أصبحت كواشف التحويل الخلوي كواشف روتينية لدراسة ومراقبة وظيفة الجينات في الخلايا حقيقية النواة. تُستخدم كواشف التحويل على نطاق واسع في أبحاث وظيفة الجينات وتنظيم التعبير الجيني وتحليل الطفرات، فضلاً عن العلاج الجيني والعلاج الخلوي وإنتاج البروتين وإنتاج اللقاحات. إذن ما هو التحويل الخلوي؟ وكيف تختار نوع كاشف التحويل بناءً على تجاربك؟

ما هي أنواع النقل الجيني؟

مميزات كواشف النقل الجيني من شركة Yeasen

كيفية اختيار نوع كاشف النقل بناءً على تجاربك؟

حالة التطبيق

مرجع لشروط النقل

الأسئلة الشائعة

قراءة محترمة

ما هي أنواع النقل الجيني؟

وفقًا لما إذا كان الحمض النووي مدمجًا في كروموسوم الخلية المضيفة بعد التحويل، فإنه ينقسم إلى "مؤقت" (التحويل المؤقت) و"مستقر" (التحويل المستقر). تختلف كفاءة التحويل، والسمية الخلوية، والتأثيرات على الفسيولوجيا الطبيعية، ومستويات التعبير الجيني لطرق التحويل المختلفة. تتم مقارنة المبادئ والتطبيقات والخصائص في الجدول التالي:

الجدول 1 مقارنة بين طرق النقل المختلفة

مميزاته كواشف النقل الجيني من شركة Yeasen

بالنسبة لكاشفات نقل الحمض النووي وكواشف نقل الحمض النووي الريبي، تمتلك شركة Yeasen Biotechnology فريقًا قويًا للبحث والتطوير والإنتاج، وتعمل باستمرار على تحسين الصيغ وتحسين عمليات الإنتاج، وأطلقت مجموعة متنوعة من المنتجات القائمة على الليبوزومات الكاتيونية والبوليمرات الكاتيونية. توفر مؤسسات البحث العلمي والشركات مجموعة كاملة من المنتجات، ويغطي خط المنتجات جميع المجالات المتعلقة بكاشفات النقل.

• كفاءة عالية: مناسبة للانتقال المؤقت أو الانتقال المستقر لخطوط الخلايا.
• سمية منخفضة: تظل الخلايا المحولة قابلة للحياة بشكل جيد.
• قدرة واسعة على التكيف: تغطية شاملة للخلايا الشائعة والخلايا الأولية التي يصعب نقلها.
• سهل التشغيل: مناسب للوسط الموجود في المصل، دون تغيير الوسط قبل وبعد النقل.
• فعّالة من حيث التكلفة: اقتصادية وعملية، وكفاءة نقل عالية، وسعر منخفض.

كيفية اختيار نوع كاشف النقل بناءً على تجاربك؟

يجب أن يتم اختيار كواشف التحويل وفقًا للأغراض التجريبية المختلفة والمحتويات التجريبية، مثل المواد المحولة والخلايا المحددة وسهولة التشغيل وعوامل أخرى.

حالة التطبيق

كاشف نقل الليبوسومات Hieff Trans™

هييف ترانس™ يتم توفيره في صورة سائل معقم. بشكل عام، بالنسبة لنقل صفيحة ذات 24 بئرًا، يتم استخدام حوالي 1.5 ميكرولتر في كل مرة، و1 مل من Hieff Trans™ يمكن إجراء حوالي 660 عملية نقل؛ بالنسبة للصفيحة ذات 6 آبار، حوالي 6 ميكرولتر في كل مرة، 1 مل من Hieff Trans™ يمكن أن تفعل حوالي 660 انتقالًا. 160 انتقالًا؛

لمزيد من التفاصيل، يرجى الاطلاع الثقة في النقل الجيني باستخدام كاشف Hieff Trans™ Lipofectamine

بولي إيثيلين إيمين خطي (PEI) MW40000 (تحلل سريع)

PEI 40000 هو بوليمر كاتيوني مشحون للغاية بوزن جزيئي يبلغ 40000 يرتبط بجزيئات الحمض النووي المشحونة سلبًا بسهولة شديدة، ويشكل مركبًا ويسمح للمركب بدخول الخلايا. PEI 40000 هو كاشف انتقال مؤقت ذو سمية خلوية منخفضة وكفاءة انتقال عالية وكفاءة عالية في التعبير الجيني في خلايا مثل HEK293 وCHO. تم التحقق من صحة كواشف انتقال PEI الخطية لمجموعة واسعة من سلالات الخلايا بما في ذلك خلايا HEK-293 وHEK293T وCHO-K1 وCOS-1 وCOS-7 وNIH/3T3 وSf9 وHepG2 وHela. تصل كفاءة الانتقال إلى 80% ~ 90%.

