----Sauberer Hintergrund, stabile Bandmuster, präzise Größen
DNA-Marker sind eine Kombination aus DNA-Fragmenten mit unterschiedlichem Molekulargewicht. Ihr Haupteinsatzgebiet ist die gemeinsame Wanderung mit der Proben-DNA bei der Agarose-Gelelektrophorese, um die DNA-Moleküle zu trennen. Durch Vergleich der Größe und Helligkeit der Probenbänder mit denen des DNA-Markers kann man das Molekulargewicht und die Konzentration der Proben-DNA in der Lösung grob abschätzen. YEASEN DNA-Marker decken einen Molekulargewichtsbereich von 100 bp bis 15 kb ab und erfüllen die Anforderungen der meisten Experimente.
Produkteigenschaften
- Hohe Stabilität, kann 3–6 Monate bei Raumtemperatur gelagert werden;
- Sauberer Hintergrund, stabile Bandmuster und präzise Größen;
- Enthält Referenzbänder mit bekannten Konzentrationen zur einfachen Positionierung und semiquantitativen Analyse;
- Inklusive Ladepuffer für die direkte Elektrophorese, bequem und schnell;
- Wird mit einem 5× Ladepuffer zum Laden der Proben geliefert.
Elektrophorese-Diagramm
Wichtige Hinweise
- Lagerung: Bei Raumtemperatur 3 bis 6 Monate haltbar, bei längerer Lagerung bei 4°C oder -20°C.
- DNA Marker eignet sich für die Analyse von DNA-Banden in der Agarosegelelektrophorese und wird nicht für die Verwendung in der Polyacrylamid-Gelelektrophorese empfohlen.
- Auswahl der Gelkonzentration und Pufferlösung:
| Agarose-Konzentration | Effektiver Trennungsbereich (bp) | Empfohlener Puffer |
| 0,5 % | 2.000-50.000 | 1×TAE |
| 0,8 % | 800-10.000 | 1×TAE |
| 1,0 % | 400-8.000 | 1×TAE |
| 1,2 % | 300-7.000 | 1×TAE |
| 1,5 % | 200-3.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 2,0 % | 100-2.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 3,0 % | 25-1.000 | 0,5 × TBE |
【Hinweis】: Wählen Sie für große Fragmente ein Gel mit niedriger Konzentration und verwenden Sie ein TAE-Puffersystem für die Elektrophorese. Wählen Sie für kleine Fragmente ein Gel mit hoher Konzentration und verwenden Sie ein TBE-Puffersystem für die Elektrophorese.
- Auswahl von Nukleinsäurefarbstoffen:
EB (Ethidiumbromid) ist ein hochempfindlicher Fluoreszenzfarbstoff mit einer maximalen Anregungswellenlänge von 302 nm, der zur Beobachtung von Nukleinsäuren in Agarose- und Polyacrylamidgelen verwendet werden kann. EB interkaliert mit den Basen in Nukleinsäuren und gilt als toxisch.
YeaRed (Kat.-Nr. 10202ES76) und YeaGreen (Kat.-Nr. 10204ES76) sind neue, nicht toxische Nukleinsäurefarbstoffe mit einer einzigartigen öligen Molekularstruktur, die Zellmembranen nicht durchdringen und in die Zellen gelangen können. Sie sind nicht leicht flüchtig oder sublimierbar und werden daher nicht von Menschen eingeatmet, wodurch die Sicherheit des Experimentators gewährleistet wird.Die Testergebnisse von Ames zeigen außerdem, dass YeaRed und YeaGreen bei Gelfärbekonzentrationen keine Mutagenität aufweisen, was sie zu einer sicheren und ungiftigen Alternative zum hochgradig krebserregenden EB macht. Darüber hinaus hat YeaRed die gleichen spektralen Eigenschaften wie EB, sodass es EB perfekt ersetzen kann, ohne das vorhandene Bildgebungssystem zu ändern.
Fragen und Antworten
F1: Warum ziehen sich die hochmolekularen Bänder des DNA-Markers und trennen sich nicht gut?
A1: Der Nukleinsäurefarbstoff bindet nicht ausreichend an den DNA-Marker. Da hochmolekulare Bänder mehr Nukleinsäurefarbstoff erfordern, sind die hochmolekularen Bänder anfälliger für Migrationseffekte, wenn der Farbstoff nicht gesättigt ist, was zu einem Ziehen und einer schlechten Trennung führt. Es wird empfohlen, die Menge des verwendeten DNA-Markers zu reduzieren (er kann 5-mal mit Wasser verdünnt werden und dann können 8-10 μL geladen werden) oder die Konzentration des Nukleinsäurefarbstoffs zu erhöhen.
F2: Warum gibt es keine oder schwache Bänder für DNA?
Antwort:
- Unzureichende DNA-Beladung. Erhöhen Sie die beladene Menge.
- Das DNA-Band ist aus dem Gel herausgelaufen;
- Das DNA-Band wird durch den Tracking-Farbstoff verdeckt;
- Dem Gel wurde kein Nukleinsäurefarbstoff hinzugefügt;
- Das Agarosegel wurde zu lange stehen gelassen. Es wird empfohlen, es sofort aufzubereiten und zu verwenden.
F3: Warum sind die DNA-Markerbänder diffus?
Antwort Nr. 3:
- Teilweiser Abbau der DNA, prüfen Sie, ob die Lagerbedingungen zu warm sind;
- Die Spannung während der Elektrophorese ist zu niedrig, wodurch die DNA-Banden diffundieren. Es wird empfohlen, das Gel bei 110V-130 laufen zu lassen V für mehr als 45 min;
- Die Konzentration des Agarosegels ist nicht geeignet. Bereiten Sie es entsprechend der im Handbuch empfohlenen Gelkonzentration vor.
- Die Qualität des Agarosegels ist mangelhaft. Es wird empfohlen, ein neues herzustellen.
F4: Warum scheinen die Probenbänder im Vergleich zu den DNA-Markerbändern unterschiedliche Größen zu haben?
Antwort Nr. 4:
- Die DNA-Migration hängt nicht nur von der tatsächlichen Größe ab, sondern auch davon, ob sie mit Proteinen, dem Ionenzustand, der DNA-Struktur, dem Gel und anderen Faktoren kombiniert wird. Die elektrophoretische Migrationsrate von Nukleinsäuren hängt vom Verhältnis DNA/Farbstoff ab, und wenn die Menge des Nukleinsäurefarbstoffs nicht ausreicht, kann dies zu größeren Migrationsratenfehlern führen.
- Wenn die Probe eine hohe Konzentration an Salzionen enthält, kann dies auch zu erheblichen Migrationsfehlern führen.
- Wenn die Menge der geladenen Probe erheblich von der Menge der DNA-Marker-Bänder abweicht oder wenn sich die Volumina erheblich unterscheiden, kann dies auch zu größeren Migrationsfehlern führen.
Bestellinformationen
| Produktorientierung | Produktname | Produktnummer | Technische Daten |
| DNA-Marker | GoldBand DL2000 DNA-Marker | 10501ES60/80 | 100 T/10×100 T |
| GoldBand DL5000 DNA-Marker | 10504ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| GoldBand 100bp DNA-Leiter | 10507ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| GoldBand 1 kb DNA-Leiter | 10510ES60/80 | 100 T/10×100 T |