Beschreibung
Produktbeschreibung
Alkalische Phosphatase kann die 5'-Phosphatgruppen von DNA und RNA entfernen. Sie wird häufig verwendet, um die Selbstligation von Vektoren zu verhindern. Bei molekularen Klonierungsexperimenten erfordert DNA-Ligase die Anwesenheit von Phosphatgruppen, um die DNA-Ligation zu katalysieren. Nach der Verdauung mit Restriktionsenzymen behalten Vektoren eine Phosphatgruppe an der Spaltstelle. Nach der Dephosphorylierung durch alkalische Phosphatase fehlt dem 5'-Ende des Vektors jedoch eine Phosphatgruppe und kann sich daher nicht mit seinem eigenen 3'-Ende verbinden. Dadurch wird die Selbstligation des Vektors verhindert, die sonst bei der Ligationsreaktion bevorzugt auftreten würde. Dies erhöht die Insertionsrate des Zielfragments. Darüber hinaus kann alkalische Phosphatase verwendet werden, um DNA-Vorlagen für die 5'-Endmarkierung vorzubereiten.
Bei diesem Produkt handelt es sich um eine aus Garnelen gewonnene alkalische Phosphatase, die fast alle Phosphatmonoester abbauen kann. Phosphatdiester oder -triester kann sie jedoch nicht hydrolysieren. Das Enzym wirkt auf die terminale Dephosphorylierung, unabhängig davon, ob die Enden klebrig oder stumpf sind. SAP kann auch zum Abbau von dNTPs in PCR-Reaktionen verwendet werden, was für die nachfolgende Sequenzierung und SNP-Analyse nützlich ist.
Merkmale
- Entfernung von Phosphatgruppen von DNA- und RNA-Enden. Verhinderung der Selbstligation von Vektoren.
- Vorbereitung von DNA-Vorlagen für die 5'-Endmarkierung.
- Abbau von dNTPs in PCR-Reaktionen.
Anwendungen
- Molekular Ceinsam
- DNA-Sequenzierung
- SNP-Analyse
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10322ES72 |
| 10322-A | Alkalische Phosphatase (SAP) aus Garnelen (1 U/µL) | 250 U |
| 10322-B | 10×SAP-Puffer | 1 MM |
Technische Daten
| Aus Pichia pastoris wurde das Garnelen-Alkaliphosphatase-Gen aus Pandalus borealis geklont. | |
| Qualitätskontrolle | Frei von Ribonuklease- und Desoxyribonuklease-Verunreinigungen. |
| Reinheit | ＞95 % |
| Thermische Inaktivierung | Inkubation bei 65℃ für 5 Minuten führt zu einem vollständigen und irreversiblen Aktivitätsverlust. |
| Einheitendefinition | Die Enzymmenge, die benötigt wird, um 1 μg pUC19-DNA, die mit HindIII verdaut wurde (wodurch 5'-Überhänge entstehen), innerhalb von 30 Minuten bei 25℃ wird als eine Aktivitätseinheit definiert. |
Lagerung
Der Produkte sollten bei -25~-15℃ für 3 Jahre.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
10322ES-MSDS-HB.PDF
Benutzerhandbücher
10322_Manual_Ver. EN20250219_EN.pdf
Zahlung und Sicherheit
Ihre Zahlungsinformationen werden sicher verarbeitet. Wir speichern weder Kreditkartendaten noch Zugriff auf Ihre Kreditkarteninformationen.
Anfrage
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FAQ
Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von
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