支原體檢測、預防和去除-一步到位！

支原體

支原體（Mycoplasma）又稱支原體，是迄今為止發現的最小、最簡單的原核生物，直徑為0.1至0.3μm。它能穿過過濾器，且多形性強，呈球形、棒狀、絲狀和分枝狀等多種形狀。在實驗室和生物製藥生產中，細胞培養容易受到支原體污染。根據文獻通報，保存的細胞株支原體污染發生率約為15%-35%，在生物製藥產業中，此發生率為0.44%-6.70% ^[1]。

圖1：支原體的形態

支原體污染的影響

細菌和真菌污染相對容易檢測、預防和去除，但支原體污染很難被注意到。即使生長密度高達 10^7-10^9 CFU/ml，也可能沒有明顯的污染跡象（例如渾濁度或 pH 值變化）。支原體污染可導致細胞發生各種變化（見圖2）。

圖2：支原體污染後細胞狀態的變化

支原體檢測的應用場景

支原體污染的典型來源

• 細胞間交叉污染；
• 工作環境或實驗設備受到污染；
• 實驗者無菌技術差；
• 培養基或其他試劑受污染；
• 用於細胞製備的原始組織或器官受到污染。

細胞培養遭遇支原體污染時該怎麼辦

圖 3：支原體污染的全面解決方案

細胞支原體污染的三效解決方案

1. 支原體檢測

一步恆溫支原體檢測：

Yeasen該公司的一步式恆溫支原體檢測試劑採用獨特的恆溫擴增技術，顏色辨別能力更強，從藍紫色（陰性）到天藍色（陽性），更容易進行目視識別。它包含防污染組件，以消除誤報。

圖4：一步法支原體偵測操作流程

基於PCR的支原體檢測：

Yeasen本公司的PCR支原體檢測方法與傳統的一步法PCR不同，使用三對引子取代一對引子，針對支原體的16S和23S保守區進行嵌套PCR擴增。這顯著提高了靈敏度，同時降低了非特異性，並檢測到低至單一拷貝的支原體。

圖5：不同支原體濃度樣本PCR擴增凝膠電泳圖

圖6 不同支原體濃度樣本PCR擴增凝膠電泳圖

表 1：可偵測的支原體類型 Yeasen一步法恆溫支原體檢測試劑

註：藍色部分錶示可透過一步等溫檢測和 PCR 方法檢測到的支原體類型。

2. MycAway支原體消除試劑（1000×）

MycAway 支原體消除試劑（1000×）是一種混合配方，可透過抑制支原體生長所需的 DNA 和必需蛋白質合成來有效消除支原體，而不會損害細胞。它最大限度地挽救您的細胞並減少因支原體污染造成的損失。

圖7：細胞消除效果演示

支原體消除試劑特點：

• 低毒性： 細胞毒性極小，不影響後續細胞實驗 例如細胞活力測試和轉染；
• 高穩定性：可在-20°C下長期保存，同時保持功效；
• 方便使用：只需將產品加入被支原體污染的培養基中，進行培養即可；
• 快速作用：最快3天即可看到效果；
• 廣譜： 對大多數實驗室支原體類型有效。

圖8 支原體消除試劑細胞毒性試驗圖

3. 支原體的預防

產品 資訊

類別	產品名稱	貨號	規格
偵測	MycAway™ -Color 一步法支原體檢測試劑盒 熱門	40612ES25/60	25/100噸
	MycAway™ 支原體即時 qPCR 檢測試劑盒 熱門	40618ES25/60	25/100噸
	GMyc-PCR支原體檢測試劑盒	40601ES10/20	10/20 次檢測
移動	MycAway™ 噴霧 (即用型)	40605ES02/03	1/2×500毫升
	MycAway™ 治療 (1000×)-支原體消除試劑	40607ES03/08	1/5×1毫升
預防	MycAway™預防性（2000×）-支原體預防試劑	40608ES03/08	1/5×1毫升
	MycGuard™ -1 溶液 (100×)	40609ES60	100 毫升
	MycGuard™-2 溶液 (500×)	40610ES60	100 毫升