什麼是二抗?

二抗是可以與一抗結合的抗體。主要用於檢測一抗的存在。一抗特異性地與抗原結合,二抗特異性地與一抗結合。也就是說,一抗的Fc區或Fab片段可以當抗原,刺激身體產生抗體。也就是說一抗主要是IgG類免疫球蛋白,所以二抗就是抗IgG的抗體。

二抗的作用

一抗是與目標蛋白特異性結合的,一抗需要標記發光物質或顯色基。用肉眼無法看出一抗 綁定 蛋白質。但一抗特異性比較強,且每個抗體標記成本較高。通常使用標記的二抗,該二抗可以與一抗結合,並具有可檢測的標記(例如螢光、放射性、化學發光或髮色基團)。因此目前的設計一般是二抗帶有可檢測的標記來檢測一抗,而一抗則識別底物。這樣,當一抗與底物結合時,就可以透過二抗體檢測到。

例如ECL發光原理:在ECL底物中,有H22 以及魯米諾(及其衍生物),在HRP(辣根過氧化物酶)作用下發出螢光。

使用二抗體的要點

二抗是用一抗種屬(如兔、小鼠)的某一亞型的免疫球蛋白IgG免疫哺乳動物(通常免疫山羊、馬、驢、騾和豚鼠等)產生的抗體,因此二抗只與特定的一抗種屬和亞型結合。例如,羊抗鼠(二抗)會特異性地與鼠單株(一抗)結合,而不會與兔多克隆或大鼠單株結合。

二抗偶聯標記

不同的實驗方法會導致二抗所偶聯基團不同,主要有酵素(辣根過氧化物酶/HRP和鹼性磷酸酶/AP)、螢光基團(FITC、Rhodamine、PE、Dylight、Alexa Fluor、cy3等)、生物素、金顆粒等。 TC、PE等。

如何選擇合適的二抗

一個。免疫印跡 (WB)

對於傳統的Western印跡法,選擇標記有辣根過氧化物酶或鹼性磷酸酶的二抗體;對於螢光Western印跡法,選擇標記有相應螢光團的二抗體。
b.免疫組織化學(IHC/ICC)

A.對於IHC(免疫組織化學),選擇HRP或DAB標記的二抗體;
B. 對於 ICC(免疫細胞化學),選擇用生物素標記的二抗體。
C. 免疫螢光(IHF/ICF)
C. 對於IHF(組織切片免疫螢光),選擇以FITC標記的二抗體; D. 對於 ICF(細胞免疫螢光),選擇以 FITC 標記的二抗體。
D.免疫沉澱與共免疫沉澱

免疫沉澱通常允許選擇使用 Fc 或 Fab 特異性的二抗體。此類二抗可以避免重鏈(分子量55kDa)或輕鏈(分子量25kDa)的干擾。

推薦產品資訊

標籤組

產品編號

產品名稱

未標記

34850ES

山羊抗兔 lgG(H+L)

34851ES

山羊抗鼠lgG(H+L)

34847ES

驢抗人IgG(H+L)

辣根過氧化物酶

33101ES

過氧化物酶 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

33201ES

過氧化物酶 AffiniPure 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33301ES

過氧化物酶 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)

33401ES

過氧化物酶 AffiniPure 山羊抗豚鼠 IgG(H+L)

33501ES

辣根過氧化物酶山羊抗人 IgG (H+L)

33701ES

過氧化物酶 AffiniPure 兔抗山羊 IgG (H+L)

33801ES

過氧化物酶 AffiniPure 兔抗羊 IgG (H+L)

34201ES

過氧化物酶 AffiniPure 驢抗兔 IgG (H+L)

34101ES

過氧化物酶 AffiniPure 驢抗鼠 IgG (H+L)

34301ES

過氧化物酶 AffiniPure 驢抗山羊 IgG (H+L)

33101ES

過氧化物酶 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

綠色螢光

33106ES

YSFluor™ 488 山羊抗兔 IgG (H+L)

33126ES

YSFluor™ 488 山羊抗人 IgG (H+L)

33206ES

YSFluor™488 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33306ES

YSFluor™ 488 山羊抗牛 IgG (H+L)

33406ES

YSFluor™ 488 山羊抗豚鼠 IgG (H+L)

33706ES

YSFluor™488 兔抗山羊 IgG (H+L)

33906ES

YSFluor™ 488 兔抗鼠 IgG (H+L)

34906ES

YSFluor™488 驢抗羊 IgG (H+L)

34106ES

YSFluor™488 驢抗鼠 IgG (H+L)

34206ES

YSFluor™488 驢抗兔 IgG (H+L)

34306ES

YSFluor™ 488 驢抗山羊 IgG (H+L)

34406ES

YSFluor™ 488 驢抗鼠 IgG (H+L)

34506ES

YSFluor™488 驢 抗豚鼠 IgG (H+L)

34606ES

YSFluor™488 驢 抗雞 IgG (H+L)

34706ES

YSFluor™488兔抗雞IgY(H+L)

34806ES

YSFluor™488 驢抗人 IgG (H+L)

34856ES

FITC AffiniPure 山羊抗人 IgG(H+L)

33107ES

FITC-AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

33207ES

FITC-AffiniPure 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33307ES

FITC-AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)

33707ES

FITC-AffiniPure 兔抗山羊 IgG (H+L)

33807ES

FITC-AffiniPure 兔抗羊 IgG (H+L)

羅丹明

33109ES

羅丹明 (TRITC) 山羊抗兔 IgG (H+L)

