Yeasen 的逆轉錄酶原料促進高品質 cDNA 合成
逆轉錄酶，也稱為RNA依賴性DNA聚合酶，是一種將單股RNA轉錄為DNA的DNA聚合酶。逆轉錄酶的性能將直接影響分子診斷試劑的最終性能。針對分子診斷試劑生產企業的痛點，
1. 逆轉錄酶的作用是什麼？
2.如何選擇逆轉錄酶？
3. 為什麼選擇
4. 相關產品及業績
5. 相關產品
1. 逆轉錄酶的作用是什麼？
逆轉錄酶是一種RNA依賴性的DNA聚合酶。它可以轉錄模板RNA並形成互補DNA（cDNA）。單股 cDNA 利用 DNA 聚合酶轉化為雙股 DNA。因此，逆轉錄酶通常與聚合酶鍊式反應技術（稱為 RT-PCR）結合使用，以量化 mRNA 合成水平。定量 RT-PCR 檢測常用於疾病診斷。因此逆轉錄酶在科學研究和實際應用上有著重要的作用。
2.如何選擇逆轉錄酶？
常見的逆轉錄酶有M-MLV、AMV，其中M-MLV優於AMV。但傳統的 RT 酶有兩個活性位點，一個執行聚合酶活性，另一個執行核糖核酸酶 H 活性。 RNase H 是一種內切酶，能夠降解 DNA-RNA 雜交家族的 RNA 部分。因此，缺乏RNase H活性的逆轉錄酶有利於cDNA合成。除此之外，使用熱穩定版本的 RT 有利於降低非特異性核酸擴增並最大限度地減少複雜二級結構的影響。
3. 為什麼選擇 Yeasen 的逆轉錄酶？
4. 相關產品及業績
4.1 耐65°C高溫
以500ng 293T細胞總RNA為模板，以Hifair™Ⅲ逆轉錄酶在42℃-65℃下進行逆轉錄。取1 μL cDNA為模板，擴增TFRC基因（4.4kb）。
圖1. 在42°C-65℃條件下進行逆轉錄
4.2 相容複雜模板
反應溫度55℃可滿足常規模板和二級結構模板的逆轉錄，高GC模板的反應溫度可適當提高到65℃。
圖 2.適用於富含GC的模板和二級結構模板
4.3 優異的擴展性能
以500ng293T細胞總RNA為模板，以Oligo（dT）為引子，以Hifair™Ⅲ逆轉錄酶合成cDNA。取1 μL cDNA為模板，擴增DY1C1N1基因5’500bp（19.9kb）。結果表明，Hifair™ Ⅲ逆轉錄酶可以合成長達19.8kb的cDNA。
圖 3. 可合成長達19.8kb的cDNA
4.4 快速合成
以293T細胞的RNA為模板，依照手冊中的標準程序進行逆轉錄，分別依照5、10、15、30、45、60分鐘設定逆轉錄時間。 Hifair™ III逆轉錄酶可在5分鐘內合成6kb的cDNA，其專一性和產量優於V品牌。
圖4. 5分鐘內即可合成6kb cDNA
4.5 線性範圍寬
以293T細胞5pg-5μg總RNA為模板，利用Hifair™III逆轉錄酶合成cDNA。以1 μL cDNA為模板，4個基因進行qPCR，結果顯示擴增效率皆在98%~100.10%之間。這表明 cDNA 可以在較寬的線性模板範圍內有效合成。
圖 5. 可在廣泛的模板範圍內高效合成 cDNA
4.6 嚴格的品質控制
確保性能穩定
圖6.殘留物檢測
5. 相關產品
提供的產品
表 1. 相關產品
| 產品定位 | 產品名稱 | 庫存單位 |
| 逆轉錄酶 | Hifair™ Ⅲ逆轉錄酶 （200 單位/微升） （適用於 RT-LAMP 和快速 RT）（查詢） | 11111ES |
| 希菲爾™ V 逆轉錄酶 (200 U/μL) （用於 RT-qPCR） | 11300ES | |
| Hifair™ IV 逆轉錄酶（200 U/μl） （為了 NGS使用） | 11112ES | |
| 希菲爾™ V 逆轉錄酶 | 11301ES | |
| 小鼠 RNase 抑制劑 | 小鼠 RNase 抑制劑 (40 U/µL) | 10603ES |
| 小鼠 RNase 抑制劑（200 U/µL，不含甘油） | 10703ES | |
| 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 | 希夫 Unicon™ Hotstart Direct Taq DNA聚合酶，50 U/μL （查詢） | 10718ES |
| 希夫 UNICON™ Hotstart E-Taq DNA 聚合酶，5 U/μL | 10726ES |
關於閱讀
逆轉錄酶選擇指南