在使用傳統的高保真度酶進行PCR反應時，不可避免地會遇到一些棘手的問題。例如，保真度可能不夠，即使在擴增片段進行定序後，也會導致目標鹼基突變或缺失。擴增時間也相對較長；有時，擴增一個5kb的片段可能需要近2個小時。現在小醫推出快速高保真PCR來解決您的煩惱！ -- 希夫卡納斯™ AdvanceFast PCR Master Mix（超快速高保真 PCR 預混液）。
這 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 預混液（含染料） 含有預先添加的電泳指示劑，可直接使用PCR產物進行電泳。擴增產物具有平末端。這種高保真度酵素混合物具有快速、簡單、高靈敏度、強特異性和穩定的優點。在反應體系中僅需添加引子和模板。此外產品還含有特定的保護劑，確保高保真PCR預混液經過反覆凍融後仍能維持穩定的活性。
產品特性
- 高的 保真度： 低的 不匹配 速度， 和 一個 根據 不匹配 比率 的 231/300,000 在 高的 氣相層析 易發生突變 序列；
- 快速地 放大 速度： 擴大 速度 作為 快速地 作為 5 秒 每 千字節；
- 寬的 適用性： 有能力的 的 覆蓋 基因 和 20-80% 氣相層析 內容， 容忍 老鼠 裂解物 和 20％ 血;
- 好的 穩定： 能 是 儲存 在 37°C 為了 7 天 沒有 影響 產品 表現;
- 快速地 和 方便的： 簡單地 添加 引子 和 範本 為了 放大， 來 和 載入中 染料 為了 直接的 電泳。
產品性能演示
高保真度，低失配率
以不同物種的基因組作為模板，選擇了六個極易發生鹼基突變/缺失的富含 GC 的片段進行擴增。將各 PCR 產物克隆到載體中，每個序列挑選 100 個單克隆進行定序，以確認鹼基錯配/突變的發生。結果顯示，快速高保真PCR試劑盒（10164ES）與國內外品牌試劑相比，鹼基錯配/突變檢出率更優異。
延長時間可達5秒/kb
使用快速高保真度酵素預混液（10164ES）和Product T，以5sec/kb的延伸速率從100ng人類基因組DNA模板擴增出不同長度的片段（0.4~10kb），延伸時間為5sec/kb。結果表明，快速高保真酶預混液（10164ES）可以擴增10kb以內的片段，延伸速率為5秒/kb。
可擴增不同GC含量的基因片段
使用快速高保真度酶預混液（10164ES）從人類基因組DNA模板擴增GC含量為23-76％的基因片段，延伸時間設定為5秒/kb。結果表明，該產品具有良好的擴增特異性，能夠擴增不同GC含量的片段。
能夠擴增具有不同GC含量的基因片段
使用快速高保真度酵素預混液（10164ES）擴增不同樣本中不同長度的片段，延伸時間設定為每千鹼基5-10秒。結果顯示該產品具有良好的擴增特異性，且能相容於不同模板不同片段的擴增。
註：1.小鼠基因組DNA 1 kb； 2. 小鼠基因組DNA 2 kb； 3. 小鼠基因組DNA 6 kb； 4.玉米基因組DNA 1kb； 5. 水稻基因組DNA 2 kb-A； 6. 水稻基因組DNA 2kb-B； 7.人293細胞cDNA 1kb； 8.人293細胞cDNA 2kb； 9.人293細胞cDNA 3kb； 10.人293細胞cDNA 12kb； 11. 大腸桿菌培養基 8 kb； 12. 大腸桿菌培養基 16 kb； 13. 水稻基因組DNA 10 kb-A； 14.水稻基因組DNA 10 kb-B； 15. 水稻基因組DNA 10 kb-C； 16. 水稻基因組DNA 20 kb-A； 17. 水稻基因組DNA 20 kb-B； 18. 人體血液直接擴增3kb。
跨物種模板擴增檢測率高
使用快速高保真酶預混液（10164ES），擴增擬南芥、油菜、馬鈴薯中0.5~10kb範圍內不同GC含量的片段，延伸時間為5sec/kb。結果表明，快速高保真酶預混液（10164ES）可以保證擴增成功。
使用快速高保真酶預混液（10164ES），擴增擬南芥、油菜、果蠅、秀麗隱桿線蟲和斑馬魚的隨機序列（隨機選擇），片段大小範圍為0.5-10 kb，涵蓋20-80％的GC含量。延伸時間設定為5秒/kb。結果顯示快速高保真度酵素預混劑（10164ES）具有較高的檢出率。
穩定性好
使用已熱加速在37℃下保存3天和7天的快速高保真酶預混液（10164ES），從100ng人類基因組DNA中擴增3kb和5kb的DNA片段，延伸時間設定為5秒/kb。結果顯示產品穩定性良好。
客戶試用回饋
動物 基因組DNA-120bp-50%GC
顧客評估：PCR過程快速，條帶合適，可直接上樣瓊脂糖凝膠電泳。 N品牌的條帶偏向上，可能是受其自身緩衝液的影響，並且由於沒有添加上樣緩衝液，該產品可以替代我目前的實驗方案中的高保真酶。
植物 cDNA-729bp-45.13%GC
顧客評價：相較於T品牌，克隆條帶更清晰、更均勻，整個PCR過程更快。跑膠時無需添加額外的染料，非常方便且省時。
微生物 gDNA-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC
顧客評價：和V牌子相比，效果差不多，但是個人覺得更勝一籌。
植物 cDNA-2000bp-40%GC
顧客評價：效果很好，條帶清晰。
高保真 PCR 選擇指南
| 產品定位 | 產品名稱 | 貓＃ |
| 5s/kb，確保保真度和速度（使用 染料） | 10164ES | |
| 5s/kb，確保保真度和速度（無染料） | 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 預混液 | 10163ES |
| 83×Taq，高偵測率（含染料） | 2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix（含染料） | 10154ES |
| 83×Taq單酶+Buffer分離 | 10153ES |