体外细胞转染试剂产品选择指南
细胞转染试剂已成为研究和调控真核细胞基因功能的常规试剂。转染试剂广泛应用于基因功能研究、基因表达调控、突变分析，以及基因治疗、细胞治疗、蛋白生产、疫苗生产等。那么什么是转染？如何根据实验情况选择合适的转染试剂？
转染的类型有哪些？
转染试剂的特点
如何根据您的实验选择一种转染试剂？
应用案例
转染条件参考
常见问题解答
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转染的类型有哪些？
根据转染后核酸是否整合到宿主细胞染色体中，分为“瞬时”（瞬时转染）和“稳定”（稳定转染）。不同的转染方式的转染效率、细胞毒性、对正常生理的影响、基因表达水平等均有不同。其原理、应用、特点对比见下表：
表1 不同转染方法比较
| 技术 | 原则 | 优点 | 缺点 |
| 化学转染法 | |||
| 阳离子脂质体 | 带正电荷的脂质体与带负电荷的核酸磷酸基团形成复合物，并被细胞内吞。 |
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| 磷酸钙共沉淀 | 磷酸钙 DNA 复合物吸附于细胞膜并被细胞内吞 |
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| 葡聚糖 | 带正电荷的DEAE-葡聚糖和带负电荷的核酸磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞。 |
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| 其他阳离子聚合物 | 带正电荷的聚合物与核酸带负电荷的磷酸基团形成带正电荷的复合物， 然后与细胞表面带负电荷的蛋白聚糖相互作用，通过内吞作用进入细胞。 |
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| 生物转染方法 | |||
| 病毒转染 | 本能感染细胞并传递遗传物质 |
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| 物理转染方法 | |||
| 电转 | 高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的孔隙引入。 |
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| 生物传递粒子输送（粒子轰击） | 用微小的重金属粒子将DNA沉淀下来，然后用弹道装置将包裹的粒子投射到细胞内，DNA在细胞内逐渐释放和表达。 |
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| 显微注射 | 显微操作用于将 DNA 直接注入目标细胞的细胞核中。 |
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的特点 转染试剂 Yeasen
对于 DNA 转染试剂和 RNA 转染试剂，
| Hieff Trans™ 悬浮无细胞脂质体转染试剂 | |
| 40802ES | 40805ES |
| 40806ES | 40816ES |
- 效率高：适用于细胞系的瞬时转染或稳定转染。
- 低毒性：转染的细胞仍然保持良好的活力。
- 适应性广：全面覆盖常见细胞及难转染的原代细胞。
- 操作简便：适用于含血清的培养基，转染前后无需更换培养基。
- 性价比高：经济实用、转染效率高、价格低廉。
如何根据您的实验选择一种转染试剂？
转染试剂的选择需要根据不同的实验目的和实验内容，根据转染的物质、具体的细胞、操作的便捷性等因素进行选择。
| 产品 | Hieff Trans™ 悬浮无细胞脂质体转染试剂 | |||
| 细胞类型 | 常规电池 | 常规电池 | 常规电池 | 常规电池 |
| / | / | 难以转染的细胞 | 难以转染的细胞 | |
| 核酸类型 | 脱氧核糖核酸 | 脱氧核糖核酸 | / | 脱氧核糖核酸 |
| 干扰RNA | 干扰RNA | 干扰RNA | / | |
| / | / | miRNA | / | |
| / | / | 模拟miRNA | / | |
| / | / | 抗miRNA | / | |
| DNA/siRNA共转染 | DNA/siRNA共转染 | / | / | |
| 病毒包装 | 病毒包装 | / | 病毒包装 |
应用案例
希夫传输™ 以无菌液体形式供应。一般情况下，对于24孔板转染，每次约1.5 μL，1 mL Hieff Trans™ 可进行约660次转染；对于6孔板，每次约6 μL，1 mL Hieff Trans™ 可进行约660次转染。160次转染；
欲了解更多详情，请参阅 使用 Hieff Trans™ Lipofectamine 试剂进行转染
PEI 40000 是一种高电荷阳离子聚合物，分子量为 40,000，它非常容易与带负电荷的核酸分子结合，形成复合物并使复合物进入细胞。PEI 40000 是一种瞬时转染试剂，具有细胞毒性低、转染效率高、在 HEK293 和 CHO 等细胞中基因表达效率高的特点。线性 PEI 转染试剂已针对多种细胞系进行了验证，包括 HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞。转染效率高达 80%~90%。
欲了解更多详情，请参阅 转染新宠——线性PEI MW 40000，更高效的转染试剂
本产品在广泛的细胞系中均可达到1 nM siRNA 90%以上的表达效率，避免脱靶效应。适合转染多种细胞，包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等贴壁细胞；以及难转染的悬浮细胞系，如K562或THP-1细胞，可达到80%的沉默效率；包括一些原代细胞、原代人成纤维细胞和原代人肝细胞等，均可达到80%的沉默效率。
转染条件参考
除每款产品的使用说明书外，客户根据自己具体的实验内容进行操作，使用量会存在不同的差异。根据客户使用产品后反映的体外细胞转染情况，特整理出来，供大家参考。
