粒線體
粒線體是細胞的能量工廠，是細胞內氧化磷酸化和三磷酸腺苷（ATP）合成的主要場所，為細胞活動提供能量。細胞生命活動所需能量的95%來自於粒線體。粒線體除了提供細胞能量外，還參與細胞分化、細胞訊息傳遞、細胞凋亡等過程，具有調節細胞生長和細胞週期的能力。因此，粒線體和粒線體膜等分析是細胞研究的重要組成部分。
粒線體膜電位的定義與重要性
粒線體膜電位是粒線體內膜兩側電荷分佈的結果，也是維持粒線體正常功能的關鍵因素。在粒線體中，電子傳遞鏈透過驅動 ATP 合成的氧化還原反應產生質子梯度。粒線體膜電位的穩定性與細胞的能量供應和生存狀態直接相關。大量研究表明，粒線體與細胞凋亡密切相關，其中粒線體跨膜電位的降低被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件之一。它發生在細胞核內出現凋亡特徵（染色質凝聚、DNA斷裂）之前，一旦粒線體跨膜電位崩潰，細胞凋亡就是不可逆的。因此，粒線體膜電位降低是細胞凋亡早期階段的標誌性事件。
JC-1探頭工作原理
JC-1 是一種陽離子脂質螢光染料，可作為粒線體跨膜電位的指標。 JC-1以單體和多聚體兩種狀態存在。 低濃度時以單體存在，可偵測到綠色螢光，經流通法檢測時一般位於FL-1通道（與FITC同一通道）。 高濃度時以多聚體形式存在，可偵測到紅光， 而透過流通法檢測時，通常位於FL-2通道（與PE相同的通道）。 JC-1也可作為陽離子脂質螢光染料，可作為粒線體跨膜電位指示劑。與PE同一通道）。由於JC-1濃度的變化，形成了單體和多聚體之間的可逆轉變過程。
在正常細胞中，當膜電位正常時，JC-1會透過粒線體膜極性進入粒線體，並因濃度升高而形成紅色螢光多聚體；而在凋亡細胞中，粒線體跨膜電位去極化，JC-1以降低的濃度從粒線體釋放出來，並逆轉為綠色螢光單體形式。因此，透過檢測綠色和紅色螢光就可以檢測出粒線體膜電位的變化。
註：圖片引自網絡
JC-10 探頭
JC-10是JC-1的衍生物，是一種電位依賴性探針，用於透過流式細胞儀、螢光顯微鏡和基於微量滴定板的螢光測定來測定粒線體跨膜電位。在健康細胞中，JC-10 選擇性地累積在粒線體中，產生表現出寬激發光譜和在 590 nm 處發射大的值的紅色聚集體。然而，在凋亡和壞死的細胞中，粒線體跨膜電位較低，JC-10 會擴散出粒線體並產生 JC-10 單體，導致螢光轉向綠色發射（525 nm）。它已成功用作多種樣本類型（包括肌肉細胞、神經元、完整組織和分離的粒線體）中線粒體跨膜電位的指標。
JC-10——JC-1的替代品
- 穩定性：JC-10在水介質中溶解度較高、靈敏度較高，因此檢測偏差較小。
- 增強訊號：JC-10 具有比 JC-1 更高的訊號與背景比。
- 增強的靈敏度：在所有測試的細胞系中，JC-10 能夠比 JC-1 更好地檢測到粒線體跨膜電位損失的細微變化。
- 應用範圍廣泛：JC-10可用於原代大鼠肝細胞。
- 方便：JC-10與螢光酶標記物、細胞成像儀和流式細胞儀相容。
筆記：。使用 JC-10 和 JC-1 測量了 Jurkat 細胞中粉刺引起的粒線體膜電位變化。用喜樹鹼 (10 mM) 處理 Jurkat 細胞 4 小時後，將 JC-1 和 JC-10 染料上採樣溶液加入孔中並孵育 30 分鐘。使用 NOVOstar 酶標記儀（BMG Labtech）在 Ex/Em = 490/525 nm 和 490/590 nm 處測量 JC-1 和 JC-10 的聚集形式和單體形式的螢光強度。
結果分析
檢測JC-1單體時，激發光可設定為490nm，發射光可設定為530nm；檢測JC-1聚合物時，激發光可設定為525nm，發射光可設定為590nm。流式細胞儀檢測細胞凋亡，透過FL-1通道檢測綠色螢光，透過FL-2通道檢測紅色螢光。 FL-1+、FL-2 +為正常細胞，FL-1+、FL-2-為凋亡細胞。
註：圖片來源為中國流線協會網站論壇
毫無疑問地運作
Q：JC-1粒線體膜電位螢光探針，該產品可以用來染色組織切片嗎？
答：將活組織消化成單一細胞，確保細胞的活性後再進行染色。
Q：我可以在使用 JC-1 染色之前固定細胞嗎？
答：不是。固定會破壞電位，導致探針無法在粒線體上累積並失去特異性。
問： JC-1工作液中有聚集顆粒，我打算在染色前透過離心去除它們，有沒有建議的離心參數？
答：JC-1工作溶液可以以13,000 g離心約1-2分鐘。
訂購資訊
| 產品名稱 | 貨號 | 規格 |
| 40705ES03/08 | 1毫克/5毫克 | |
| 40707ES03/08 | 1毫克/5毫克 |