Beschreibung
2×Hieff™ HotStart PCR Genotyping Master Mix (mit Farbstoff) ist eine gebrauchsfertige PCR-Vormischung, die Hieff™ HotStart Taq DNA-Polymerase, dNTPs und ein optimiertes Puffersystem enthält. Es vereinfacht experimentelle Verfahren erheblich, da nur Primer und eine Vorlage zur Amplifikation hinzugefügt werden müssen, was Hochdurchsatzvorgänge ermöglicht und die Reproduzierbarkeit experimenteller Ergebnisse verbessert. Hieff™ HotStart Taq DNA-Polymerase ist eine ligandenmodifizierte thermostabile Taq DNA-Polymerase, deren Aktivität durch Temperaturänderungen moduliert wird. Ihre Enzymaktivität wird bei Raumtemperatur vollständig blockiert und beim Erhitzen auf 95 °C freigesetzt. Die Aktivierung von Hieff™ HotStart DNA-Polymerase erfordert nur 2–3 Minuten und ist mit vorhandenen PCR-Programmen kompatibel. Dieses Produkt verhindert unspezifische Amplifikation während der Probenvorbereitung und der Temperaturzyklusphasen und ist daher für Genotypisierungsexperimente wirksam.
Merkmale
- Praktische, gebrauchsfertige Mischung
- Thermostabil – die Halbwertszeit beträgt mehr als 40 Minuten bei 95 °C
- Erzeugt PCR-Produkte mit 3'-dA-Überhängen
Anwendungen
- Genotypisierung von Mäusen
- Hotstart-PCR
Technische Daten
| Treue (vs. Taq) | 1 × |
| Heißstart | NEIN |
| Überhang | 3'-A |
| Polymerase | Taq DNA-Polymerase |
| Reaktionsformat | SuperMix oder Master Mix |
| Reaktionsgeschwindigkeit | Standard |
| Produkttyp | PCR-Mastermix (2×) |
Komponenten
| Name | 10108ES03 | 10108ES08 | 10108ES50 | 10108ES60 |
| 2× Hieff™ HotStart PCR Genotyping Master Mix (mit Farbstoff) | 1 ml | 5×1 ml | 50×1 ml | 100×1 ml |
Figur
Zitiert aus" Knockdown von hnRNPA1 fördert NSCLC-Metastasierung und EMT durch Regulierung des alternativen Spleißens von LAS1L-Exon 9, Vorderseite. Onkol. , 23. Juni 2022. Molekulare und zelluläre Onkologie, Band 12 - 2022"
Versand und Lagerung
Versand auf Kühlakkus. Bei -20°C lagern, Haltbarkeit 2 Jahre.
PCR-Reaktion (50 μL)
| Komponenten | Bd. | Konz. |
| ddH2O | bis 50 μL | - |
| DNA | / | - |
| Primer F (10 μM) | 2 μL | 0,4 μM |
| Primer R (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
| 2×Hieff™ HotStart PCR Genotyping Master Mix (mit Farbstoff) | 25 μl | 1× |
| DNA-Typ | Eingang |
| Genomische DNA | 50 ng-100 ng |
| Plasmide | 100 pg-20 ng |
| cDNA | 1-5 μL |
PCR-Zyklus
| Temperatur. | Zeit | Zyklen |
| 95°C | 5 Minuten | 1 |
| 95°C | 30 Sek. | 35 |
| 50-60°C | 30 Sek. | |
| 72°C | 30 Sek./KB | |
| 72°C | 10 Minuten | 1 |
[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown von hnRNPA1 fördert NSCLC-Metastasierung und EMT durch Regulierung des alternativen Spleißens von LAS1L-Exon 9. Front Oncol. 2022;12:837248. Veröffentlicht am 23. Juni 2022. doi:10.3389/fonc.2022.837248(WENN:5.738)
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