Các Từ tính Dư ADN Vật mẫu Bộ dụng cụ chuẩn bị là thích hợp vì cái tiền xử lý của dư ADN TRONG nhiều sinh học mẫu. Nó có thể tối đa hóa việc tách và tinh chế lượng vết DNA còn sót lại của tế bào chủ trong mẫu bằng cách sử dụng các hạt từ tính độc đáo và cẩn thận hệ thống đệm tối ưu.

Từ tính Bộ dụng cụ chuẩn bị mẫu DNA còn sót lại có thể được sử dụng với nhiều loại DNA còn sót lại của tế bào chủ bộ dụng cụ phát hiện, bao gồm Bộ dụng cụ phát hiện dư lượng DNA tế bào chủ CHO (Cat#41301ES), Bộ dụng cụ phát hiện dư lượng DNA tế bào chủ HEK293 (Mã số # 41302ES), Bộ phát hiện dư lượng DNA tế bào chủ Vero (Mã số: 41303ES), và Bộ phát hiện dư lượng DNA tế bào chủ E.coli (Mã số: 41304ES).

Thành phần sản phẩm

Vận chuyển và lưu trữ

1. Phần I được vận chuyển cùng với một túi đá, 4°C trong 1 năm hoặc -20°C để bảo quản lâu dài.

2. Phần II được vận chuyển ở nhiệt độ phòng và được bảo quản trong 1 năm ở nhiệt độ phòng.

3. Phần III được vận chuyển bằng đá khô và bảo quản ở nhiệt độ -20°C trong 1 năm.

4. Sau khi nhận hàng, vui lòng kiểm tra xem ba thành phần Phần I, Phần II và Phần III đã đầy đủ chưa và lưu trữ chúng ở nhiệt độ bảo quản tương ứng ngay lập tức.

Thận trọng

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn sử dụng trước khi sử dụng và vận hành theo đúng hướng dẫn sử dụng. Khuyến cáo nên thực hiện xử lý mẫu trên băng ghế sạch hoặc tủ an toàn sinh học.

2. Chú ý quan sát xem dung dịch bảo quản ở nhiệt độ phòng có bị kết tủa hay đục không (nhất là khi nhiệt độ phòng xuống thấp như mùa đông), có thể pha với nước ở nhiệt độ 37°C cho đến khi dung dịch trong suốt để tránh ảnh hưởng đến hiệu quả sử dụng.

3. Có thể có các hạt từ tính còn sót lại trong quá trình rửa giải, vì vậy hãy cố gắng tránh hút các hạt từ tính khi lấy mẫu.

4. Vui lòng thay đầu bút thường xuyên để tránh lây nhiễm chéo khi sử dụng sản phẩm này.

5. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc thiết bị bảo vệ cá nhân (PPE), chẳng hạn như áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần, khi sử dụng sản phẩm này.

6. Sản phẩm này CHỈ dùng cho mục đích nghiên cứu!

Chuẩn bị trước

1. Thiết bị tự cung cấp: máy lắc xoáy, bể nước hoặc bể kim loại, máy ly tâm, giá tách từ, máy chiết xuất axit nucleic tự động Hangzhou Aosheng Auto-Pure32A hoặc các thương hiệu máy chiết xuất axit nucleic hoàn toàn tự động khác.

2. Vật tư tiêu hao tự cung cấp: 10μL-1000μL đầu lọc hấp phụ thấp, ống ly tâm hấp phụ thấp 1,5 mL, ống PCR hoặc đĩa 96 giếng và nắp ống hoặc màng tương ứng.

3. Thuốc thử tự pha chế: ethanol tuyệt đối (loại phân tích), 1× đệm PBS (pH 7,4, không chứa ion Mg và Ca), nước siêu tinh khiết.

4. Đối với lần sử dụng đầu tiên, thêm etanol khan theo thể tích ghi trên nhãn hoặc trong hướng dẫn vào các chai Dung dịch giặt A* và Dung dịch giặt B*, Trộn đều trước khi sử dụng và đánh dấu cẩn thận. Đậy chặt nắp chai sau khi sử dụng để duy trì mức ethanol trong chai.