| 产品名称/产品编号 | Hieff Trans™ 脂质体转染试剂/40802ES | ||||
| 细胞 | 培养皿 | 细胞接种密度 | 脱氧核糖核酸 | 希夫译本 | 转染效率 |
| A549 | 6 好 | 90％ | 0.7微克 | 1.15 微升 | +++ |
| 2号 | 24 好 | 95％ | 0.2微克 | 0.2 微升 | ++ |
| C2C12 | 24 好 | 80% - 90% | 1微克 | 5 微升 | ++ |
| 东风 1 | 24 好 | 80% - 90% | 0.5微克 | 0.5 微升 | +++ |
| H520 | 6 好 | 80％ | 1.2微克 | 6 微升 | ++ |
| 肝细胞癌 | 96 井 | 70％ | 100 纳克 | 1 微升 | ++ |
| HCT116 | 6 好 | 90％ | 4微克 | 10 μL | ++ |
| HEK 293 | 6 好 | 95％ | 2微克 | 10 μL | 80 - 90% |
| 293FT 型 | 24 好 | 85％ | 1微克 | 4 微升 | 90％ |
| HEK 293T | 12 好 | 1×105 | 1微克 | 2 微升 | +++ |
| HEK 293T（悬挂） | 30 毫升 | 80％ | 30微克 | 60 μL | ++ |
| 希拉 | 12 好 | 90％ | 0.2微克 | 0.6 微升 | 90％ |
| 希拉 | 12 好 | 80％ | 1微克 | 3 微升 | +++ |
| 肝癌 | 12 好 | 80％ | 1微克 | 3 微升 | ++ |
| 脐静脉内皮细胞 | 24 好 | 80％ | 1微克 | 2 微升 | ++ |
| MCF10A | 10厘米盘子 | 60％ | 5微克 | 15 微升 | ++ |
| N2A | 24 好 | 70% - 80% | 300 纳克 | 900 μL | + |
| 美国国立癌症研究所 H1975 | 6 好 | 80％ | 4微克 | 10 μL | +++ |
| 美国国立卫生研究院 3T3 | 6 好 | 90％ | 4微克 | 10 μL | +++ |
| 原始 264。7 | 35 毫米天线 | 80％ | 1微克 | 2 微升 | 90％ |
| 维罗 | 6 好 | 80％ | 3微克 | 9 微升 | +++ |
| 细胞 | 培养皿 | 细胞接种密度 | 干扰RNA | 希夫译本 | 转染效率 |
| HK2 | 6 好 | 65％ | 100 皮摩尔 | 6 微升 | +++ |
常见问题解答
1 Hieff Trans™ 脂质体转染试剂
1.1问：制备核酸转染试剂复合物时可以存在血清吗？
A：血清的存在会影响脂质体的形成，建议在制备核酸转染试剂复合物时使用无血清培养基（一般为MEM培养基）。
1.2问：使用Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂时应注意什么？
一个：
1)转染细胞时，细胞密度最好为80%-95%，具体接种密度根据细胞的情况确定；
2）使用高纯度的DNA有助于获得更高的转染效率；
3）制备转染复合物时需用无血清培养基稀释DNA和转染试剂；
4）转染时培养基中不能添加抗生素；
5)试剂应保存于2-8℃，注意避免长时间反复开盖；
6）首次使用时应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂数量，以获得最大的转染效率。一般建议DNA与转染试剂的比例为1：2-1：3。
1.3 问：转染后需要终止吗？
A：不需要。脂质体复合物的稳定期为6小时。如果转染前没有更换细胞培养基，为了保证细胞正常生长所需的营养，需要在4-6小时后换新培养基。但如果转染前已经换过培养基，脂质体转染后无需换培养基。
1.4 DNA和siRNA可以共转染吗？效果如何？
A：
1.5问：该转染试剂可以用于慢病毒包装的转染吗？
答：可以进行慢病毒包装。
1.6 问：悬浮细胞可以用Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂转染吗？
A：Hieff Trans™脂质体核酸转染试剂可用于悬浮细胞的转染，具体见Protocol。另外我们还推出了专门针对悬浮细胞的转染试剂（Cat No.40805，Hieff Trans™悬浮无细胞脂质体转染试剂）
2 希夫 Trans™ 体外 siRNA/miRNA 转染试剂
2.1问：转染后需要更换转染试剂吗？
A：该问题分两种情况：1.如果转染前没有换液，转染后6小时左右应该换液，以保证细胞生长所需的营养；2.如果转染前有换液，可以按照正常培养细胞的操作进行操作吗？？换液后操作？
2.2问：转染试剂可以冷冻吗？
A：不能冷冻，因为该转染试剂是PEI阳离子转染试剂，低温冷冻会破坏PEI转染试剂的活性，所以最好保存在2-8℃，才能保持最佳的转染效果。
产品信息
| 产品名称 | 库存单位 | 规格 |
| Hieff Trans™ 脂质体转染试剂 | 40802ES02 | 0.5 毫升 |
| 40802ES03 | 1.0 毫升 | |
| 40802ES08 | 5×1毫升 | |
| Hieff Trans™ 悬浮无细胞脂质体转染试剂（咨询） | 40805ES02 | 0.5 毫升 |
| 40805ES03 | 1.0 毫升 | |
| 40805ES08 | 5×1毫升 | |
| Hieff Trans™ 体外 siRNA/miRNA 转染试剂 （查询） | 40806ES02 | 0.5 毫升 |
| 40806ES03 | 1.0 毫升 | |
| 聚乙烯亚胺线性(PEI)MW40000（快速裂解） | 40816ES02 | 100毫克 |
| 40816ES03 | 1 克 | |
| 40816ES08 | 5×1克 |
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