Makrophagen sind wichtige Zellen des Immunsystems und spielen in Geweben eine Vielzahl von Rollen, darunter die Beseitigung von Krankheitserregern, die Gewebereparatur und die Immunmodulation. Eine abnormale Aktivierung oder Funktionsstörung von Makrophagen bei bestimmten pathologischen Zuständen wie chronischen Entzündungen, Autoimmunerkrankungen oder Tumorentwicklung kann sich nachteilig auf den Organismus auswirken. Clodronat-Liposomen sind eine Klasse von Medikamenten oder Verbindungen, die Makrophagen gezielt abbauen oder entfernen. Clodronat-Liposomen sind das ausgereifteste, bequemste und kostengünstigste Mittel zur Entfernung von Makrophagen, das heute erhältlich ist. Sie können Makrophagen effektiv aus einer Vielzahl von Geweben und Stellen bei Tieren entfernen, darunter Leber, Milz, Lunge und Blut, und sind heute die am weitesten verbreitete Methode zur Entfernung von Makrophagen.

Ansätze verschiedener Organisationen (nur zur Information)

Organ/Makrophage

Dosierung (20-25g/Maus)

Milz/Makrophagen der roten Pulpa

Einzeldosis: 200 µl/Maus (IV oder IP).
Langzeitdepletion: erste Gabe von 200 µl/Maus, dann 200 µl/Maus im Abstand von 2 - 3 Tagen

Leber-/Kufferzellen

Einzeldosis: 200 µl/Maus (IV oder IP).
Langzeitdepletion: erste Gabe von 200 µl/Maus, dann 200 µl/Maus im Abstand von 2 - 3 Tagen

Lungen-/Alveolarmakrophagen

Die besten Ergebnisse werden durch eine intravenöse (150–200 µl) Gabe in Kombination mit einer intratrachealen oder intranasalen Gabe (50 µl) erzielt.

Lymphknoten

Injektion (100–200 µl)/Maus, spezifische Dosierungsschemata finden sich in der Literatur.

Gehirn/Mikroglia

Intracerebroventrikulärer Eintritt in die Zerebrospinalflüssigkeit, 10 µl/Maus, 50 µl/Ratte.

Blut/Monozyten

150–200 µl/Maus (IV), die maximale Depletionsrate wird innerhalb von 24 Stunden erreicht, die maximale Depletionsrate nach 1–7 Tagen ist jedoch stammabhängig.

Häufig gestellte Fragen

F1: Was muss ich nach Erhalt von Clodronat-Liposomen tun?

A: Wenn Sie Clodronat-Liposomen nach Erhalt nicht sofort verwenden können, müssen Sie sie in einen Kühlschrank mit 4 °C stellen. Einfrieren ist verboten! Als Stammlösung verwenden, keine Verdünnung zulässig. Liposomen neigen zur Ausfällung, daher wird empfohlen, sie vor der Verwendung vorsichtig zu mischen. Darüber hinaus können 4 °C Chlorphosphat-Liposomen nicht sofort verwendet werden und müssen vor der Injektion wieder auf Raumtemperatur gebracht werden.

F2: Wie übertrage ich Liposomen aus der Ampulle?

A: Die beste Methode zum Übertragen von Liposomen aus dem Fläschchen ist die Verwendung einer sterilen Nadelspritze. Auf diese Weise bleibt die verbleibende Liposomensuspension im Fläschchen versiegelt und sauber. Sie können zum Übertragen auch eine Pipette mit steriler Spitze verwenden, aber am besten tun Sie dies in einer sauberen Umgebung, beispielsweise in einer BSC-Abzugshaube.

F3: Können Clodronat-Liposomen zur Makrophagen-Clearance in vitro verwendet werden?

