Ribonuklease A (RNase A) ist ein einzelsträngiges Polypeptid mit 4 Disulfidbindungen und einem Molekulargewicht von etwa 13,7 kDa. RNase A ist eine Endoribonuklease, die einzelsträngige RNA speziell an C- und U-Resten abbaut. Insbesondere erkennt die Spaltung die Phosphodiesterbindung, die durch die 5'-Ribose eines Nukleotids und die Phosphatgruppe an der 3'-Ribose des benachbarten Pyrimidinnukleotids gebildet wird, sodass die 2', 3'-zyklischen Phosphate zu den entsprechenden 3'-Nukleosidphosphaten hydrolysiert werden (z. B. wird pG-pG-pC-pA-pG durch RNase A gespalten, um pG-pG-pCp und A-PG zu erzeugen). RNase A ist beim Spalten einzelsträngiger RNA am aktivsten. Die empfohlene Arbeitskonzentration beträgt 1–100 μ G/ml und ist mit verschiedenen Reaktionssystemen kompatibel. Eine niedrige Salzkonzentration (0-100 mM NaCl) kann zum Schneiden von einzelsträngiger RNA, doppelsträngiger RNA und durch RNA-DNA-Hybridisierung gebildeten RNA-Ketten verwendet werden. Bei einer hohen Salzkonzentration (≥ 0,3 M) spaltet RNase A jedoch nur spezifisch einzelsträngige RNA.
RNase A wird am häufigsten verwendet, um RNA während der Herstellung von Plasmid-DNA oder genomischer DNA zu entfernen. Ob DNase während des Herstellungsprozesses aktiv ist oder nicht, kann die Reaktion leicht beeinflussen. Die traditionelle Methode des Kochens in einem Wasserbad kann verwendet werden, um die DNase-Aktivität zu inaktivieren. Dieses Produkt enthält keine DNase und Protease und erfordert vor der Verwendung keine Wärmebehandlung. Darüber hinaus kann dieses Produkt auch in molekularbiologischen Experimenten wie RNase-Schutzanalysen und RNA-Sequenzanalysen verwendet werden.

Merkmale

• RNA-Spaltung

Anwendungen

• Entfernung von RNA während der genomischen DNA-Präparation
• RNA-Enzymschutzanalyse
• RNA-Sequenzanalyse

Technische Daten

Komponenten

Lagerung

Das Produkt sollte zwei Jahre lang bei -25 °C bis -15 °C gelagert werden.