I de seneste år, med den hurtige udvikling af biofarmaceutiske midler og fremkomsten af celle- og genterapier samt mRNA-vacciner under pandemien, er sikring af sikkerheden og pålideligheden af biologiske produkter blevet et centralt fokus og regulatorisk prioritet for regeringer og regulerende organer verden over. Mycoplasma er en almindelig, men ofte svær at eliminere form for kontaminering. For bioprocesser, der involverer cellekultur, kræver reglerne, at 'der ikke må være mycoplasma-kontamination.
Point for Mycoplasma-testning krævet af regulerende organer
2.1 Krydsreaktivitet:
DNA fra 14 stammer af ikke-flexibakterielle phyla og 6 ingeniørceller, der almindeligvis anvendes i biomedicin, blev udvalgt, og ingen af målkanalerne nåede top, og den interne reference amplificeredes normalt.
| Tanslået Sarter | |
| Staphylococcus epidermidis | Pseudohyfer |
| Clostridium perfringens | Salmonella enterica Enteritidis subsp. enterica |
| Clostridium acetobutylicum | Bacillus subtilis (bacillus subtilis) |
| Acinetobacter baumannii (immobile bakterier) | Bacillus cereus |
| Lactobacillus acidophilus | HEK293 |
| Enterobacter aerogenes (taksonomisk klasse af bakterier) | Vero |
| Micrococcus garciniae | CHO |
| streptokokker mutans | E. coli |
| Pseudomonas aeruginosa | HEK293T |
| Streptococcus pneumoniae | Sf9 |
2.2 Nogle af dataene er som følger:
- Detektion Lefterligne
Nukleinsyreekstraktion og påvisning af 10CFU/ml Mycoplasma-standardstammer blev udført i overensstemmelse med instruktionerne fra standardstammerne og ekstraktions- og detektionskittene.
NCS- og NTC-prøverne blev testet på samme tid i hvert eksperiment, og resultaterne af 24 replikatbrønde med 10CFU/mL prøver af hver stamme opfyldte kravet om, at ≥23 af de 24 tests var positive, når NCS- og NTC-resultaterne var tilfredsstillende.
Tabel 1 Oplysninger om validerede stammer
| Serienr. | Mycoplasma navn | Koncentration af bakteriel væske |
| 1 | Mycoplasma arginini | 10 CFU/ml |
| 2 | Mycoplasma orale | 10 CFU/ml |
| 3 | Mycoplasma gallisepticum | 10 CFU/ml |
| 4 | Mycoplasma pneumoniae | 10 CFU/ml |
| 5 | Mycoplasma synoviae | 10 CFU/ml |
| 6 | Mycoplasma fermentans | 10 CFU/ml |
| 7 | Mycoplasma hyorhinis | 10 CFU/ml |
| 8 | Akoleplasma laidlawii | 10 CFU/ml |
| 9 | Spiroplasma citri | 10 CFU/ml |
| 10 | Mycoplasma salivarium | 10 CFU/ml |
Tabel 2 Detektionsgrænseresultater
| 10 CFU/ml | Forsøg 1 | Forsøg 2 | Forsøg 3 |
| Detektionshastighed | 8/8 | 8/8 | 8/8 |
| Total | 24/24 | ||
Produktinformation
| Produkt | Katalognummer | Produktnavn | produktspecifikation |
| Prøve forbehandlingssæt | 18461ES | 25T/100T | |
| 18467ES | MolPure® Mag48 prøveforberedelseskit FN | 3×16T/ 6×16T | |
| Nucleic syreekstraktionsinstrument | 80511ES | 48-kanals automatiseret nukleinsyreekstraktor | 48 kanal |
| Mycoplasma Detection Kit | 40619ES | 25T/100T |