UltraNuclease, còn được gọi là endonuclease không hạn chế, nuclease phổ rộng, là một endonuclease không đặc hiệu có nguồn gốc từ Serratia Marcescen, thủy phân các liên kết phosphodiester nội bộ giữa bất kỳ nucleotide nào trong axit nucleic để tạo ra oligonucleotide 5'-monophosphate dài 2-5 bazơ. Nó có thể phân hủy DNA và RNA ở nhiều dạng khác nhau (sợi đôi, sợi đơn, tuyến tính, vòng, tự nhiên hoặc biến tính) trong một phạm vi rất rộng các điều kiện (Urea 6 M, Guanidine HCl 0,1 M, Triton X-100 0,4%, SDS 0,1%, EDTA 1 mM, PMSF 1 mM) và được sử dụng rộng rãi để loại bỏ axit nucleic khỏi các sản phẩm sinh học. UltraNuclease cũng có thể được loại bỏ bằng các phương pháp tương ứng sau đó.

Bộ dụng cụ này sử dụng nguyên lý của xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme dạng sandwich kháng thể kép (sandwich ELISA) để phát hiện các chất còn lại của UltraNuclease biến tính và không biến tính. Đầu tiên, phủ lên vi đĩa một kháng thể đa dòng thỏ kháng UltraNuclease để tạo thành kháng thể pha rắn. Thứ hai, thêm chuẩn UltraNuclease và mẫu thử vào vi đĩa kháng thể pha rắn, sau đó thêm kháng thể đa dòng kháng UltraNuclease gắn nhãn biotin và cuối cùng, thêm streptavidin gắn nhãn peroxidase cải ngựa (SA-HRP) để tạo thành phức hợp kháng thể + kháng nguyên + kháng thể-Biotin + SA-HRP. Sau đó, chất nền TMB được thêm vào phức hợp để quan sát phản ứng màu sau khi rửa phức hợp. TMB được chuyển thành màu xanh lam dưới sự xúc tác của enzyme HRP và cuối cùng chuyển thành màu vàng khi có mặt axit và sắc thái màu có tương quan tích cực với lượng UltraNuclease trong mẫu.

Phạm vi định lượng phát hiện của bộ dụng cụ này là 0,047-3 ng/mL; giới hạn phát hiện thấp hơn là 23,5 pg/mL.

Tính năng

• Độ nhạy cao: Phát hiện lượng dư UltraNuclease ít nhất là 23 pg/ml trong các mẫu sinh học trong quá trình và cuối cùng.
• Đảm bảo độ chính xác: Các chất dư của UltraNuclease có thể được phát hiện chính xác với độ thu hồi từ 80%-110%.
• Tính đặc hiệu: Hợp tác sử dụng với Yeasen UltraNuclease có thể phát hiện chính xác các chất còn sót lại.
• Ổn định: Sự khác biệt giữa các lô là thấp, tính chất của bộ dụng cụ không bị ảnh hưởng ở nhiệt độ 37℃ trong 6 ngày.
• Thu thập tín hiệu dễ dàng: Sử dụng hệ thống Biotin-Streptavidin, tín hiệu có thể được khuếch đại ổn định.
• Bộ sản phẩm hoàn chỉnh: Tất cả các thành phần chính đều được cung cấp trong bộ sản phẩm, tiết kiệm chi phí khi sử dụng.

Ứng dụng

• Xét nghiệm UltraNuclease còn sót lại trong các sản phẩm sinh học

Đặc điểm kỹ thuật

Thành phần

Vận chuyển và lưu trữ

Bộ xét nghiệm ELISA UltraNuclease được vận chuyển kèm theo một túi đá và có thể bảo quản ở nhiệt độ 2°C ~8°C. Sản phẩm chưa mở có giá trị trong một năm. Sau khi mở thuốc thử, thuốc thử có giá trị trong nửa năm. Không bao giờ đông lạnh sản phẩm này.

Bảo quản thuốc thử đã chuẩn bị:

1. Đệm rửa pha loãng và đệm pha loãng có thể được bảo quản ở nhiệt độ 2°C ~8°C trong 1 tuần

2. Chuẩn 36701-C là chất lỏng và được bảo quản ở nhiệt độ 2°C ~8°C trong 1 năm

3. Kháng thể phát hiện đã chuẩn bị và đệm dừng có thể được bảo quản ở nhiệt độ 2°C ~8°C trong 1 tháng

Các con số

• Biểu hiện tính đặc hiệu

Hình 1. Tính đặc hiệu của bộ xét nghiệm ELISA UltraNuclease được thể hiện ở hình trên.

8 mẫu giả được ước tính cho phản ứng không đặc hiệu với kháng thể trong bộ dụng cụ. Không có sự khác biệt đáng kể giữa 8 mẫu và mẫu âm tính. （*: Sự khác biệt đáng kể so với mẫu âm tính; NS: Không có sự khác biệt đáng kể so với mẫu âm tính）

• Màn hình hiển thị chính xác

MỘT)

B)

Hình 2. Độ chính xác của UCF.ME™ UltraNuclease ELISA được thử nghiệm như trên cơ chế.

6 bản sao được thử nghiệm ở mỗi nồng độ trên đường cong chuẩn và tất cả CV% đều thấp hơn 5% (Hình 2A). 3 nhà phân tích tiến hành thí nghiệm ELISA UCF.ME™ UltraNuclease và CV% thấp hơn 15% (Hình 2B).

• Xác thực độ chính xác

MỘT)

B)

Hình 3. Độ chính xác của UCF.ME™ UltraNuclease ELISA là được thử nghiệm theo sơ đồ sau.

UltraNuclease được tăng đột biến trong dung dịch ly giải tế bào 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO và Vero) độc lập với nồng độ tăng đột biến cuối cùng là 1,5 ng/mL. Độ chính xác trong các mẫu tế bào khác nhau cho thấy tuyệt vời hơn so với các nhà cung cấp khác (Hình 3A). UltraNuclease được tăng đột biến trong một mẫu thực tế (do khách hàng cung cấp) và được pha loãng 2 lần liên tiếp từ 3ng/mL đến 0,093ng/mL. Độ phục hồi tăng đột biến đều nằm trong khoảng 80%~110% (Hình 3B).