Beschreibung
Proteinase K ist eine Serinprotease mit breiter Spaltungsaktivität, die die carboxylterminale Peptidbindung von aliphatischen und aromatischen Aminosäuren spalten kann. Ihr relatives Molekulargewicht beträgt etwa 29,3 kDa. Proteinase K wird häufig bei der Präparation chromosomaler DNA für die Pulselektrophorese, Western Blotting und die Entfernung einer Nuklease aus DNA- und RNA-Präparationen verwendet. Denaturierungsmittel wie SDS (1 %) können ihre Aktivität verbessern. Darüber hinaus beträgt die übliche Arbeitskonzentration 50–100 μg/ml und die spezifische Arbeitskonzentration hängt davon ab, ob der Puffer SDS, Harnstoff, pH-Wert, Temperatur und andere Faktoren enthält.
Anwendungen
- Extraktion genomischer DNA
- Verdauung und Entfernung des Enzyms
Technische Daten
| Quelle | Hefe |
| Spezifische Aktivität | ≥30 U/mg |
| Einheitendefinition | Eine Einheit ist definiert als die Menge an Proteinase K, die 1 μmoL freisetzt Tyrosin pro Minute bei 37℃ @ pH 7,5. |
| Reinigung | Ni-Säulen-Affinitätsreinigung |
| Reaktionsbedingungen | Der Reaktionspuffer sollte bei 37℃ inkubiert werden -70℃ für 1 Stunde, und die empfohlene Reaktionstemperatur beträgt 70 °C. |
| Inaktivierungsmethode | Das Reaktionssystem kann durch Zugabe von PMSF- oder DFP-Inhibitor inaktiviert werden und teilweise inaktiviert durch Inkubation bei 65℃ für 10-15 Min. |
| Aktivitätsbereich | Es ist in einem weiten pH-Bereich (4,0–12,0) aktiv und der optimale pH-Bereich liegt bei 7,5–9,0. |
| RNase und DNase | Keiner |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10401ES60 | 10401ES80 | 10401ES90 | 10401ES98 |
| 10401 | Proteinase K | 100 mg | 1 g | 5 g | 100 g |
Versand und Lagerung
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