Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) là bộ PCR định lượng multiplex dựa trên RNA làm khuôn mẫu. Trong quá trình thí nghiệm, phiên mã ngược và PCR định lượng được thực hiện trong cùng một ống, giúp đơn giản hóa thao tác thí nghiệm và giảm nguy cơ nhiễm bẩn.

Trong bộ dụng cụ này, cDNA sợi đầu tiên được tổng hợp hiệu quả bằng Hifair™ chịu nhiệt Phiên mã ngược và được khuếch đại định lượng bởi UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. Bộ dụng cụ chủ yếu chứa đệm MP được tối ưu hóa, hỗn hợp enzyme. Dung dịch đệm đã chứa Mg²⁺ và hỗn hợp dNTP. Ngoài ra, các yếu tố có thể ức chế hiệu quả quá trình khuếch đại PCR không đặc hiệu và cải thiện hiệu quả khuếch đại của nhiều phản ứng qPCR được thêm vào, có thể đảm bảo hiệu quả khuếch đại và thực hiện tối đa nhiều phản ứng khuếch đại. Hệ thống dUTP/UDG được thêm vào để ngăn ngừa hiệu quả nguy cơ ô nhiễm khí dung.

Tính năng

Đặc trưng

1. Gtính linh hoạt cao: Thích hợp cho việc khuếch đại qPCR và phát hiện axit nucleic của vi sinh vật gây bệnh, bộ gen người, thực vật và các loài khác.

2. Độ nhạy cao: Hệ thống đệm được tối ưu hóa cẩn thận giúp cải thiện độ nhạy phát hiện của các mẫu có nồng độ thấp lên đến 250 bản sao/mL.

3. Hệ thống dUP/UDG: Hệ thống chống ô nhiễm dUTP/ UDG không chịu nhiệt được giới thiệu để phân hủy ô nhiễm khí dung của sản phẩm một cách hiệu quả, giảm kết quả dương tính giả và đảm bảo kết quả xác thực.

4. Ủng hộđang chương trình nhanh: tương thích với chương trình nhanh 40 phút.

5. Độ ổn định cao: chuồng ngựavà ở nhiệt độ 37℃ trong 14 ngày, đông lạnh và rã đông lặp lại 10 lần.

Thông số kỹ thuật

Thành phần

Ghi chú: 1) 5×Hifair™ MP Buffer là viết tắt của Hifair™ Bộ đệm thăm dò RT-qPCR một bước đa kênh cao cấp, bao gồm dNTP, dUTP, Mg²⁺, chất ổn định và nhiều hơn nữa.

2) Hifair™ Hỗn hợp Enzym chủ yếu chứa Hifair™ enzyme phiên mã ngược, UNICON™ HotStart Taq DNA polymeras, chất ức chế RNase, Và UDGase, v.v.

Kho

Sản phẩm phải được bảo quản ở nhiệt độ -25℃ ~ -15℃ trong vòng 1 năm. Tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần.

Hướng dẫn

1. Thành phần phản ứng:

Ghi chú：Đảm bảo trộn đều trước khi sử dụng, tránh tạo ra nhiều bọt khí do rung động mạnh.

Một) Nồng độ mồi: Mồi trộn bao gồm mồi đa năng, tùy thuộc vào tình huống, nồng độ mồi tối ưu có thể nằm trong khoảng từ 0,1 đến 1,0 μM.

b) Nồng độ đầu dò: Hỗn hợp đầu dò bao gồm nhóm huỳnh quang khác biệt về nhãn đầu dò đa kênh, tùy thuộc vào tình huống, nồng độ đầu dò tối ưu có thể nằm trong khoảng từ 0,05 đến 0.5 μM.

c) Pha loãng mẫu: qPCR có độ nhạy cao và nên pha loãng mẫu. Giá trị Ct kiểm soát phù hợp trong khoảng từ 20 đến 35.

ngày) Chuẩn bị hệ thống: mở đầu bằng bộ lọc. Tránh ô nhiễm chéo và ô nhiễm khí dung.

2. Giao thức đạp xe được tối ưu hóa

(1) Quy trình khuếch đại chuẩn

Ghi chú：

a) Phiên mã ngược: Nhiệt độ có thể lựa chọn 50°C hoặc 55°C trong 10-15 phút.

b) Phản ứng khuếch đại: Nhiệt độ được điều chỉnh theo giá trị Tm của các đoạn mồi được thiết kế.

c) Thu tín hiệu huỳnh quang: Vui lòng thiết lập quy trình thử nghiệm theo yêu cầu của dụng cụ thủ công.

(2) Chương trình khuếch đại nhanh

Ghi chú：Nếu máy dò qPCR thực tế hỗ trợ khuếch đại nhanh, vui lòng thực hiện thử nghiệm trước để xác nhận.

3. Thiết bị ứng dụng

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Nhanh, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 và 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Chiến lược MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Sinh học Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 giây;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；

Roche Khoa học ứng dụng LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；

Nhiệt độ Máy lắc PikoReal Cycler khoa học; Cepheid SmartCycler®; Ánh sáng qPCR sinh thái; LẬP TRÌNH 96S, 96P.

Ghi chú

Vui lòng mặc đồ bảo hộ cá nhân cần thiết, chẳng hạn như áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay, để đảm bảo sức khỏe và sự an toàn của bạn！

Vui lòng sử dụng vật tư tiêu hao RNasefree vì thí nghiệm.

Sản phẩm này dành cho nghiên cứu chỉ sử dụng！