Beschreibung
Eukaryoten-mRNA bildet nach der Transkription am 5'-Ende eine spezielle Struktur, die sogenannte Cap-Struktur. Die Cap-Struktur spielt eine wichtige Rolle bei der Stabilität, dem Transport und der Translation von mRNA. Das Capping-Enzym des Vacciniavirus ist ein wirksames Enzym, das die Bildung der Cap-Struktur katalysieren kann. Es besteht aus zwei Untereinheiten, D1 und D12. Es besitzt außerdem RNA-Triphosphatase-Aktivität, Guanylat-Acyltransferase-Aktivität und Guanin-Methyltransferase-Aktivität, die die 7-Methylguanin-Cap-Struktur (m7Gppp) mit dem 5'-Ende der RNA (m7Gppp5'N) verbinden können. Das Capping-Enzym des Vacciniavirus kann die RNA innerhalb einer Stunde in die richtige Richtung cappen, wenn eine geeignete Konzentration an Capping-Puffer, Guanosintriphosphat (GTP), S-Adenosylmethionin (SAM) usw. vorhanden ist.
Besonderheit
- Aus einer rekombinanten Quelle isoliert
- Getestet auf Abwesenheit von Endonukleasen, Exonukleasen, RNasen
Anwendung
- Capping von mRNA vor Translationsassays/In-vitro-Translation
- Markierung des 5'-Endes der mRNA
Spezifikation
| Quelle | Rekombinant Escherichia coli mit Vacciniavirus-Capping-Enzym-Gen |
| Optimale Temperatur | 37℃ |
| Speicherpuffer | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,1 % Triton X-100, 50 % Glycerin |
| Einheitendefinition | 1 Einheit: Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 10 pmol GTP (α- 32P) innerhalb einer Stunde bei 37℃ in ein Transkript mit 80 Nukleotiden (80 nt) einzubauen. |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10615ES84 (2.000 HE) | 10615ES92 (10.000 HE) | 10615ES96 (100.000 Einheiten) | 10615ES99 (5 ME) |
| 10615 | mRNA-Vaccinia-Capping-Enzym (10 Einheiten/µl) | 200 μl | 1 ml | 10 ml | 500 ml |
Versand und Lagerung
mRNA-Vaccinia-Capping-Enzym-Produkte in GMP-Qualität werden mit Trockeneis versendet und können ein Jahr lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1. Die Capping-Effizienz des Vaccinia-Capping-Systems von YEASEN erreichte nahezu 100 %. Abbildung 1A zeigt die Nukleinsäure-Massenspektrometrie vor der Cap-Reaktion. Abbildung 1B zeigt die Nukleinsäure-Massenspektrometrie nach der Cap-Reaktion.
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