Colitis-assoziierter Krebs (CAC) ist der dritthäufigste bösartige Tumor weltweit, mit der zweithäufigsten Morbidität und Mortalität nach Magen- und Leberkrebs.[1]Chronisch-entzündliche Darmerkrankungen (IBD) können das Risiko für die Entwicklung von Darmkrebs erhöhen. Die Kombination von AOM und DSS erfreut sich aufgrund ihrer Reproduzierbarkeit, Wirksamkeit, geringen Kosten und einfachen Anwendung zunehmender Beliebtheit. Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll zur Erstellung eines DSS-AOM-Modells zur Untersuchung der Onkogenese von CACs.
Tiermodell
BALB/c-Mäuse (7 Wochen alt, männlich)
Material
DSS(
Lösungsvorbereitung
Mit DSS angereichertes Trinkwasser: Verwenden Sie steriles Wasser, um eine 1–3%ige DSS-Lösung zuzubereiten. Bis zur Verwendung bei 4 °C lagern.
AOM-Lösung: Lösen Sie AOM in WFI, um eine 10 mg/ml Stammlösung zu erhalten. Aliquotieren und Bei -20 °C einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden. Am Tag der Verwendung Aliquot auftauen und 1/10 mit steriler Kochsalzlösung verdünnen.
Protokoll
- Am ersten Tag werden die Mäuse gewogen und markiert. Den Mäusen wird intraperitoneal eine AOM-Lösung von 10 mg/kg injiziert.
- Füllen Sie die Tränke der Mäusekäfige mit Wasser. Rechnen Sie mit 7–10 ml Wasser pro Maus und Tag. Fütterung für eine Woche.
- Ersetzen Sie das Trinkwasser eine Woche lang durch 2,5 % DSS;
- Zwei Wochen lang mit normalem Trinkwasser füttern;
- Wiederholen Sie die Schritte 3–4 dreimal.
Abb. 1. AOM/DSS-Modellierungsprotokoll für kolorektales Karzinom
Ergebnisse eines erfolgreichen CAC-Modells
Gewichtsverlust mit DSS-Behandlung
Abb. 2. Die Veränderung des Körpergewichts von Mäusen
2. Durchfall-Score und Blutungs-Score
Abb. 3. Durchfall Punktzahl und Blutungs-Score
3. Tumorbildung im Dickdarm von Mäusen
Abb. 4. Die repräsentativen gesamten Dickdarm und die Anzahl der Dickdarmkrebs
Abb. 5. Die Proteinexpressionen von COX-2, IL-6, β-Catenin und Snail in Mausmodellen mit akuter Kolitis und Azoxymethan (AOM)/DSS-induziertem kolorektalem Krebs (A) Dickdarmschnitte wurden mit H&E und den angegebenen Antikörpern gefärbt (B) Die Proteinexpression wurde mittels Western Blot mit den angegebenen Antikörpern untersucht, nachdem Dickdarmgewebe von zwei Mäusen jeder Gruppe lysiert worden war. β-Tubulin wurde als Ladekontrolle verwendet.[2].
