Bộ chất nền phát quang hóa học ECL nâng cao được thiết kế để phát hiện kháng thể và kháng nguyên liên quan được gắn nhãn trực tiếp hoặc gián tiếp bằng peroxidase cải ngựa (HRP). Nguyên lý của Bộ chất nền phát quang hóa học ECL nâng cao là protein hoặc axit nucleic được chuyển đến màng in sau khi điện di và các protein mục tiêu trên màng được liên kết bởi kháng thể chính và kháng thể thứ cấp được gắn nhãn bằng HRP hoặc axit nucleic trên màng được liên kết trực tiếp hoặc gián tiếp bằng các đầu dò được gắn nhãn bằng HRP. Sau khi rửa màng, dung dịch làm việc ECL do sản phẩm chuẩn bị được sử dụng để ủ màng ở nhiệt độ phòng trong vài phút. Màng in được bọc bằng màng bọc thực phẩm và cố định vào băng tiếp xúc tia X. Sau đó, phim X-quang được ép lên màng trong phòng tối và phơi sáng trong vài giây đến vài giờ. Sau khi tráng và cố định, các dải protein hoặc axit nucleic có thể được hiển thị rõ ràng trên phim X-quang.

Bộ dụng cụ này có hệ thống nền phát quang độc đáo, giảm nền phơi sáng đồng thời đưa vào chất oxy hóa mới giúp cải thiện đáng kể độ ổn định của bộ dụng cụ, cho phép bộ dụng cụ ổn định ở nhiệt độ phòng trong tối đa một năm. Ngoài tia X, quét CCD huỳnh quang cũng có thể được sử dụng trực tiếp chủ yếu để phát hiện WB và hệ thống phát hiện miễn dịch phát quang hóa học.

Đặc trưng

Độ nhạy cao và tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu cao, nó có thể phát hiện kháng nguyên có cấp độ chọn lọc trung bình.

Tỏa sáng nhanh và rực rỡ, dải phim in có thể quan sát được dưới đèn huỳnh quang.

Đặc biệt thích hợp để phát hiện mục tiêu có hàm lượng protein cao hơn, mẫu protein thông thường.

Chất oxy hóa mới, ổn định ở nhiệt độ phòng trong thời gian lên đến một năm.

Ứng dụng

ELISA phát quang hóa học

Western Blot

Chấm Blot-DNA/RNA

Southern blot-DNA

RNA blot phía bắc

Thông số kỹ thuật

Thành phần

Vận chuyển và lưu trữ

Sản phẩm được vận chuyển ở nhiệt độ phòng và có thể bảo quản ở nhiệt độ phòng trong một năm. Nếu không sử dụng trong thời gian dài, khuyến cáo nên bảo quản ở nhiệt độ 2℃~8℃ để gia hạn thời hạn hiệu lực.

Lưu ý: 36222-A phải được bảo quản tránh xa ánh sáng!

Hướng dẫn (ví dụ phim chụp X-quang)

1. Điện di thường quy, màng chuyển, kháng thể gắn nhãn HRP hoặc đầu dò axit nucleic gắn nhãn HRP, ủ và màng rửa.

Lưu ý: Dung dịch phát quang ECL là chất nền màu của HRP, do đó hệ thống phát hiện phải dựa trên kháng thể gắn nhãn enzyme HRP hoặc đầu dò axit nucleic.

2. Cùng thời điểm rửa màng lần cuối, chuẩn bị dung dịch làm việc phát quang mới (100-200 μL dung dịch làm việc phát quang/cm2 màng): lấy cùng một thể tích thuốc thử A và B, trộn đều để sử dụng sau.

Lưu ý: Thuốc thử A và thuốc thử B phải sử dụng các đầu khác nhau. Nên sử dụng chất lỏng làm việc ngay lập tức. Vẫn có thể sử dụng sau vài giờ ở nhiệt độ phòng, nhưng độ nhạy giảm đôi chút.

