UCF.ME™ UltraNuclease,又稱全能核酸酶、廣譜核酸酶和非限制性抑制性內切酶,源自黏質沙雷氏菌,但隨後由
1. 什麼是全能核酸酶?
2.全能核酸酶的使用場景有哪些?
3.全能核酸酶需要具備什麼優勢?
4. 常見問題
5.相關產品
1. 什麼是全能核酸酶?
全能核酸酶是經過基因改造的內切核酸酶,能夠降解多種核酸形式,包括單股、雙股、線性、天然和變性核酸。它們產生長度為 3 至 5 個鹼基的 5'-單磷酸寡核苷酸,並且不表現出特定的鹼基辨識。這些多功能核酸酶在各種條件下表現出強大的穩定性和消化活性,使其能夠高效消除樣本或產品中的核酸殘留物。這提高了樣本的純度和產品的生物有效性,使得全能核酸酶成為科學研究、疫苗以及蛋白質和多醣藥等行業的首選酵素製劑。
此外,全能核酸酶在疫苗、抗體、細胞療法和其他生物製品的製備過程中對核酸的去除起著至關重要的作用,確保符合FDA法規,即治療用最終產品中殘留核酸不得超過10 pg/劑。透過降解核酸,全能核酸酶降低細胞裂解物的黏度,促進病毒、AAV 載體和包涵體等細胞衍生顆粒純化過程中的溶液過濾/超濾過程。這簡化了處理過程,改善了離心過程,提高了沉澱物和上清液的分離效率,並提高了色譜純化的有效性,最終提高了產量和產品純度。
2.全能核酸酶的使用場景有哪些?
UltraNuclease的應用範圍很廣,以下介紹特定的使用場景。
2.1病毒純化(慢病毒、AAV、重組腺病毒疫苗、滅活病毒、溶瘤病毒等)
病毒在生物醫學領域的應用正在顯著擴大,涵蓋疫苗、細胞治療、基因治療等各個領域。負責病毒生產的宿主細胞主要是連續傳代細胞(CCL)。 CCL 表現出不受控制的生長的遺傳傾向,使其具有無限增殖的能力。然而,CCL 中殘留的 DNA 可能帶來潛在風險,例如不受控制的人體細胞增殖導致腫瘤形成。此外,這些殘留的 DNA 片段可能含有傳染性病毒基因組,從而引發對感染風險和腫瘤發生的擔憂。因此,必須採取嚴格的控制措施來管理生物製品中的殘留DNA,確保其安全。在這方面,我們的UCF。ME™ UltraNuclease 為病毒純化提供了安全的解決方案。
鹽在減輕蛋白質或病毒聚集方面起著關鍵作用,有助於 DNA 和 RNA 與蛋白質和其他細胞成分的分離。鹽活性超核酸酶是一種非特異性內切酶,在高鹽濃度下表現出最佳活性。在高鹽條件下,酵素能夠更好地接觸釋放的 DNA 和 RNA,從而增強它們的降解。事實證明,在高鹽環境中活性增強的核酸酶可更有效地增強淨化過程。鹽活性超核酸酶可用於降低細胞上清液和裂解物的黏度,提高高鹽條件下的純化效率。該酵素還將宿主核酸殘基減少至皮克水平,從而提高各種生物製品應用的性能和安全性,包括病毒純化、疫苗製造以及蛋白質和多醣藥物的生產。
2.2 大腸桿菌表達重組蛋白的純化
大腸桿菌中表現的某些蛋白質傾向於聚集成包涵體,這使得純化過程變得複雜,因為它們經常與宿主 DNA 交織在一起。由此產生的破裂的細菌細胞會表現出高黏度,從而顯著降低蛋白質的純化效率。而在超音波破碎過程中向菌液中加入10-50 U/mL的UCF.ME™UltraNuclease,破碎完成後將樣品在37°C下孵育30分鐘或4°C下孵育過夜,可以有效降低菌液的黏度。這反過來又大大提高了淨化過程的效率。總而言之,您可以依靠我們的UCF.ME™ UltraNuclease來促進蛋白質的有效純化。
2.3 防止細胞聚集
近年來,冷凍保存的周邊血單核細胞(PBMC)在免疫測定中的使用急劇增加。 PBMC細胞最大的特點就是復甦後非常容易結塊,容易導致細胞質量低下,檢測結果不可靠。當細胞復甦時,在培養基中添加適當濃度(25-50 U/mL)的UCF.ME™UltraNuclease與細胞共培養,可有效防止細胞結塊。因此,您可以充分利用我們的 UCF.ME™ UltraNuclease 來增加成功的幾率。
3.全能核酸酶需要具備什麼優勢?
