Ribonuklease A (RNase A) ist ein einzelsträngiges Polypeptid mit 4 Disulfidbindungen und einem Molekulargewicht von etwa 13,7 kDa. RNase A ist eine Endoribonuklease, die einzelsträngige RNA speziell an C- und U-Resten abbaut. Insbesondere erkennt die Spaltung die Phosphodiesterbindung, die durch die 5'-Ribose eines Nukleotids und die Phosphatgruppe an der 3'-Ribose des benachbarten Pyrimidinnukleotids gebildet wird, sodass die 2', 3'-zyklischen Phosphate zu den entsprechenden 3'-Nukleosidphosphaten hydrolysiert werden (z. B. wird pG-pG-pC-pA-pG durch RNase A gespalten, um pG-pG-pCp und A-PG zu erzeugen). RNase A ist beim Spalten einzelsträngiger RNA am aktivsten. Die empfohlene Arbeitskonzentration beträgt 1–100 μ G/ml und ist mit verschiedenen Reaktionssystemen kompatibel. Eine niedrige Salzkonzentration (0-100 mM NaCl) kann zum Schneiden von einzelsträngiger RNA, doppelsträngiger RNA und durch RNA-DNA-Hybridisierung gebildeten RNA-Ketten verwendet werden. Bei einer hohen Salzkonzentration (≥ 0,3 M) spaltet RNase A jedoch nur spezifisch einzelsträngige RNA.

RNase A wird am häufigsten verwendet, um RNA während der Herstellung von Plasmid-DNA oder genomischer DNA zu entfernen. Ob DNase während des Herstellungsprozesses aktiv ist oder nicht, kann die Reaktion leicht beeinflussen. Die traditionelle Methode des Kochens in einem Wasserbad kann verwendet werden, um die DNase-Aktivität zu inaktivieren. Dieses Produkt enthält keine DNase und Protease und erfordert vor der Verwendung keine Wärmebehandlung. Darüber hinaus kann dieses Produkt auch in molekularbiologischen Experimenten wie RNase-Schutzanalysen und RNA-Sequenzanalysen verwendet werden.

Dieses Produkt wird als Lösung mit einer Konzentration von 100 mg/ml geliefert. Die empfohlene Arbeitskonzentration beträgt je nach Anwendungsart 1-100 μg/ml.

Merkmale

Ribonuklease A (RNase A), aus Rinderpankreas

Aktivität ≥80 Kunitz U/mg

NEIN DNase-Rückstand

Anwendungen

RNasen

Epitranskriptom-Analyse

Extraktion und Reinigung genomischer DNA

Technische Daten

Versand und Lagerung

Das Produkt sollte 2 Jahre lang bei -25 °C bis -15 °C gelagert werden.

Der Konservierungspuffer bestand aus 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) und 50 % (V/V) Glycerin.

Zahlen

Probe 1 hat keine RNase A,Probe 2-4 hinzugefügt 1 μl der 100 mg/ml RNase A. Dann ein500 ng RNA hinzufügen. Nach 5-minütiger Inkubation bei Raumtemperatur 1 μl 10X RNA-Ladepuffer hinzufügen. Anschließend alle Proben auf ein 0,8 % Agarosegel mit mittleren Poren laden und 10 Minuten lang bei 160 V elektrophoretisch auflösen.

Unterlagen:

Sicherheitsdatenblatt

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Benutzerhandbücher

10406_Handbuch_Ver. HB240703_EN.pdf

Zitate und Referenzen:

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. Die Hemmung von LDHA zur Induktion der eEF2-Freisetzung verbessert die Thrombozytopoese. Blood. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Translationale Regulierung der pflanzlichen Reaktion auf hohe Temperaturen durch eine tRNAHis-Guanylyltransferase mit Doppelfunktion in Reis. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)