Beschreibung
Bei diesem Produkt handelt es sich um eine Bakteriophagen-T7-RNA-Polymerase, die aus der rekombinanten Proteinexpression in Escherichia coli gewonnen wird. Sie katalysiert die 5'→3'-Synthese von RNA auf doppelsträngiger DNA aus ihrer T7-Promotersequenz (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') und verwendet NTPs als Substrate. Die DNA mit doppelsträngigen linearen stumpfen Enden oder 5'-überstehenden Enden kann als Vorlage für die T7-RNA-Polymerase verwendet werden, sodass linearisierte Plasmide und PCR-Produkte als Vorlage für In-vitro- Synthese von RNA.
Hinweis: G* ist die erste Base des RNA-Transkripts.
Dieses Produkt wird gemäß den GMP-Vorschriften hergestellt und in flüssiger Form bereitgestellt.
Besonderheit
- Synthetisieren Sie lange und kurze Transkripte. RNA kann in 100-200 μg mit 1 μg DNA-Vorlage produziert werden.
- Höhere Ausbeute und einfache Bedienung
- Weniger Endotoxine
- Getestet auf Abwesenheit von Endonukleasen, Exonukleasen, RNasen
Anwendung
- Vorbereitung radioaktiv markierter RNA-Sonden
- RNA-Generierung für Studien zur RNA-Struktur, -Verarbeitung und -Katalyse
- Expressionskontrolle über Antisense-RNA
- mRNA-, sgRNA-Synthese
Spezifikation
| Quelle | Ausgedrückt in Escherichia coli mit einem rekombinanten T7-RNA-Polymerase-Gen |
| Optimale Temperatur | 37℃ |
| Speicherpuffer | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1 % Triton X-100, 50 % (v/v) Glycerin, pH 7,9 bei 25℃ |
| Einheitendefinition | Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 nmol [3H] GMP innerhalb von 1 Stunde bei 37°C und pH 8,0 in den säureunlöslichen Niederschlag einzubauen wird als 1 Einheit definiert. |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10624ES90 (5.000 HE) | 10624ES97 (50.000 Einheiten) |
| 10624 | T7 RNA-Polymerase, GMP-Qualität (50 U/μL) | 100 μl | 1 ml |
Versand und Lagerung
T7-RNA-Polymerase-Produkte in GMP-Qualität werden mit Trockeneis versendet und können ein Jahr lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1. Standard-RNA wurde in vitro mithilfe des T7-RNA-Synthesekits synthetisiert.
Die Reaktion wurde 2 Stunden lang bei 37 °C in einem PCR-Gerät inkubiert und dann mit Magnetkügelchen (Kat.-Nr. 12602) gereinigt. Das Ergebnis wurde mit einem NanoDrop-Spektralphotometer analysiert, wie in Abbildung 1 dargestellt.
Abbildung 2. Die Transkriptionsdemonstration von RNA unterschiedlicher Länge durch das T7-Kit jeweils im Elektrophoretogramm (Abbildung 2A), im Kapillarelektrophoresediagramm (Abbildung 2B) und im Chromatogramm (Abbildung 2C)
Abbildung 3. Synthese von gecapterter RNA in vitro.
Die Reaktion wurde 2 Stunden lang bei 37 °C in einem PCR-Gerät inkubiert und dann mit Magnetkügelchen (Kat.-Nr. 12602) gereinigt. Das Ergebnis wurde mit einem NanoDrop-Spektralphotometer analysiert (siehe Abbildung 3A). Das Integritätsergebnis wurde mit einer Kapillarelektrophorese analysiert (siehe Abbildung 3B).
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Zahlung und Sicherheit
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Anfrage
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FAQ
Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von
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