有效降低時間，通過最新升級到OnePot mRNA轉錄過程確保質量！

近年來，mRNA技術的開發和應用持續受到關注。 mRNA藥物涉及將編碼抗原蛋白的mRNA接種到人體中。它們利用人體細胞內的遺傳物質，表達和合成抗原蛋白。該過程透過抗原蛋白誘導和激活人體的免疫系統，旨在預防和治療疾病。 mRNA藥物具有安全、有效、週期短等優勢。它們可以同時誘導體液和細胞免疫，並已應用於多種適應症，包括腫瘤、傳染病、罕見疾病、心血管疾病等。

mRNA藥物開發的整個過程大致可以分為幾個步驟：

序列測定與設計—mRNA體外轉錄—包封製備

這 傳統的 mRNA體外轉錄（IVT）的步驟包括：

質粒 DNA 萃取與線性化—質粒 DNA 純化—體外轉錄（共轉錄加帽）—純化—mRNA原液

這 一鍋 mRNA體外轉錄（IVT）過程包括：

質粒 DNA 萃取與線性化—體外轉錄（共轉錄加帽）—純化—mRNA 原液

目前，大多數現有製程均在酶切後、IVT 步驟之前對質粒 DNA 進行單一純化步驟。 Yeasen Biotechlogy基於成熟的mRNA應用開發中心，開發了「Onepot mRNA轉錄」製程。在此過程中，環狀質粒DNA在酶切後未被純化；而是直接用於體外轉錄，從而得到高品質的mRNA原液。整個流程在確保產品和製程品質的同時，縮短了現有流程的持續時間。

工藝優勢：

1. 流程優化，減少IVT步驟，操作更簡單。
2. 材料成本更低，無需裂解後純化和品質檢驗。
3. 保持 mRNA 的品質和產量。

數據：

1. 收益和 正直：

使用 1μg線性化的2K、4K和9K質粒，一鍋法可以產生150-200μg的mRNA。

長度	效益	正直
2K	200 微克	94.00%
4K	185 微克	92.20%
9千	150 微克	87.50%

使用毛細管電泳 (CE) 進行完整性測試，以評估長度為 2K、4K 和 9K 的片段的完整性。 2K和4K片段的完整性>92％，9K片段的完整性>87％。

2. mRNA 加帽效率檢測

採用LC-MS評估2K序列的封端效率，結果顯示封端效率為99.5%。

上圖：HPLC UV 色譜圖

下面的圖像：解卷積分子量譜

3. mRNA多聚腺苷酸化效率檢測

採用LC-MS檢測樣品的聚腺苷酸化效率，結果呈常態分佈。

上圖：液相層析TIC色譜圖

下面的圖像：解卷積分子量譜

4.mRNA表現 測定

使用合成的 mRNA 產物轉染 293T 細胞 傳統的 流程 （左，線性化質粒 瓦純化） 而一鍋法（右，未經純化的線性化質粒）在培養 24 小時後螢光蛋白表現沒有差異。

訂購資訊