Protein tự nhiên A là một protein bề mặt thành tế bào được tìm thấy trong Staphylococcus aureus, nó tương tự như protein G được phân lập từ chi G hoặc C Streptococcus, liên kết hầu hết động vật có vú kháng thể IgG qua tương tác chủ yếu với cái Câu lạc bộ vùng đất của immunoglobulin (Ig), nhưng khác nhau về tính đặc hiệu liên kết của chúng. Nó có thể được sử dụng để tách và tinh chế nhiều loại kháng thể (kháng thể đơn dòng và kháng thể đa dòng). Protein A và Protein G khác nhau về tính chất liên kết của chúng với các phân lớp immunoglobulin khác nhau (xem Phụ lục 1 để biết chi tiết).
Sản phẩm này sử dụng protein A biến đổi gen, không chỉ duy trì đặc tính ái lực Ig của nó mà còn loại bỏ miền liên kết không chính của chính protein tự nhiên để giảm liên kết không đặc hiệu. SuRi rProtein A Agarose Resin, là gel agarose liên kết chéo cao làm chất nền và protein A tái tổ hợp kháng kiềm được biến đổi làm phối tử, có độ ổn định lý hóa cao. Kháng thể có độ tinh khiết cao có thể thu được từ các mẫu dịch cổ trướng, huyết thanh và môi trường nuôi cấy bằng sắc ký ái lực một bước với sản phẩm này, rất tiện lợi khi sử dụng và được sử dụng rộng rãi.

Thành phần

Thông số kỹ thuật

Vận chuyển Và Kho

Sản phẩm được vận chuyển kèm túi đá.   Có thể bảo quản ổn định ở nhiệt độ 2~8℃ trong 5 năm.

Hướng dẫn

1. Chuẩn bị đệm

Người ta khuyến cáo rằng sau đây đệm được lọc bằng màng lọc 0,22 μm hoặc 0,45 μm trước khi sử dụng. Đệm cân bằng/liên kết/rửa: NaCl 0,15 M, 20 mM Na2 HPO4, pH 7.0

Đệm rửa giải: 0,1 M glycine, pH 3,0

Đệm trung hòa: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Chuẩn bị mẫu

Đảm bảo cái đó cái vật mẫu giải pháp có cái phù hợp ion sức mạnh Và độ pH trước đang tải cái cột, hoặc qua pha loãng mẫu huyết thanh, dịch cổ trướng hoặc dung dịch nuôi cấy tế bào bằng dung dịch liên kết/rửa hoặc bằng cách thẩm phân mẫu bằng đệm liên kết/rửa.

3. Đóng gói cột

Tải SuRi rProtein MỘT Nhựa Agarose vào cột sắc ký phù hợp, chú ý tránh tạo bọt.

4. Làm sạch mẫu

1) Cân bằng: Cột sắc ký là cân bằng với một ràng buộc Bộ đệm của 5 lần cái cột âm lượng, Vì thế cái đó đóng gói nằm trong cùng một hệ thống đệm như protein mục tiêu và đóng vai trò bảo vệ protein.

2) Vật mẫu đang tải: Các vật mẫu đã từng là đã tải ĐẾN cái cân bằng tốt protein MỘT Agarose Nhựa ĐẾN đảm bảo đầy liên hệ giữa protein mục tiêu và nhựa, cải thiện khả năng phục hồi tỷ lệ protein mục tiêu và thu thập nước thải để được thử nghiệm.

3) Giặt: Giặt bằng 10-15 lần cột âm lượng của rửa Bộ đệm, di dời cái tạp chất chất đạm Trừ khi được hấp phụ cụ thể, thu thập dung dịch rửa.

4) Giải hấp: Giải hấp với 5-10 lần cột âm lượng của sự rửa trôi Bộ đệm, sưu tầm dung môi rửa giải, cái đó là, cái mục tiêu chất đạm thành phần.

5) Vệ sinh CIP Và sự bảo tồn: Nói chung là sử dụng 0,1-0,5 Tôi NaOH lớn hơn 3CV, và cái liên hệ thời gian là 15 phút; Sau đó rửa sạch bằng dung dịch cân bằng 5CV cho đến khi trung tính. Cuối cùng, nó là cân bằng với 20% etanol của 5 lần cột âm lượng, Và sau đó được lưu trữ  TRONG 20%  etanol  của cái  như nhau  âm lượng  Tại  4°C  ĐẾN  ngăn chặn  cái  đóng gói  từ  hiện tại bị nhiễm khuẩn.

5. Phát hiện SDS-PAGE

Các mẫu đã thu được TRONG cái sự thanh lọc quá trình (bao gồm nguyên bản mẫu, nước thải thành phần, rửa Và các thành phần rửa giải, v.v.) được phát hiện bằng SDS-PAGE để xác định hiệu quả tinh chế.

Ghi chú

1. Không cho sản phẩm vào tủ lạnh.
2. Nhựa rProteinAAgarose phải được đảo ngược hoàn toàn nhiều lần trước khi sử dụng để nhựa agarose được trộn đều.
3. Trong suốt quá trình thực hiện, mẫu cần được xử lý ở nhiệt độ 4°C hoặc trên đá.
4. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần khi thao tác.
5. Chỉ sử dụng cho mục đích nghiên cứu.

Bảng đính kèm 1: Tóm tắt khả năng liên kết củaf protein A và G đến Ig trong khác nhau giống loài

SuRi rProtein Một Agarose Nhựa