hướng dẫn của crRNA, nó có thể cắt hiệu quả dsDNA (600 bp) để tạo ra hai đoạn (200 bp + 400 bp).
Nhân vật 2. Kết quả thử nghiệm hoạt động cắt xuyên gen ArCas12a
Ghi chú: Sử dụng dsDNA làm mục tiêu, ArCas12a, crRNA và một đầu dò báo cáo ssDNA (chứa một nhóm báo cáo huỳnh quang) được thêm vào để cắt trong ống nghiệm. Khi ArCas12a tạo thành phức hợp với crRNA và DNA mục tiêu, nó kích hoạt hoạt động cắt xuyên, cắt đầu dò báo cáo ssDNA, do đó phát ra huỳnh quang.
Tài liệu:
Bảng dữ liệu an toàn
14702_MSDS_Phiên bản EN20241205.pdf
Hướng dẫn sử dụng
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.