Hieff Trans™ Thuốc thử chuyển gen Liposomal Câu hỏi thường gặp

(1) Hỏi: Có thể có huyết thanh khi chuẩn bị phức hợp thuốc thử chuyển gen axit nucleic không?

A: Sự có mặt của huyết thanh sẽ ảnh hưởng đến sự hình thành liposome. Nên sử dụng môi trường không có huyết thanh (thường là môi trường MEM) khi chuẩn bị phức hợp thuốc thử chuyển gen axit nucleic.

(2) Hỏi: Thuốc thử chuyển gen có thể được đông lạnh không?

A: Không. Thuốc thử này phải được bảo quản ở nhiệt độ 2-8℃ và cần lưu ý tránh mở nắp nhiều lần trong thời gian dài vì việc mở nắp trong thời gian dài sẽ gây ra quá trình oxy hóa liposome và ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển gen.

(3) Hỏi: Tôi cần lưu ý điều gì khi sử dụng Thuốc thử chuyển gen axit nucleic Liposome Hieff Trans™?

A: 1) Trong quá trình chuyển gen, tốt nhất là độ hợp lưu tế bào đạt 80%-95% và mật độ mạ cụ thể được xác định theo tình trạng của tế bào;

2) Sử dụng DNA có độ tinh khiết cao giúp đạt hiệu quả chuyển gen cao hơn;

3) Các thuốc thử DNA và chuyển gen cần được pha loãng bằng môi trường không có huyết thanh khi chuẩn bị phức hợp chuyển gen;

4) Không được thêm kháng sinh vào môi trường trong quá trình chuyển gen;

5) Nồng độ DNA và lượng thuốc thử liposome cation nên được tối ưu hóa cho lần sử dụng đầu tiên để đạt được hiệu quả chuyển gen tối đa. Tỷ lệ DNA với thuốc thử chuyển gen là thường được khuyến nghị là 1:2-1:3.

(4) H: Có cần phải chấm dứt sau khi chuyển gen không?

A: Không cần. Phức hợp liposome ổn định trong 6 giờ. Nếu môi trường tế bào không thay đổi trước khi chuyển gen, để đảm bảo các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự phát triển bình thường của tế bào, cần phải thay đổi môi trường mới sau 4 đến 6 giờ. Tuy nhiên, nếu môi trường đã thay đổi trước khi chuyển gen, không cần phải thay đổi môi trường sau khi chuyển gen liposome.

(5) H: Tôi cần chú ý điều gì nếu muốn nâng cao hiệu quả chuyển gen?

A: a: Mật độ tế bào tại thời điểm chuyển gen là 90%-95%.

b: Trong quá trình chuyển gen, sử dụng môi trường không có huyết thanh MEM để pha loãng axit nucleic và liposome.

c: Môi trường có thể thay đổi sau 4-6 giờ sau khi chuyển gen.

(6) Hỏi: Có thể thực hiện đồng chuyển gen DNA và siRNA không? Hiệu quả như thế nào?

A: Có thể thực hiện đồng chuyển gen, nhưng khuyến cáo nên thực hiện chuyển gen riêng biệt, chuyển gen DNA nên thực hiện sau siRNA 6 giờ. Nếu thực hiện đồng thời, hiệu quả chuyển gen siRNA sẽ kém hơn.

(7) Hỏi: Thuốc thử chuyển gen có thể được sử dụng để chuyển gen đóng gói lentivirus không?

A: Có thể đóng gói bằng lentivirus, nhưng hiệu quả của việc đóng gói bằng lentivirus không nhất thiết liên quan đến hiệu quả của quá trình chuyển gen mà còn liên quan đến việc lựa chọn plasmid đóng gói và tỷ lệ giữa các plasmid.

(8) Hỏi: Thuốc thử chuyển gen axit nucleic Liposome Hieff Trans™ có thể được sử dụng để chuyển gen tế bào huyền phù không?

A: Thuốc thử chuyển gen axit nucleic Liposome Hieff Trans™ có thể được sử dụng để chuyển gen tế bào treo, xem Giao thức để biết chi tiết. Ngoài ra, chúng tôi cũng đã tung ra thuốc thử chuyển gen dành riêng cho tế bào treo (Mã số Cat. 40805, Thuốc thử chuyển gen axit nucleic Liposome cho tế bào treo).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Kiểm soát quang di truyền chức năng RNA và quá trình trao đổi chất bằng cách sử dụng các protein liên kết RNA có thể chuyển đổi ánh sáng được thiết kế. Nat Biotechnol. 2022 ngày 3 tháng 1. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Epub trước khi in. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Các biến thể Cas12a được thiết kế để giảm hiệu ứng lệch mục tiêu trên toàn bộ hệ gen thông qua nhận dạng PAM nghiêm ngặt. Mol Ther. 2022 ngày 5 tháng 1; 30 (1): 244-255. doi: 10.1016 / j.ymthe. 2021.10.010. Epub 2021 tháng 10. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF: 11.454)