33209ES

羅丹明 (TRITC) 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33709ES

羅丹明(TRITC) AffiniPure 兔抗山羊 IgG (H+L)

33210ES

羅丹明紅-X (RRX) 山羊抗鼠 IgG (H+L)

橘色螢光

33112ES

YSFluor™594 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

33212ES

YSFluor™ 594 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33222ES

YSFluor™ 594 山羊抗人 IgG (H+L)

33412ES

YSFluor™594 山羊抗豚鼠 IgG (H+L)

33312ES

YSFluor™ 594 山羊抗牛 IgG (H+L)

33712ES

YSFluor™594 兔抗山羊 IgG (H+L)

33812ES

YSFluor™ 594 兔抗羊 IgG (H+L)

33912ES

YSFluor™594 兔抗鼠 IgG (H+L)

34712ES

YSFluor™594 兔抗雞 IgY (H+L)

34112ES

YSFluor™ 594 驢抗鼠 IgG (H+L)

34212ES

YSFluor™594 驢抗兔 IgG (H+L)

34312ES

YSFluor™ 594 驢抗山羊 IgG (H+L)

34412ES

YSFluor™ 594 驢抗鼠 IgG (H+L)

34512ES

YSFluor™594 驢 抗豚鼠 IgG (H+L)

34612ES

YSFluor™594 驢 抗雞 IgG (H+L)

34812ES

YSFluor™594 驢抗人 IgG (H+L)

34912ES

YSFluor™594 驢抗羊 IgG (H+L)

33208ES

Cy3-AffiniPure 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33308ES

Cy3-AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)

33708ES

Cy3-AffiniPure 兔抗山羊 IgG (H+L)

33808ES

Cy3-AffiniPure 兔抗羊 IgG (H+L)

34855ES

Cy3-AffiniPure 驢抗山羊 IgG(H+L)

紅色螢光

33113ES

YSFluor™647 山羊抗兔 IgG (H+L)

33213ES

YSFluor™ 647 山羊抗鼠 IgG (H+L)

33223ES

YSFluor™647 山羊抗人 IgG (H+L)

33313ES

YSFluor™ 647 山羊抗牛 IgG (H+L)

33413ES

YSFluor™ 647 山羊抗豚鼠 IgG (H+L)

33713ES

YSFluor™ 647 兔抗山羊 IgG (H+L)

33813ES

YSFluor™647 兔抗羊 IgG (H+L)

33913ES

YSFluor™ 647 兔抗鼠 IgG (H+L)

34713ES

YSFluor™647 兔抗雞 IgY (H+L)

34113ES

YSFluor™ 647 驢抗鼠 IgG (H+L)

34213ES

YSFluor™ 647 驢抗兔 IgG (H+L)

34413ES

YSFluor™ 647 驢抗鼠 IgG (H+L)

34813ES

YSFluor™647 驢抗人 IgG (H+L)

34913ES

YSFluor™647 驢抗羊 IgG (H+L)

參考

[1]張斌,王華,廖哲,等.EGFP-EGF1 結合奈米粒子用於靶向新生血管細胞和神經膠質瘤細胞治療腦神經膠質瘤[J]。生物材料,2014,35(13):4133-4145。影響因子:8.387
[2]餘曉玲,王建軍,劉軍,等.一種基於多模式胃酶抑素 A 肽的奈米劑,用於癲癇大鼠腦內 P-糖蛋白的分子成像[J]。生物材料,2016,76:173-186。   影響因子:8.402
[3]劉菁,何燕,張建,等.功能化奈米載體結合具有 P-糖蛋白調節特性的癲癇特異性載體用於抗癲癇藥物傳輸[J]。生物材料,2016,74:64-76。影響因子:8.402
[4]馬英,吉英,尤梅,等. NaYF 4: Yb 3+, Er 3+上轉換奈米粒子體外標記及長期示蹤骨髓間質幹細胞[J]. Acta biomaterialia, 2016, 42: 199-208。影響因子:6.638
[5]王穎,林艷霞,喬紹林,等.聚合物奈米粒子能夠逆轉腫瘤微環境中的巨噬細胞以進行免疫療法[J]。生物材料,2017,112(15):3e163。影響因子:8.806
[6]劉晨,何曉玲,劉偉,等. TTC29 雙等位基因突變導致男性生育力低下 人類和小鼠的弱畸精子症[J]。美國人類遺傳學雜誌, 2019, 105(6): 1168-1181。 34106ES60 影響因子:9.924
[7]徐婷,丁偉,敖曉玲,等. ARC藉由抑制mPTP開放調控程序性壞死及心肌缺血/再灌注傷害[J]. Redox biology, 2019, 20: 414-426.IF(7.126)(Alexa Fluor 488)
[8] 譚婷, 王艷, 王菁, 等.靶向肽修飾的仿生脂蛋白可提高實體腫瘤的深層滲透和癌細胞的可及性。 Acta Pharm Sin B.2020;10(3):529-545。 Alexa Fluor 488 標記 IgG (H+L) IF: 7.097
[9] 一種用於增強單細胞免疫印跡的光點擊水凝膠[J].先進功能材料,2020,30.33112ES60  影響因子:16.836
[10] Bingcheng Yi a,b,1, Lei Yuc,1, Han Tanga 等。賴氨酸摻雜的聚多巴胺塗層增強 電紡定向纖維血管的抗血栓形成和內皮化 移植..《應用材料今日》,2021 年。  33207ES60 影響因子:10.041

詢問