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螢光素-dUTP 透過 TdT 轉移酶與缺口 DNA 的結合是檢測細胞凋亡最常用的方法之一，例如羅氏公司的原位細胞死亡試劑盒就是基於此原理。產品中的TdT轉移酶活性直接影響標記效率。
目前全球有120多個研究小組正在使用該產品，並在Theranostics、EMBO Molecular Medicine等權威期刊發表多篇英文文章。
檢測機制
在細胞凋亡的後期，染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂產生大量黏性的3-OH末端，在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）作用下，螢光素/酶標記的dUTP結合到DNA的3末端，這樣透過檢測螢光就能夠完成對細胞凋亡的檢測，這種方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口（TUNEL）。
圖1：末端脫氧核苷酸轉移酶介導的缺口末端標記（TUNEL）示意圖
產品特性
- 適用範圍廣泛
可用於石蠟包埋的組織切片、冷凍組織切片、培養的細胞和從組織分離的細胞。
- 高檢測靈敏度
可以檢測到極少量的凋亡細胞。
- 背景幹擾低
高信噪比。
- 觀察的多功能性
螢光顯微鏡觀察，流通檢測。
數據呈現
1.小鼠前脂肪細胞（3T3-L）Tunel實驗
圖2：小鼠前脂肪細胞3T3-L凋亡檢測。第一行代表陰性對照，第二行代表陽性對照。 檢測試劑：Cat No.40306 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（FITC）
2、石蠟切片樣本隧道檢測
圖3：LY3009120單獨使用或與Vemurafenib和Obatoclax合併使用可在皮下移植腫瘤模型中有效延緩甲狀腺癌。 如果=8.8。樣本類型：石蠟包埋的腫瘤組織（取自裸鼠）。檢測試劑：Cat No.40307 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 488）。
3.Tunel檢測細胞爬行
圖4：硫酸鋅對不同亞群內皮細胞凋亡的影響。 樣本類型：HUVEC（人類臍靜脈內皮細胞）。檢測試劑：Cat No. 40308 TUNEL 細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 640）
4.流式細胞儀檢測細胞凋亡
圖5：PA治療可以有效減少重編程過程中細胞凋亡的發生。如果=3.7。樣本類型：iPS細胞。檢測試劑：Cat No.40307 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 488）。
文獻引用
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常見問題
問： 出現非特異性螢光標記？
1)組織/細胞本身俱有較高的核酸酶或聚合酶活性，容易導致非特異性螢光標記的出現，例如平滑肌細胞。解決方法是在取出細胞或組織後立即固定它們，並充分固定，以防止這些酶引起假陽性。
2）使用不合適的固定劑，如某些酸性固定劑，會導致假陽性。建議使用新鮮配製的4％中性多聚甲醛固定劑。
3)TUNEL實驗反應時間過長，細胞或組織表面無法保持濕潤，也可能出現非特異性螢光。注意控制反應時間，確保TUNEL檢測反應溶液充分覆蓋樣本。
問： 螢光背景很高？
1) 分裂和增殖速度快、轉錄水平高的細胞有時也會出現細胞核中的 DNA 斷裂。
2）長時間暴露在激發光下會導致假陽性。
問： 標記效率低？
1）用乙醇或甲醇固定會導致標記效率低。
2)固定時間過長，導致交聯度過高。建議減少固定時間。
3）組織切片太厚，固定效果不理想，最好控制在10μm以內。
（4）螢光猝滅：在正常光照下，10分鐘內螢光就會發生嚴重猝滅。解決方法是避免輕度操作。
產品詳情
| 產品名稱 | 貨號 | 規格 |
| Annexin V-FITC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒 | 40311ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 |
| 40302ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒 | 40310ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 |
| 40303ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| Annexin V-YSFluor™ 488/7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒 | 40313ES60 | 100噸 |
| 40305ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| 40304ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| Annexin V-YSFluor™ 647/7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒 | 40312ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 |
| 40306ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| 40307ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 | |
| 40308ES20/50/60 | 20噸/50噸/100噸 |