Thuốc thử chuyển gen phổ thông Hieff Trans™ là thuốc thử chuyển gen liposome đa năng, tiện lợi và hiệu quả được phát triển dựa trên công nghệ nano mới nhất. Thích hợp cho việc chuyển gen DNA, RNA và oligonucleotide, bao gồm cả tế bào nguyên phát, Các tế bào khó chuyển gen, bao gồm cả tế bào thần kinh, có hiệu quả chuyển gen cao. Công thức độc đáo của nó cho phép thêm trực tiếp vào môi trường và sự hiện diện của huyết thanh không ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển gen, giúp giảm thiểu tổn thương tế bào do loại bỏ huyết thanh. Không cần phải loại bỏ phức hợp thuốc thử chuyển gen axit nucleic hoặc thay thế bằng môi trường mới sau khi chuyển gen và môi trường mới cũng có thể được thay thế sau 4-6 giờ tùy theo tình trạng dinh dưỡng của tế bào.

Thành phần sản phẩm

Vận chuyển và lưu trữ

Sản phẩm được vận chuyển kèm túi đá và có thể bảo quản ở nhiệt độ 2-8℃ trong một năm. Không được đông lạnh!

Thận trọng

1) Trong quá trình chuyển gen, tốt nhất là độ hợp lưu của tế bào đạt 70%-90% và mật độ mạ cụ thể được xác định theo tình trạng của tế bào.
2) Việc chuẩn bị phức hợp chuyển gen đòi hỏi phải pha loãng DNA và thuốc thử chuyển gen trong môi trường không có huyết thanh.
3) Không được thêm kháng sinh vào môi trường trong quá trình chuyển gen.
4) Việc sử dụng DNA hoặc RNA có độ tinh khiết cao giúp đạt được hiệu quả chuyển gen cao hơn và nội độc tố trong plasmid chính là kẻ thù của quá trình chuyển gen.
5) Bảo quản ở nhiệt độ 2-8ºC, chú ý không mở nắp nhiều lần trong thời gian dài.
6) Nồng độ axit nucleic và thể tích thuốc thử phải được tối ưu hóa cho lần sử dụng đầu tiên để đạt được hiệu quả chuyển gen tối đa.
7) Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu khoa học!

Hướng dẫn

Chuyển gen DNA
[Lưu ý] Lượng thuốc thử chuyển gen sử dụng bị ảnh hưởng bởi loại tế bào và các điều kiện thử nghiệm khác. Nên thiết lập một gradient để tối ưu hóa lượng sử dụng tối ưu cho lần đầu tiên.
1) Các tế bào được mạ và tỷ lệ tế bào hợp lưu phải đạt 70%-90% vào thời điểm chuyển gen.
2) Pha loãng dung dịch Universal-B với môi trường Opti-MEM theo bảng dưới đây và trộn nhẹ nhàng.
3) Pha loãng DNA với môi trường Opti-MEM để thu được DNA hỗn hợp, sau đó thêm dung dịch Universal-A và trộn nhẹ để thu được DNA pha loãng.
4) Thêm DNA đã pha loãng vào dung dịch Universal-B đã pha loãng (tỷ lệ 1:1).
5) Ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
6) Nhỏ từng giọt phức hợp DNA-liposome vào tế bào và trộn nhẹ nhàng.
7) Ủ ở nhiệt độ 37°C, 5% CO2 trong 48-96 giờ cho đến khi phân tích biểu hiện gen.

Chuyển gen siRNA
Quy trình chuyển gen siRNA giống với quy trình chuyển gen DNA, ngoại trừ việc không cần thêm dung dịch Universal-A (bước 3) khi pha loãng siRNA.

Bảng 1 Lượng chuyển gen trong các bình nuôi cấy tế bào khác nhau (chỉ để tham khảo)

[Lưu ý] Lượng sử dụng trong bảng chỉ mang tính chất tham khảo. Lượng DNA và dung dịch Universal-B cụ thể sử dụng phải được tối ưu hóa theo loại tế bào và các điều kiện thử nghiệm khác. Khuyến nghị giữ tỷ lệ trong khoảng 1:0,5-1:5.