A: Das Produkt kann zur Makrophagen-Clearance in vitro verwendet werden, diese Methode eignet sich jedoch besser für In-vivo-Experimente. Der Hauptgrund dafür ist, dass während der In-vitro-Kultur Chlorphosphat, das aus toten Zellen freigesetzt wird oder aus Liposomen „austritt“, im Kulturmedium verbleibt, in vivo jedoch Chlorphosphat eine sehr kurze Halbwertszeit hat und schnell über die Nieren ausgeschieden wird. Obwohl freie Chlorphosphorsäure nicht in Zellen oder Liposomen eindringt, gelangt sie, sobald sie sich im Kulturmedium ansammelt, langsam in die Zellen.

F4: Was ist der Grund dafür, dass Tiere kurz nach der intravenösen Injektion von Clodronat-Liposomen sterben?

A: Einerseits ist es möglich, dass dem Tier eine inhomogene Liposomensuspension injiziert wurde. Es wird empfohlen, vor Gebrauch vorsichtig zu schütteln, um sie zu mischen. Liposomen setzen sich nach einer gewissen Zeit in vitro ab. Wenn über einen längeren Zeitraum hinweg mehrere Tiere gleichzeitig injiziert werden müssen, setzen sich die Liposomen in der Spritze ab und bilden eine inhomogene Suspension, sodass sich der Messwert der ersten Injektion deutlich vom Messwert der letzten Injektion unterscheidet. Andererseits ist es möglich, dass die Liposomen gerade erst aus dem Kühlschrank genommen wurden und noch nicht wieder auf Raumtemperatur gekommen sind.

F5: Wie viele Tage nach der Injektion der Clodronat-Liposomen ist das Tier gestorben?

A: Dies kann auf eine bakterielle Kontamination zurückzuführen sein. Die Entfernung von Makrophagen aus dem Körper erhöht die Wahrscheinlichkeit einer Infektion durch beispielsweise Viruspartikel, Bakterien oder Hefen.

F6: Clodronat-Liposomen haben nicht die gewünschte Wirkung?

A: Clodronat-Liposomen werden in großen Chargen hergestellt und jede Charge wird auf die Konzentration von Clodronat sowie eine Reihe möglicher Verunreinigungen getestet, um sicherzustellen, dass sie korrekt ist, bevor sie an Kunden verkauft wird. Darüber hinaus sind Liposomen anfällig für extreme Temperaturen. Die richtige Art, sie zu transportieren und zu lagern, ist 4 bis 8 °C. Suspensionen sollten weder eingefroren noch über 30 °C erhitzt werden. Sie müssen innerhalb von 3 Monaten nach Erhalt der Lieferung aufgebraucht werden, da sonst die Wirkung der Verwendung beeinträchtigt werden kann.

F7: Kann bei intravenöser Injektion das injizierte Volumen erhöht werden?

A: Die intravenöse Injektion sollte auf dem Körpergewicht des Tieres basieren und 0,1 ml/10 mg nicht überschreiten. Bei der intraperitonealen Injektion kann das Injektionsvolumen jedoch entsprechend erhöht werden. Die subkutane Injektion muss entsprechend dem Volumen der Injektionsstelle entschieden werden.

F8: Worauf müssen wir bei der Verwendung von Liposomen achten?

A: Aus Lipiden mit gesättigten Kohlenwasserstoffketten hergestellte Liposomen sind tatsächlich sehr stark, jedoch sollten die folgenden Vorsichtsmaßnahmen beachtet werden.

①Nicht mit organischen Lösungsmitteln wie Chloroform, Methanol, Ethanol, DMSO, Ether usw. mischen.

② Fügen Sie keine Tenside hinzu, es sei denn, dies ist zum Spalten der Liposomen unbedingt erforderlich.

③ Nicht nahe oder über die Hauptphasenübergangstemperatur der Lipide erhitzen, es sei denn, es wird eine Arzneimittelbeladung durchgeführt, die eine Inkubation über der Phasenübergangstemperatur erfordert.

Produktempfehlung

Produktname

Artikelnummer

Spezifikation

Clodronat-Liposomen (Vrije Universiteit Amsterdam)

40337ES08

5 ml

40337ES10

10 ml

Kontrollliposomen (PBS)

40338ES08

5 ml

40338ES10

10 ml

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