(1) Hỏi: Sự khác biệt giữa chuyển gen DNA và chuyển gen siRNA là gì?

A: 1. Vì chỉ có 20 cặp bazơ nên siRNA nhỏ hơn nhiều so với DNA với hàng nghìn hoặc thậm chí hơn 10.000 cặp bazơ.

2. Các thuốc thử và phương pháp chuyển gen được sử dụng để chuyển gen DNA không phù hợp để chuyển gen siRNA.

3. Chuyển gen siRNA có yêu cầu nghiêm ngặt hơn về độc tính của thuốc thử chuyển gen so với chuyển gen DNA.

(2) Hỏi: Thuốc thử chuyển gen có cần phải thay đổi sau khi chuyển gen không?

A: Đối với sự thay đổi môi trường, có thể phân biệt hai tình huống:

1. Nếu không thay môi trường trước khi chuyển gen, môi trường cần được thay sau khoảng 6 giờ sau khi chuyển gen để đảm bảo các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự phát triển của tế bào;

2. Nếu có thay đổi trước khi chuyển gen: Môi trường có thể được thay đổi như bình thường khi môi trường thiếu chất dinh dưỡng.

(3) Q: Hiệu quả của thuốc thử chuyển gen PEI trong việc chuyển gen siRNA và plasmid là bao nhiêu?

A: Thuốc thử chuyển gen PEI này được phát triển đặc biệt cho siRNA và không khuyến khích chuyển gen plasmid.

(4) Hỏi: Thuốc thử chuyển gen có thể được đông lạnh không?

A: Không được đông lạnh, vì thuốc thử chuyển gen là thuốc thử chuyển gen cation PEI. Đông lạnh ở nhiệt độ thấp sẽ phá hủy hoạt tính của thuốc thử chuyển gen PEI. Do đó, tốt nhất nên bảo quản ở nhiệt độ 4 độ để duy trì hiệu quả chuyển gen tốt nhất.

(5) Hỏi: Làm thế nào để nâng cao hiệu quả chuyển gen?

A: a: Mật độ tế bào tại thời điểm chuyển gen, 30%-50%.

b: Môi trường không chứa huyết thanh Opti-MEM nên được sử dụng để pha loãng siRNA và liposome trong quá trình chuyển gen.

c: Môi trường có thể thay đổi sau 4-6 giờ sau khi chuyển gen.

[1] Zhang Y, Hu R, Xi B, Nie D, Xu H, Liu A. Cơ chế giải phóng các phối tử NKG2D liên quan đến lão hóa và thoát khỏi miễn dịch do hóa trị liệu gây ra ở tế bào u nguyên bào thần kinh. Front Cell Dev Biol. 2022;10:829404. Xuất bản ngày 2 tháng 3 năm 2022. doi:10.3389/fcell.2022.829404(IF:6.684)

[2] Cui B, Wang Y, Jin J, et al. Resveratrol điều trị lão hóa do ánh sáng UVB gây ra bằng cách biểu hiện Anti-MMP, thông qua các đặc tính chống viêm, chống oxy hóa và chống apoptosis, và điều trị lão hóa do ánh sáng bằng cách điều chỉnh tăng biểu hiện VEGF-B. Oxid Med Cell Longev. 2022;2022:6037303. Xuất bản ngày 4 tháng 1 năm 2022. doi:10.1155/2022/6037303(IF:6.543)

[3] Liu Y, Zeng Y, Si HB, Tang L, Xie HQ, Shen B. Exosome có nguồn gốc từ tế bào gốc có nguồn gốc từ nước tiểu của con người biểu hiện quá mức miR-140-5p làm giảm viêm xương khớp đầu gối thông qua việc điều hòa giảm VEGFA ở mô hình chuột. Am J Sports Med. 2022;50(4):1088-1105. doi:10.1177/03635465221073991(IF:6.203)

[4] Zhang ZD, Wen B, Li DJ, et al. AKT serine/threonine kinase 2-phosphoryl hóa trung gian của fascin threonine 403 điều chỉnh sự tiến triển của ung thư thực quản. Int J Biochem Cell Biol. 2022;145:106188. doi:10.1016/j.biocel.2022.106188(IF:5.085)

[5] Tan S, Zhou Y, Zhao H, et al. Phân tích phiên mã toàn diện của vùng dưới đồi cho thấy các gen liên quan đến rối loạn phát triển giới tính ở lợn. J Steroid Biochem Mol Biol. 2021;210:105875. doi:10.1016/j.jsbmb.2021.105875(IF:4.294)

[6] Niu M, Yi M, Dong B, Luo S, Wu K. Sự điều hòa tăng trục STAT1-CCL5 là một dấu ấn sinh học của ung thư ruột kết và thúc đẩy sự phát triển của các tế bào ung thư ruột kết. Ann Transl Med. 2020;8(15):951. doi:10.21037/atm-20-4428(IF:3.297)