Beschreibung
Desoxyribonuklease I (DNase I), auch bekannt als Desoxyribonuklease I, ist eine Nuklease, die in verschiedenen Zellen und Geweben vorkommt. Sie gehört zu den Endonukleasen, die die Phosphodiesterbindungen in der Nähe von Pyrimidinen angreifen und Polynukleotide mit einer Phosphatgruppe am 5'-Ende und einer Hydroxygruppe am 3'-Ende produzieren. Das durchschnittliche Verdauungsprodukt beträgt mindestens ein Tetranukleotid. DNase kann verschiedene DNA-Formen katalysieren, wie z. B. einzelsträngige DNA, doppelsträngige DNA und sogar Chromatin (die Spaltungsrate wird durch Histone beeinflusst). Der optimale Arbeitsbereich liegt bei pH 7–8, und die Aktivität der DNase hängt von Ca ab. 2+und kann durch zweiwertige Metallionen wie Co aktiviert werden. 2+, Mn 2+, Zn 2+, usw. 5 mM Ca 2+ kann das Enzym vor Hydrolyse schützen. In Gegenwart von Mg 2+kann das Enzym jede beliebige Stelle auf beiden DNA-Strängen zufällig erkennen und spalten; während unter den Bedingungen von Mn 2+, kann es beide DNA-Stränge gleichzeitig erkennen und an nahezu derselben Stelle spalten. DNase I wurde erstmals aus der Bauchspeicheldrüse isoliert, und bis heute ist die Bauchspeicheldrüse von Säugetieren eine der Hauptquellen dieses Enzyms.
Dieses Produkt wird aus Rinderpankreas gewonnen und wird häufig in molekularbiologischen Experimenten verwendet, um DNA aus Proteinen zu entfernen oder DNA-Nicks für den Einbau markierter Basen einzuführen. Das Produkt wird in Pulverform geliefert und hat eine Enzymaktivität von ≥ 2000 Kunitz-Einheiten/mg Protein.
Merkmale
Lyophilisiertes Pulver
Niedrig RNase-Rückstand
Anwendungen
Verwendet für Bioprocesses von entfernening DNA aus Protein und Zellen Proben
Herstellung einer Einzelzellsuspension zur Verringerung der Viskosität durch Entfernung von DNA
Radioaktive Markierung Und DNA-Nick-Übersetzung
DNase-Footprinting
Eliminierung genomischer DNA aus RNA-Präparaten
Technische Daten
CAS-Nummer | 9003-98-9 |
MW | ~31 kDa |
Kunitz-Einheiten | ≥2000 Kunitz-Einheiten/mg Protein |
Typ | Typ IV |
Optimaler pH-Wert | 7~8 |
Aussehen | Weißes bis hellgelbes Pulver |
Reinheit | Protein: ≥80% durch Biuret |
Aktivatoren | Verschiedene zweiwertige Metallionen wie Mg 2+, Mn 2+,Ca2+, Co2+und Zn2+ |
Inhibitoren | β-Mercaptoethanol; Chelatbildner; SDS; Aktin |
Einheitendefinition | Unter den Bedingungen von 25 ℃ und pH 5,0, eine Änderung in Δ Ein 260 von 0,001 pro Milliliter pro Minute aufgrund der Katalyse der Substrat-DNA durch DNase wird als eine Enzymaktivitätseinheit (Kunitz-Einheit) definiert. |
Referenzdaten
Zitiert aus". Die auf einem dualen Mechanismus basierende, durch Nano-Sapper initiierte Verstärkung der CTL-Infiltration verstärkt die Immuntherapie gegen immunexklusive Tumoren. Nat Commun."
Versand und Lagerung
Das Produkt sollte 2 Jahre lang bei -25 °C bis -15 °C gelagert werden.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
Benutzerhandbücher
Zitate und Referenzen:
[1] Wang Z, Gong X, Li J, et al. Sauerstoffliefernde Polyfluorkohlenwasserstoff-Nanovehicles verbessern die Tumoroxygenierung und verstärken die photodynamisch vermittelte Antitumorimmunität. ACS Nano. 2021;15(3):5405-5419. doi:10.1021/acsnano.1c00033(IF:15.881)
[2] Huang Y, Chen Y, Zhou S, et al. Eine auf einem dualen Mechanismus basierende CTL-Infiltrationsverstärkung, initiiert durch Nano-Sapper, verstärkt die Immuntherapie gegen immunexkludierte Tumoren. Nat Commun. 2020;11(1):622. Veröffentlicht am 30. Januar 2020. doi:10.1038/s41467-020-14425-7(IF:12.121)
[3] Wang Y, Gong X, Li J, et al. M2-Makrophagen-Mikrovesikel-inspirierte Nanovehicles verbessern die Zugänglichkeit zu Krebszellen und Krebsstammzellen in Tumoren. J Nanobiotechnology. 2021;19(1):397. Veröffentlicht am 27. November 2021. doi:10.1186/s12951-021-01143-5(IF:10.435)
[4] Liu J, Shen Z, Tang J, et al. Extrazelluläre DNA, die von der glycinauxotrophen kleinen Kolonievariante von Staphylococcus epidermidis freigesetzt wird, erleichtert Katheterinfektionen. Commun Biol. 2021;4(1):904. Veröffentlicht am 22. Juli 2021. doi:10.1038/s42003-021-02423-4(IF:6.268)
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