لمزيد من التفاصيل، يرجى الاطلاع مفضل جديد للتحويل الجيني —— Linear PEI MW 40000، كاشف تحويل جيني أكثر كفاءة

هييف ترانس™ في المختبر كاشف انتقال siRNA/miRNA

يمكن لهذا المنتج تحقيق كفاءة تعبير تزيد عن 90% لـ 1 nM siRNA في مجموعة واسعة من سلالات الخلايا، مما يتجنب التأثيرات غير المستهدفة. مناسب لنقل مجموعة متنوعة من الخلايا، بما في ذلك Hela وMCF-7 وHepG2 وCHO والخلايا الملتصقة الأخرى؛ ويمكن لسلالات الخلايا المعلقة التي يصعب نقلها، مثل خلايا K562 أو THP-1، تحقيق كفاءة إسكات بنسبة 80%؛ بما في ذلك بعض الخلايا الأولية، والأرومات الليفية البشرية الأولية وخلايا الكبد البشرية الأولية، وما إلى ذلك، يمكن تحقيق كفاءة إسكات بنسبة 80%.

مرجع لشروط النقل

بالإضافة إلى التعليمات الخاصة بكل منتج، يعمل العملاء وفقًا لمحتوى تجريبي محدد، وستكون هناك اختلافات مختلفة في كمية الاستخدام. وفقًا لظروف نقل الخلايا في المختبر التي أبلغ عنها العملاء بعد استخدام المنتج، فقد تم فرزها للرجوع إليها.

الأسئلة الشائعة

1 كاشف نقل الليبوسومات Hieff Trans™

1.1 س: هل يمكن أن يكون المصل موجودًا عند تحضير مجمعات كواشف نقل الحمض النووي؟

ج: وجود المصل يؤثر على تكوين الليبوزومات. يوصى باستخدام وسط خالٍ من المصل (عادةً وسط MEM) عند تحضير مجمعات كواشف نقل الحمض النووي.

1.2 س: ما الذي يجب أن أنتبه إليه عند استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™؟

أ:

1) عندما يتم تحويل الخلايا، تكون كثافة الخلايا تفضيلياً 80% -95%، ويتم تحديد كثافة الطلاء النوعية وفقًا لحالة الخلايا؛

2) يساعد استخدام الحمض النووي عالي النقاء على الحصول على كفاءة نقل أعلى؛

3) يلزم تخفيف كواشف الحمض النووي وكواشف النقل باستخدام وسط خالٍ من المصل عند تحضير معقدات النقل؛

4) لا يمكن إضافة المضادات الحيوية إلى الوسط أثناء النقل؛

5) يجب تخزين الكواشف عند درجة حرارة تتراوح بين 2-8 درجة مئوية، ويجب الحرص على تجنب فتح الغطاء بشكل متكرر لفترة طويلة؛

6) يجب تحسين تركيز الحمض النووي وعدد كواشف الليبوزوم الكاتيوني للاستخدام الأول للحصول على أقصى قدر من كفاءة النقل. يوصى عمومًا بأن تكون نسبة الحمض النووي إلى كاشف النقل 1:2-1:3.

1.3 س: هل هناك حاجة إلى إنهاء العملية بعد النقل؟

ج: لا حاجة لذلك. تظل مجمعات الليبوزوم مستقرة لمدة 6 ساعات. إذا لم يتم تغيير وسط الخلية قبل التحويل الجيني، فمن أجل ضمان العناصر الغذائية اللازمة لنمو الخلايا الطبيعي، فمن الضروري التغيير إلى وسط جديد بعد 4-6 ساعات. ومع ذلك، إذا تم تغيير الوسط قبل التحويل الجيني، فليس من الضروري تغيير الوسط بعد تحويل الليبوزوم.

1.4 س: هل يمكن إجراء التحويل المشترك للحمض النووي والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين؟ ما هو التأثير؟

ج: نعم، عندما يتم نقل DNA و siRNA معًا، فإن كفاءة نقل siRNA ستكون أسوأ قليلاً.

1.5 س: هل يمكن استخدام كاشف التحويل الجيني لتحويل العبوات الفيروسية العدسية؟

أ: التغليف الفيروسي العدسي ممكن.

1.6 س: هل يمكن تحويل الخلايا المعلقة باستخدام كاشف تحويل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™؟

أ: يمكن استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™ لنقل الخلايا المعلقة، راجع البروتوكول للحصول على التفاصيل. بالإضافة إلى ذلك، قدمنا ​​أيضًا كاشف نقل خاصًا بالخلايا المعلقة (رقم الكتالوج 1000).40805، كاشف نقل الخلايا الليبوسومية الخالي من الخلايا Hieff Trans™

2 هييف ترانس™ في المختبر كاشف انتقال siRNA/miRNA

2.1 س: هل هناك حاجة إلى تغيير كاشف التحويل بعد التحويل؟

ج: يمكن تقسيم هذه المشكلة إلى حالتين: 1. إذا لم يكن هناك تغيير في الوسط قبل التحويل، فيجب تغيير الوسط بعد حوالي 6 ساعات من التحويل لضمان العناصر الغذائية اللازمة لنمو الخلايا؛ 2. إذا كان هناك تغيير في الوسط قبل التحويل، فهل يمكن تشغيله وفقًا للتشغيل الطبيعي للخلايا المزروعة؟ بعد عملية تغيير السائل؟

2.2 س: هل يمكن تجميد كواشف النقل الجيني؟

ج: لا يمكن تجميده، لأن كاشف التحويل هو كاشف تحويل كاتيوني PEI. التجميد في درجات حرارة منخفضة سيدمر نشاط كاشف التحويل PEI. لذلك، من الأفضل تخزينه عند درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية للحفاظ على أفضل فعالية للتحويل.

