Beschreibung
DNase I ist eine Endonuklease, die einzelsträngige und doppelsträngige DNA verdauen kann, um einzelne Desoxynukleotide oder einzelsträngige oder doppelsträngige Oligodesoxynukleotide zu produzieren. Sie kann die Phosphodiesterbindung hydrolysieren, um Monodesoxynukleotide und Oligodesoxynukleotide zu produzieren, die 5'-Phosphatgruppen und 3'-OH-Gruppen enthalten. Das durchschnittliche Verdauungsprodukt ist das kleinste Polytetranukleotid. DNase I kann viele Formen von DNA katalysieren, wie einzelsträngige DNA, doppelsträngige DNA und sogar Chromatin (ihre Schnittgeschwindigkeit wird durch Histone beeinflusst). Der optimale pH-Bereich liegt bei 7-8. Die Aktivität von DNase I hängt von Ca ab2+ und kann durch zweiwertige Metallionen wie Co aktiviert werden.2+, Mn2+, Zn2+, usw. 5 mM Ca2+ kann das Enzym vor Hydrolyse schützen. In Gegenwart von Mg2+kann das Enzym jede beliebige Stelle auf jedem DNA-Strang zufällig erkennen und schneiden. In Gegenwart von Mn2+, es kann zwei DNA-Stränge gleichzeitig erkennen und an fast derselben Stelle schneiden, um stumpfe Enden oder klebrige Enden mit 1-2 hervorstehenden Nukleotiden zu bilden. DNase I wird häufig zur Herstellung von DNA-freier RNA verwendet; zum Entfernen der Matrizen-DNA nach der In-vitro-Transkription; zur Herstellung von DNA-freier RNA vor RT-PCR- und RT-qPCR-Reaktionen; in Kombination mit DNA-Polymerase I zur Durchführung einer DNA-Markierung durch Nick-Translokation; zum Aufbau einer DNA-Fragmentierungsbibliothek.
Dieses Produkt wird gemäß den GMP-Prozessanforderungen hergestellt und in flüssiger Form geliefert.
Besonderheit
- DNA-spezifische Endonuklease
- Baut doppelsträngige und einzelsträngige DNA ab
- Produkte sind kurze Oligos mit 5'-Phosphat und 3'-OH
Anwendung
- Entfernung kontaminierender genomischer DNA aus RNA-Proben
- Abbau von DNA-Vorlagen in Transkriptionsreaktionen
Spezifikation
| Quelle | Rekombinant Escherichia coli mit DNase I Gen |
| Optimale Temperatur | 37℃ |
| Speicherpuffer | 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2 mM CaCl2, 50% (v/v) Glycerin |
| Einheitendefinition | Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 μg Plasmid-DNA innerhalb von 10 Minuten bei 37 °C vollständig abzubauen. (Der Reaktionspuffer ist: 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM CaCl2, 1 μg Plasmid-DNA) |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10611ES76 (500 Einheiten) | 10611ES84 (2.000 Einheiten) | 10611ES92 (10.000 Einheiten) |
| 10611 | Desoxyribonuklease I (DNase I) GMP-Qualität (2 U/μL) | 250 μl | 1 ml | 5 ml |
Versand und Lagerung
Produkte der GMP-Klasse Desoxyribonuklease I (DNase I) werden mit Trockeneis versendet und können ein Jahr lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1. DNase I von YEASEN kann im Vergleich zu Konkurrenzmarken die DNA-Vorlage während der Transkription effektiv entfernen.
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 verschlimmert Podozytenschäden und das Fortschreiten der Glomerulopathie durch N<sup>6</sup>-Methyladenosin-abhängige Herunterregulierung von Sirt1. Cell Death Dis. 2021;12(10):881. Veröffentlicht am 27. September 2021. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. Biomimetischer Periost-Knochenersatz bestehend aus einer Matrix aus Präosteoblasten und einem Hydrogel zur Reparatur großer segmentaler Knochendefekte. Acta Biomater. 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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