[3] Trần S, Cao X, Trương J, Ngô W, Trương B, Triệu F.circVAMP3 thúc đẩy quá trình tách pha CAPRIN1 và ức chế ung thư biểu mô tế bào gan bằng cách ức chế quá trình dịch mã c-Myc. Adv Sci (Weinh). 2022 tháng 3; 9 (8): e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 tháng 1 24. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF: 16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. Yếu tố ghép nối arginine/serine-rich 8 thúc đẩy bệnh ác tính đa u tủy và tổn thương xương thông qua ghép nối thay thế của CACYBP và giao tiếp tế bào dựa trên exosome. Clin Transl Med. 2022 tháng 2; 12 (2): e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF: 11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. Một loại protein mới được mã hóa bởi CircHNRNPU thúc đẩy sự phát triển của bệnh đa u tủy bằng cách điều chỉnh vi môi trường tủy xương và sự ghép nối thay thế. J Exp Clinic Ung thư Res. 2022 ngày 8 tháng 3;41(1):85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (IF:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2 thúc đẩy sự tăng sinh tế bào u tủy đa thông qua trục STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Oncogene. 2022 tháng 3;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 tháng 1 24. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Tái kích hoạt chất ức chế khối u ở ung thư vú bằng cách chuyển đổi tăng cường thông qua mạng NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 ngày 7 tháng 9; 49 (15): 8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (NẾU: 16,9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Hiểu biết sâu sắc về cấu trúc vào quá trình tuyển dụng phức hợp BRCA1-BARD1 vào chromatin bị hư hỏng. Mol Cell. 2021 ngày 1 tháng 7;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 2021 ngày 7 tháng 6. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. Trục UBQLN2-HSP70 làm giảm các tập hợp poly-Gly-Ala và làm giảm các khiếm khuyết về hành vi ở mô hình động vật C9ORF72. Neuron. 2021 ngày 16 tháng 6;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 2021 ngày 14 tháng 5. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Tái kích hoạt chất ức chế khối u ở ung thư vú bằng cách chuyển đổi chất tăng cường thông qua mạng NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 ngày 7 tháng 9; 49 (15): 8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF: 16.9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. Một thiết bị quang di truyền tổng hợp dựa trên BRET để biểu hiện gen chuyển mạch theo xung cho phép cân bằng glucose ở chuột. Nat Commun. 27 tháng 1 năm 2021;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. Hoạt động của tế bào thần kinh tuyển dụng trục CRTC1/CREB để thúc đẩy quá trình tự thực phụ thuộc phiên mã nhằm duy trì LTD giai đoạn muộn. Cell Rep. 2021 tháng 7 năm 20;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. G-protein-coupled receptor GPR17 ức chế sự phát triển của u thần kinh đệm bằng cách tăng sản xuất ROS do phức hợp ức chế polycomb 1 làm trung gian. Cell Death Dis. 2021 Jun 12;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D.CircNR3C2 thúc đẩy hiệu ứng ức chế khối u do HRD1 làm trung gian thông qua việc hút miR-513a-3p trong ung thư vú ba âm tính. Mol Cancer. 2021 tháng 2;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1 là mục tiêu điều trị đầy hứa hẹn cho sự tăng sinh tế bào và khả năng kháng thuốc ức chế proteasome ở bệnh đa u tủy. J Exp Clin Cancer Res. 2022 ngày 6 tháng 1;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 kích hoạt apoptosis độc lập với caspase và phụ thuộc vào caspase bằng cách thúc đẩy quá trình chuyển vị nhân AIF và phân hủy MCL1. Adv Sci (Weinh). 8 tháng 2 năm 2021;8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 cân bằng sự ổn định của ARID1A và trạng thái gây ung thư/ức chế khối u của ung thư biểu mô tế bào vảy. Cell Rep. 2020 ngày 7 tháng 1;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Chu Y, Sun Y. ADNP thúc đẩy sự biệt hóa thần kinh bằng cách điều chỉnh tín hiệu Wnt/β-catenin. Xã Nat. 2020 ngày 12 tháng 6;11(1):2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (NẾU: 14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. Việc nối lại tín hiệu ERBB3 và ERK mang lại khả năng kháng ức chế FGFR1 ở ung thư đường tiêu hóa có đột biến ERBB3-E928G. Protein Cell. 2020 tháng 12; 11 (12): 915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF: 14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al. Máy nano di chuyển DNA không bị ràng buộc được thúc đẩy bởi enzyme kép để chụp ảnh nội bào microRNA biểu hiện thấp. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (NẾU:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. Tương tác giữa tín hiệu p53 và Ras kiểm soát khả năng kháng cisplatin thông qua điều hòa apoptosis và autophagy do HDAC4 và HIF-1α làm trung gian. Theranostics. 30 tháng 1 năm 2019;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Phân tích cảnh quan và động lực oxy hóa khử trong tế bào sống và trong cơ thể sống bằng cách sử dụng các cảm biến huỳnh quang được mã hóa di truyền. Nat Protoc. 2018 tháng 10; 13 (10): 2362-2386. doi: 10.1038 / s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF: 13,49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Tăng cường hiệu quả điều trị của Exosome có nguồn gốc từ tế bào gốc trung mô với Hydrogel tiêm được để điều trị thiếu máu cục bộ chi sau. Giao diện ACS Appl Mater. 12 tháng 9 năm 2018; 10 (36): 30081-30091. doi: 10.1021 / acsami.8b08449. Epub 29 tháng 8 năm 2018. PMID: 30118197. (IF: 8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. Mất CXCR7 nội mô làm suy yếu cân bằng mạch máu và tái tạo tim sau nhồi máu cơ tim: Ý nghĩa đối với khám phá thuốc tim mạch. Lưu thông. 28 tháng 3 năm 2017;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2017 ngày 2 tháng 2. PMID: 28154007. (IF:18.881)