معلومات المنتج

بعض المقالات المنشورة باستخدام منتجاتنا

[1] Liu R, Yang J, et al. Optogenetic control of RNA function and metabolism using engineeringd light-switched RNA-binding protein. Nat Biotechnol. 3 يناير 2022. (IF:55)

[2] Luo J, Yang Q, et al. TFPI هو مستقبل في القولون لـ TcdB من السلالة شديدة الضراوة 2 من C. difficile. Cell. 17 مارس 2022.（IF:41.582）

[3] Zhou J, Chen P, et al. متغيرات Cas12a المصممة لتأثير أقل خارج الهدف على مستوى الجينوم من خلال التعرف الصارم على PAM. Mol Ther. 5 يناير 2022.(IF:11.454)

[4] Chen S, Cao X, et al. circVAMP3 يحرك فصل طور CAPRIN1 ويمنع سرطان الخلايا الكبدية عن طريق قمع ترجمة c-Myc. Adv Sci (Weinh). 24 يناير 2022.(IF:16.808)

[5] Gu C, Wang Y, et al. AHSA1 هو هدف علاجي واعد لتكاثر الخلايا ومقاومة مثبطات البروتيازوم في المايلوما المتعددة. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Jan 6.(IF:11.161)

[6] Zhang Y, Yu X, et al. Splicing factor arginine/serine-rich 8 promotes multiple myeloma malignant and bone lesion through alternative linking of CACYBP and exosome based cell communication. Clin Transl Med. 2022 Feb.(IF:11.492)

[7] Qin J, Cai Y, et al. Molecular mechanism of agonism and inverse agonism in ghrelin receptor. Nat Commun. 2022 Jan 13.(IF:14.9)

[8] تانغ إكس، دينج زد، وآخرون.بروتين جديد مشفر بواسطة circHNRNPU يعزز تطور الورم النقوي المتعدد عن طريق تنظيم بيئة نخاع العظم والربط البديل. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Mar 8.(IF:11.161)

[9] Xie F, Su P, et al. Engineering Extracellular Vesicles Enriched with Palmitoylated ACE2 as COVID-19 Therapy. Adv Mater. 2021 Oct 19. (IF:30.849)

[10] Liang Y, Lu Q, et al. Reactivation of tumour suppressor in breast cancer by booster switching through NamiRNA network. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7.(IF:16.9)

[11] Fan Y, Wang J, et al. CircNR3C2 يعزز تأثير HRD1-mediated tumor-suppressive effect عن طريق إسفنج miR-513a-3p في سرطان الثدي الثلاثي السلبي. Mol Cancer. 2 فبراير 2021.(IF:27.403)

[12] Dai L, Dai Y, et al. Structural insight into BRCA1-BARD1 complex recruiting to damaged chromatin. Mol Cell. 2021 Jul 1.(IF:17.97)

[13] Zhang K, Wang A, et al. UBQLN2-HSP70 axis يقلل من تجمعات بولي جلاي-ألا ويخفف من العيوب السلوكية في نموذج حيواني C9ORF72. Neuron. 16 يونيو 2021.(IF:17.17)

[14] Li T, Chen X, et al. جهاز بصري جيني قائم على BRET الاصطناعي للتعبير عن الجينات المنقولة النبضية مما يتيح توازن الجلوكوز في الفئران. Nat Commun. 27 يناير 2021.(IF:14.92)

[15] Yan F, Huang C, et al. Threonine ADP-ribosylation of Ubiquitin by a Bacterial Effects Family يمنع عملية تحويل اليوبيكويتين إلى مضيف. Mol Cell. 21 مايو 2020.(IF:17.97)

[16] Sun X, Peng X, et al. ADNP يعزز التمايز العصبي عن طريق تعديل إشارات Wnt/β-catenin. Nat Commun. 12 يونيو 2020.(IF:14.911)

[17] Yang X, Wang H, et al. Rewiring ERBB3 and ERK signaling confers resistant to FGFR1 inhibition in vascular cancer habored an ERBB3-E928G altered. Protein Cell. 2020 Dec.(IF:14.872)

[18] Zou Y, Wang A, et al. Analysis of redox landscapes and dynamics in living cells and in vivo using genetically encodedfluorescent sensors. Nat Protoc. 2018 Oct.(IF:13.490)

[19] Hao H, Hu S, et al. Loss of Endothelial CXCR7 Impairs Vascular Homeostasis and Cardiac Remodeling After Myocardial Infarction: Implications for Cardiovascular Drug Discovery. Circulation. 28 مارس 2017.(IF:29.69)

قراءة محترمة

كاشف التحويل الجيني – Hieff Trans™ وPEI

Linear PEI MW 40000، كاشف نقل جينات أكثر كفاءة