描述
海法™ 多重一步法 RT-qPCR 探針試劑盒 (聯合發展集團 加)是一款以RNA為模板的多重定量PCR試劑盒。實驗過程中，逆轉錄和定量PCR在同一管內進行，簡化了實驗操作，降低了污染風險。
本試劑盒採用耐熱Hifair高效合成第一鏈cDNA商標 V 逆轉錄酶和 UNICON 定量擴增™ HotStart Taq DNA 聚合酶。此試劑盒主要含有優化的MP緩衝液、酵素混合物等。2+ 和 dNTP。此外，還添加了能有效抑制非特異性PCR擴增及提高多重qPCR反應擴增效率的因子，在確保擴增效率的同時，可進行多達多重的擴增反應。添加dUTP/UDG系統，有效防止氣溶膠污染的風險。
特徵
1. 格多功能性： 適用於病原微生物、人類基因組、植物等物種的核酸qPCR擴增與檢測。
2. 高靈敏度： 精心優化的緩衝系統將低濃度模板的檢測靈敏度提高至250拷貝/毫升。
3. dUP/UDG 系統： 引進dUTP/不耐熱UDG防污染體系，高效率降解產品氣溶膠污染，降低假陽性，確保結果真實。
4. 支援英 快速程序：相容快速40分鐘程序。
5. 超強穩定性： 穩定埃 37℃保存14天，反覆凍融10次。
成分
| 成分 | 姓名 | 16630ES60 (100噸) | 16630ES80 (1000噸) | 16630ES92 (萬噸) |
| 16630-A | 5×Hifair MP 緩衝器 | 500 微升 | 5 毫升 | 50 毫升 |
| 16630-B | 希菲爾酵素 混合 | 100 微升 | 1 毫升 | 10 毫升 |
| 16630-C | GC增強劑 | 500 微升 | 5 毫升 | 50 毫升 |
筆記： 1） 5×海富商標 MP 緩衝器 是 海法商標 V 多重一步法 RT-qPCR 探針緩衝液， 包括 dNTP、dUTP、Mg2+、穩定劑、增強劑等等。
2） Hifair 酵素混合物 主要包含 耐熱 Hifair商標 V 逆轉錄酶，UNICON商標 HotStart Taq DNA 聚合酶和 UDGase。
3） GC 增強劑是可選的。請查看 GC 增強器免費版本： 目錄號：16901ES。
4) 16630-A 和 16630-B 相當於 16901-A 和 16901-B。
規格
| PCR 方法 | 一步法 RT-qPCR |
| 樣品類型 | 核糖核酸 |
貯存
電視他 產品 應該 是 儲存 在 -25℃~-15℃ 為了 1 年。
數位
圖 1. 高偵測率
指示
1. 反應 作品
| 成分 | 體積 （μL) | 最終濃度 |
| 5×Hifair™ MP 緩衝器 | 5 | 1 × |
| Hifair 酵素混合物 | 1 | - |
| GC增強劑 | 0-5 | - |
| 引子混合物（10 μM） | 0.4 每個 | 0.16 μM |
| 探針混合物（10 μM） | 0.2 每個 | 0.08 μM |
| 核糖核酸 | 1-5 | - |
| 無 RNase 的水 | 至 25 | - |
筆記：使用前請務必搖勻，避免劇烈震動造成過多氣泡。
a) 引子濃度： 底漆 混合物包括多重引物， 根據情況，最佳引子濃度可能在0.1至1.0μM之間。
b) 探針濃度：探針混合物包括標記不同螢光基團的多重探針，根據情況最佳探針濃度可能在0.05和0之間。5 μM。
c) 模板稀釋：qPCR 敏感度較高，建議稀釋模板。對照Ct值在20~35之間較為合適。
d) 系統準備：卸下帶有濾芯的濾頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
2. 優化循環方案
| 反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環 | |
| 1 | 反轉錄 | 50 攝氏度一個 | 15 分分鐘 | 1 |
| 2 | 初始變性 | 95°C | 5 分鐘 | 1 |
| 3 | 擴增反應 | 95°C | 15 秒 | 45 個循環 |
| 60°Cb | 30 秒c |
筆記：a) R反向轉錄： 溫度可選擇42攝氏度 或 50攝氏度 10-15分鐘。
b) 擴增反應：依設計引子的Tm值調節溫度。
c) 螢光訊號擷取：請依照儀器說明書的要求設定實驗流程。
付款和安全
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