3. Dùng nhíp phẳng lấy màng ra, đặt lên giấy lọc để ráo dung dịch, không làm màng khô hoàn toàn. Ngâm màng hoàn toàn trong dung dịch làm việc phát quang, tiếp xúc đủ với dung dịch làm việc phát quang. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 1-2 phút và chuẩn bị tiếp xúc với viên thuốc ngay lập tức.

4. Nhấc màng bằng nhíp và đặt lên giấy lọc để loại bỏ chất lỏng làm việc phát quang. Nhưng không rửa sạch chất lỏng phát quang.

5. Trải một miếng màng bọc thực phẩm lớn hơn màng lên bề mặt bên trong của tấm che phim X-quang. Dán màng in vào màng bọc thực phẩm, gấp màng bọc thực phẩm hoàn toàn xung quanh màng in, loại bỏ bọt khí và gấp lại, có thể cắt bỏ phần mép màng bọc thực phẩm thừa. Dùng giấy lọc để hút hết chất lỏng làm việc phát sáng thừa. Cố định màng bọc thực phẩm phủ lên màng in trong tấm che bằng băng dính, với dải protein hướng lên trên.

6. Lấy một mảnh phim X-quang từ phòng tối và đặt lên màng bọc. Phim được ép và phơi sáng trong 30 giây - 2 phút. Sau đó, phim được tráng và cố định.

Lưu ý: Thời gian phơi sáng phải được điều chỉnh theo cường độ phơi sáng.Nếu nền quá cao, hãy sử dụng hai phim X-quang cùng một lúc.

Các phương pháp phơi sáng khác

Nếu sử dụng chụp ảnh CCD: màng có thể được đặt trong chất lỏng làm việc, sau khi khởi động theo hướng dẫn sử dụng, loại bỏ phim, chụp ảnh. Ngoài ra, các thông số đo lường của máy có thể được điều chỉnh theo tình hình để cải thiện tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu.

Ghi chú

1. Cần tránh tạo bọt khí trong quá trình chuyển màng, niêm phong và ủ. Ngoài ra, đeo găng tay sẽ tránh để lại dấu vân tay trên màng và giữ màng sạch sẽ.

2. Tiếp xúc kéo dài hoặc quá nhiều protein sẽ làm sâu nền và làm cho sự thay đổi cường độ dải mất đi mối quan hệ tuyến tính. Tiếp xúc thiếu sẽ làm mờ các dải.

3. Một số màng bọc nhựa có thể làm tắt huỳnh quang khi bọc màng in. Nên chọn màng bọc nhựa chất lượng cao.

4. Tránh đặt nhiều màng vào cùng một hộp màng rửa vì sự hấp phụ hoặc ma sát lẫn nhau có thể gây ra nền sâu.

5. Vị trí và kích thước của các dải trên phim có thể được xác định chính xác bằng cách sử dụng các dấu hiệu protein nhuộm màu có thể nhìn thấy được và các thẻ chụp ảnh tự động huỳnh quang.

6. Sử dụng hệ thống biotin-avidin và tránh sử dụng chất đóng sữa vì có thể khiến nồng độ nền quá cao.

7. Các hạt oxit kim loại có thể gây ra các đốm dạng hạt trên màng. Tránh sử dụng kéo và nhíp gỉ sét. Sử dụng nhíp phẳng bằng nhựa.

8. Natri azit (NaN3) có thể ức chế hoạt động của HRP, nếu phục hồi đầu dò hoặc kháng thể được đánh dấu HRP thì nên tránh sử dụng NaN3, nếu cần thiết thì không quá 0,01%.