3.1 應用範圍廣泛
UCF.ME™ UltraNuclease可在多種實驗條件下切割和降解各種形式的DNA和RNA,可用於去除各種生物製品中殘留的核酸。
3.2 純度高、酵素活高
我們的UCF.ME™ UltraNuclease酶純度大於等於99%(HPLC),酵素活力大於等於1.5*106 U/mg(一般底物絕對定量法)。
3.3 適應性強
UCF.ME™ UltraNuclease在儲存和凍融過程中具有很高的穩定性。我們將UCF.ME™ UltraNuclease儲存於-20°C、4°C和37°C下,以檢測酵素活性趨勢。 37℃放置2週,酵素活性無明顯變化。同時,為了確保酵素的穩定性,我們採用乾冰+冰袋的組合來 運輸 UCF.ME™ UltraNuclease 送到您的手中。它還具有很強的耐受性,可以適應各種操作條件。
3.4 遵守藥典
UCF.ME™ UltraNuclease 在UCF.ME(超淨工廠)生產。什麼是超淨酶?是達到無HCD、HCR、HCP,DNASE FREE、RNASE FREE,無蛋白酶殘留,無微生物殘留,無致病菌,無動物來源,無抗生素污染,超低內毒素殘留,高酶活,高純度等品質標準的分子酶,請放心使用,安全可靠。
3.5 GMP生產
UltraNuclease生產全過程在GMP生產車間完成,品質檢驗計畫嚴格遵守 藥典 滿足了從研發到生產的大規模需求。
UCF.ME™ UltraNuclease的合作夥伴-UltraNuclease ELISA試劑盒
在正常的純化步驟中,UCF.ME™ 超核酸酶 容易作為雜質被除去。 檢測 UCF.ME™ 的殘留 超核酸酶,
超核酸酶 酵素連結免疫吸附試驗試劑盒
線性範圍在0.047至3 ng/mL之間,R2大於0.99。批次間重現性好,我們在樣本中加入固定濃度的UltraNuclease,並使用3個不同批次的ELISA試劑盒進行檢測。核酸酶濃度在3~0.186 ng/mL之間,檢測回收率在70%~110%之間,CV小於10%。且UltraNuclease不同濃度的模擬樣品回收率皆在70%~130%之間,優於其他品牌。我們評估了UltraNuclease抗體對8種常見樣本的非特異性結合,它還具有很強的特異性。幹擾組與對照組結果重疊,未見幹擾。
根據 UltraNuclease 的 DMF 申請,
4. 常見問題
Q1:在哪一步加入UltraNuclease?
答:這取決於您處理的樣品。在病毒純化中,一般在病毒澄清後加入;在大腸桿菌蛋白質純化中,可在細胞裂解時添加;處理細胞結塊時,可直接加入培養基中與細胞共培養。
問題2: 若反應溫度達不到37℃,如何使用?
一個: UltraNuclease的酵素活性受溫度、處理時間和酵素活性單位的影響。若溫度無法達到37℃,可適當增加酵素量,或延長孵育時間。
問題3:UltraNuclease 與蛋白酶抑制劑相容嗎?
一個: 相容,但請注意許多蛋白酶抑制劑含有 EDTA。當EDTA開始高於1mM時,EDTA會抑制一些核酸酶的活性。
問題4: 如何去除 UltraNuclease?
一個: 可以透過TFF、透析、色譜柱等方法去除。
問題5: UltraNuclease ELISA試劑盒可以用於檢測其他品牌的全能核酸酶殘基嗎?
一個: 我們不建議這樣做。此ELISA試劑盒完全基於UltraNuclease開發,可以對UltraNuclease進行準確定量。其他品牌的Altipotent核酸酶在序列、生產製程等方面可能與UltraNuclease有所不同,檢測結果可能不準確。
5. 相關產品
提供的產品
表 1 相關產品
產品名稱 | 庫存單位 | 規格 |
20157ES25/60/80/90 | 25千單位/100千單位/1萬個/5萬個 | |
20159ES25/60/80/90 | 25千單位/100千單位/1萬個/5萬個 | |
36701ES59 | 96T | |
鹽活性 超核酸酶 ELISA 試劑盒 | 36703ES96 | 96T |