Chiết xuất DNA còn sót lại thủ công

1. Xử lý mẫu

1.1 Nếu mẫu có chứa hàm lượng DNA tương đối cao, chẳng hạn như vắc-xin, vui lòng pha loãng theo tỷ lệ thích hợp với dung dịch đệm PBS 1× (pH 7.4, không chứa ion Mg và Ca) và sau đó chiết xuất (pha loãng mẫu để làm cho giá trị phát hiện nằm trong phạm vi tuyến tính của đường chuẩn và sau đó đảm bảo độ chính xác của phát hiện. và thường có thể cân nhắc pha loãng gấp 100 lần).

1.2 Nếu mẫu cần thử nghiệm là bột khô, pha loãng nó thành 10 mg/mL hoặc 100 mg/mL với nước siêu tinh khiết trước khi sử dụng.

1.3 Nếu mẫu có ma trận phức tạp, cần thực hiện thí nghiệm thêm chuẩn và thu hồi để xác định độ pha loãng thích hợp.

2. Thêm 100 μL mẫu vào ống 1,5 mL, sau đó thêm 100 μL đệm ly giải, 10 μL proteinase K, lắc mạnh và trộn trong 10 giây.

[Lưu ý]: Thêm 10 μL proteinase K nếu nồng độ mẫu protein là 0-100 mg/mL và thêm 20 μL proteinase K nếu nồng độ mẫu protein là 100-200 mg/mL.

3. Ủ ở nhiệt độ 60°C trong 20 phút.

4. Sau đó thêm 400 μL của dung dịch liên kết, 9 μL glycogen và 6 μL muối kali Poly A, lắc đều.

5. Thêm 20 μL hạt từ tính, lắc và trộn đều, để yên trong 10 phút. Vui lòng lắc và trộn trong 10 giây cứ 3 phút một lần.

[Lưu ý]: Hạt từ tính cần được xoáy trước khi sử dụng để đảm bảo hạt từ tính được tái huyền phù hoàn toàn. Sau khi thêm mẫu 4-5 lần cùng một lúc, nên trộn lại.

7. Ly tâm trong thời gian ngắn để lấy dung dịch xuống, và đặt ống ly tâm lên giá từ trong 1-2 phút. Sau khi các hạt từ được hấp thụ hoàn toàn, hãy cẩn thận loại bỏ chất lỏng.

8. Thêm 500 μL dung dịch rửa A (vui lòng kiểm tra xem có thêm etanol tuyệt đối trước khi sử dụng hay không), lắc hoặc khuấy để đảm bảo các hạt từ được phân tán và không có hạt từ nào tụ lại trên thành ống ly tâm.

9. Ly tâm trong thời gian ngắn và đặt ống ly tâm lên giá từ trong 1-2 phút. Sau khi các hạt từ được hấp thụ hoàn toàn, hãy cẩn thận loại bỏ chất lỏng.

10. Thêm 500 μL dung dịch rửa B (vui lòng kiểm tra xem đã thêm ethanol tuyệt đối chưa trước khi sử dụng), lắc hoặc khuấy để trộn đều nhằm đảm bảo các hạt từ được phân tán đều và không có hạt từ nào bám trên thành ống ly tâm.

11. Ly tâm trong thời gian ngắn và đặt ống ly tâm lên giá từ trong 1-2 phút. Sau khi các hạt từ được hấp thụ hoàn toàn, hãy cẩn thận loại bỏ chất lỏng.

12. Để đảm bảo loại bỏ được càng nhiều chất lỏng còn lại càng tốt, hãy ly tâm ống trong 10 giây. nhanh chóng đặt nó lên giá từ tính và sử dụng pipet 10 μL để hút chất lỏng còn lại.

13. Mở nắp ống và để ở nhiệt độ phòng trong 3 phút cho đến khi etanol bay hơi hoàn toàn. Không có phản xạ hoặc vết nứt xuất hiện trên bề mặt của hạt từ tính cho thấy etanol đã bay hơi hoàn toàn.

14. Lấy ống ra khỏi giá từ, thêm 50-100 μL dịch rửa giải đã được làm ấm trước ở 65°C, lắc và trộn đều. Sau đó ly tâm trong thời gian ngắn, ủ ở 65°C trong 5 phút, lắc và trộn một lần sau mỗi 2-3 phút.

15. Ly tâm lại trong thời gian ngắn, đặt ống ly tâm lên giá từ trong 2 phút. Sau khi các hạt từ được hấp thụ hoàn toàn, hãy cẩn thận chuyển dung dịch DNA sang ống ly tâm mới và bảo quản ở nhiệt độ -20°C hoặc ở nhiệt độ -80°C để bảo quản lâu dài.