9. Sản phẩm này không có độc tính đặc biệt theo phương pháp xử lý hóa học thông thường.

10. Vui lòng mặc PPE cần thiết, chẳng hạn như áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay, để đảm bảo sức khỏe và sự an toàn của bạn！

11. Chỉ sử dụng cho mục đích nghiên cứu!

Tài liệu:

Bảng dữ liệu an toàn

36222-A-MSDS-CN20250110

36222-B-MSDS-CN20250110

Hướng dẫn sử dụng

36222_Hướng dẫn sử dụng_HB221212_VN

Trích dẫn & Tài liệu tham khảo:

[1] He X, Li J, Zhou G, et al. Cổng nhịp điệu hồi hải mã và trí nhớ bằng tính dẻo của khớp thần kinh trong các tế bào thần kinh trung gian ức chế. Neuron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)

[2] Wang X, Zhang S, Jin D, et al. Chất chủ vận thụ thể μ-opioid tạo điều kiện cho sự hình thành tế bào khối u lưu thông trong ung thư bàng quang thông qua con đường MOR/AKT/Slug: một nghiên cứu toàn diện bao gồm thử nghiệm có đối chứng ngẫu nhiên.Cancer Commun (Lond). 2023;43(3):365-386. doi:10.1002/cac2.12408(IF:16.2)

[3] Li Y, Zhou S, Song H, Yu T, Zheng X, Chu Q. Các hạt nano CaCO3 kết hợp với KAE để cho phép liệu pháp điều trị ung thư quá tải canxi khuếch đại. Vật liệu sinh học. 2021;277:121080. doi:10.1016/j.biomaterials.2021.121080(IF:12.479)

[4] Xu Z, Xu J, Sun S, et al. Mecheliolide gây ra cái chết tế bào miễn dịch do ERS trung gian ROS trong ung thư biểu mô tế bào gan. Redox Biol. 2022;54:102351. doi:10.1016/j.redox.2022.102351(IF:11.799)

[5] Cai Z, Zhang Y, Zhang W, et al. Sự giữ lại asen trong hồng cầu và thực bào hồng cầu quá mức có liên quan đến tình trạng selen thấp do rối loạn cân bằng oxy hóa khử. Redox Biol. 2022;52:102321. doi:10.1016/j.redox.2022.102321(IF:11.799)

[6] Kaushik AC, Wu Q, Lin L, et al. Hồ sơ ncRNA exosomal của nhiễm trùng mycobacteria đã xác định miRNA-185-5p là một dấu ấn sinh học mới cho bệnh lao. Tóm tắt Bioinform. 2021;22(6):bbab210. doi:10.1093/bib/bbab210(IF:11.622)

[7] Hu P, Li H, Sun W, et al. Rối loạn lysosome liên quan đến cholesterol gây ra cái chết tế bào của bệnh ác tính về huyết học: Phân tích động về tác dụng gây độc tế bào của LW-218. Acta Pharm Sin B. 2021;11(10):3178-3192. doi:10.1016/j.apsb.2021.02.004(IF:11.614)

[8] Wang X, Ni J, You Y, et al. Cảm biến LPS qua trung gian SNX10 gây ra rối loạn chức năng hàng rào ruột thông qua chuỗi tín hiệu phụ thuộc caspase-5. EMBO J. 2021;40(24):e108080. doi:10.15252/embj.2021108080(IF:11.598)

[9] Jiang K, Chen H, Fang Y, et al. ANGPTL1 ngoại bào làm giảm di căn gan ung thư đại tràng bằng cách điều chỉnh mô hình tiết tế bào Kupffer và ngăn chặn rò rỉ mạch máu do MMP9 gây ra. J Exp Clin Cancer Res. 2021;40(1):21. Xuất bản ngày 7 tháng 1 năm 2021. doi:10.1186/s13046-020-01816-3(IF:11.161)

[10] Zhang S, Yang Z, Bao W, et al. SNX10 (phân loại nexin 10) ức chế sự khởi phát và tiến triển của ung thư đại tràng bằng cách kiểm soát sự thoái hóa tự thực của SRC. Tự thực. 2020;16(4):735-749. doi:10.1080/15548627.2019.1632122(IF:11.059)

[11] Liu L, Liang L, Yang C, Zhou Y, Chen Y. Các túi ngoại bào của Fusobacterium nucleatum làm tổn hại hàng rào ruột thông qua việc nhắm mục tiêu vào con đường chết tế bào do RIPK1 làm trung gian. Vi khuẩn đường ruột. 2021;13(1):1-20. doi:10.1080/19490976.2021.1902718(IF:10.245)