Links zu dieser Ressource
[1]Qun Wang, et al. Saflorpolysaccharid hemmt AOM/DSS-induzierten Darmkrebs bei Mäusen durch die Regulierung der Makrophagenpolarisation[J].Frontiers in Pharmacology.2021.761641[2]Jia-Rong Huang,et al.Piperlongumin lindert Maus Colitis und Colitis-assoziierte Kolorektal Krebs[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885
Erfolgreiches Modellierungsbeispiel mit
Tabelle 1 Konstruktion verschiedener Enteritis-Modelle mit DSS
| Modell | Modellierungsbeispiele | Modellierungsplan | Modellierungsergebnisse | Nutzen Sie die Auswertung |
| akute Kolitis | BALB/c Mäuse, weiblich, 6-8 Wochen, 25 g | 3 %–5 % der DSS trinken 7 Tage hintereinander nach Belieben | Tag 5 erschien, die Länge des Dickdarms war verkürzt, HE-Färbung, und die Entzündung war offensichtlich | Die Formgeschwindigkeit ist hoch und die Zeit kurz. Im Einklang mit den Merkmalen des akuten Colitis-Modells |
| C57BL/6 Mäuse, männlich, 8 Wochen, 20 g | 3–5 % DSS durch Schlundsonde, kontinuierliche Verabreichung | Tag 5 tritt auf, Dickdarmverkürzung, Gewichtsverlust, Blut im Stuhl, Durchfall | Hohe Schimmelrate und kurze Dauer. Im Einklang mit den Merkmalen des akuten Colitis-Modells | |
| chronische Kolitis | C57BL/6 Maus, männlich, 8 Wochen, 22 g | 1-2 % DSS durch Schlundsonde, kontinuierliche Verabreichung | Tag 40 erscheint, Dickdarmverkürzung, Gewichtsverlust, Blut im Stuhl, Durchfall | Hohe Formungsrate. Im Einklang mit den Merkmalen des chronischen Colitis-Modells |
| Dickdarmkrebs | C57BL/6 Maus, männlich, 8 Wochen, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum für 5 Tage für 3 Wochen | 14 Wochen mit verkürzter Dickdarmlänge, Gewichtsverlust, HE-Färbung und offensichtlicher Entzündung | Hohe Formungsrate. Im Einklang mit den Eigenschaften des Dickdarmkrebsmodells |
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PVeröffentlichte Artikel mit unseren Reagenzien
[1] Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Mikroalgenbasiertes Hydrogel für entzündliche Darmerkrankungen und die damit verbundenen Angstzustände und Depressionen. Adv Mater. 2024 Jan 26:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29,4
[2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis moduliert die Immuntoleranz bei Colitis über den L-Lysin-aktivierten AhR-IDO1-Kyn-Signalweg. Nat Commun. 2024 Feb 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.WENN = 16,6
[3] Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Verbesserung der Arzneimittelnutzungsplattform mit injizierbarem mukoadhäsivem Hydrogel zur Behandlung von Colitis ulcerosa[J].chemical engineering journal.424(2021)130464.IF=16,744
[4] Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Aus Milch gewonnene extrazelluläre Vesikel lindern Colitis ulcerosa, indem sie die Darmimmunität regulieren und die Darmmikrobiota umgestalten[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 WENN=11,556
[5] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Aus dem Darm kommensal gewonnene Valeriansäure schützt vor Strahlenschäden. Darmmikroben, 2020, 1–18.WENN=10,245
[6] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Oral verabreichte Nukleotid-Abgabepartikel aus der Mikrofluidik zur Behandlung von entzündlichen Darmerkrankungen[J].Applied Materials Today.2021 Dez;25:101231 IF=10,041
[7] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen,et al.Identifizierung der immunbezogenen Gensignatur und Vorhersage des CeRNA-Netzwerks bei aktiver Colitis ulcerosa[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645.IF=7,561
[8] JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao et al.Die orale Mikrobiota beeinflusst die Wirksamkeit und Prognose der Strahlentherapie bei Darmkrebs in Mausmodellen[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9,423
[9] Hao H, Zhang X, Tong L, Liu Q, et al. Lactobacillus plantarum Wirkung von extrazellulären Vesikeln abgeleitet von Q7 zu Darmmikrobiota und Colitis ulcerosa bei Mäusen[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7,561
[10] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Essbares Vogelnest lindert durch Natrium-Dextransulfat verursachte Colitis ulcerosa bei C57BL/6J-Mäusen durch Wiederherstellung des Th17/Treg-Zellgleichgewichts[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7,561
[11] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumin lindert Mauskolitis und Kolitis-assoziierten Dickdarmkrebs [J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885.IF=7,561
[12]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-Isoflavone lindern experimentelle Kolitis, indem sie auf ERα/NLRP3-Inflammasom-Signalwege abzielen[J].WENN=6,048
[13] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Die entzündungshemmende Wirkung von aus Rinderknochengelatine gewonnenen Peptiden bei LPS-induzierter RAW264.7 Makrophagenzellen und Dextransulfat-Natrium-induzierte C57BL/6-Mäuse[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. IF=5,717
[14] Wang S, Huang J, Tan KS et al. Isosteviol-Natrium lindert Dextran-Natriumsulfat-induzierte chronische Kolitis durch die Regulierung des metabolischen Profilings, der Makrophagenpolarisation und des NF-B-Signalwegs [J]. Oxidative Medizin und zelluläre Langlebigkeit. 2022,4636618. IF=5,076