Beschreibung
Bei diesem Produkt handelt es sich um eine Bakteriophagen-T7-RNA-Polymerase, die aus der rekombinanten Proteinexpression in Escherichia coli gewonnen wird. Sie katalysiert die 5'→3'-Synthese von RNA auf doppelsträngiger DNA aus ihrer T7-Promotersequenz (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') und verwendet NTPs als Substrate. Die DNA mit doppelsträngigen linearen stumpfen Enden oder 5'-überstehenden Enden kann als Vorlage für die T7-RNA-Polymerase verwendet werden, sodass linearisierte Plasmide und PCR-Produkte als Vorlage für In-vitro- Synthese von RNA.
Hinweis: G* ist die erste Base des RNA-Transkripts.
Dieses Produkt wird gemäß den GMP-Vorschriften hergestellt und in flüssiger Form bereitgestellt.
Besonderheit
- Synthetisieren Sie lange und kurze Transkripte. RNA kann in 100-200 μg mit 1 μg DNA-Vorlage produziert werden.
- Höhere Ausbeute und einfache Bedienung
- Weniger Endotoxine
- Getestet auf Abwesenheit von Endonukleasen, Exonukleasen, RNasen
Anwendung
- Vorbereitung radioaktiv markierter RNA-Sonden
- RNA-Generierung für Studien zur RNA-Struktur, -Verarbeitung und -Katalyse
- Expressionskontrolle über Antisense-RNA
- mRNA-, sgRNA-Synthese
Spezifikation
| Quelle | Ausgedrückt in Escherichia coli mit einem rekombinanten T7-RNA-Polymerase-Gen |
| Optimale Temperatur | 37℃ |
| Speicherpuffer | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1 % Triton X-100, 50 % (v/v) Glycerin, pH 7,9 bei 25℃ |
| Einheitendefinition | Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 nmol [3H] GMP innerhalb von 1 Stunde bei 37°C und pH 8,0 in den säureunlöslichen Niederschlag einzubauen wird als 1 Einheit definiert. |
Qualität
| COA-Artikel | Standard |
| Aktivität | 250-300 U/µl |
| Protein Konzentration | ≥0,5 mg/ml |
| Reinheit | ≥95 % |
| Endotoxin | <20 EU/mg |
| Restprotease | Negativ |
| Restliche Exonuklease | Negativ |
| Restnickase | Negativ |
| Restliche RNase | Negativ |
| E. coli-Wirtsprotein | <50 ppm |
| E.coli-Wirt DNA | <10 fg/Einheiten |
| Mykoplasmen DNA | Negativ |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | 10625ES86 (2.500 KU) | 10625ES99 (100 ME) |
| 10625 | T7 RNA-Polymerase, GMP-Qualität (250 U/μL) | 40 μl | 400 μl | 10 ml | 400 ml |
Versand und Lagerung
T7-RNA-Polymerase-Produkte in GMP-Qualität werden mit Trockeneis versendet und können ein Jahr lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1. Standard-RNA wurde in vitro mithilfe des T7-RNA-Synthesekits synthetisiert.
Die Reaktion wurde 2 Stunden lang bei 37 °C in einem PCR-Gerät inkubiert und dann mit Magnetkügelchen (Kat.-Nr. 12602) gereinigt. Das Ergebnis wurde mit einem NanoDrop-Spektralphotometer analysiert, wie in Abbildung 1 dargestellt.
Abbildung 2. Die Transkriptionsdemonstration von RNA unterschiedlicher Länge durch das T7-Kit jeweils im Elektrophoretogramm (Abbildung 2A), im Kapillarelektrophoresediagramm (Abbildung 2B) und im Chromatogramm (Abbildung 2C)
Abbildung 3. Synthese von gecapterter RNA in vitro.
Die Reaktion wurde 2 Stunden lang bei 37 °C in einem PCR-Gerät inkubiert und dann mit Magnetkügelchen (Kat.-Nr. 12602) gereinigt. Das Ergebnis wurde mit einem NanoDrop-Spektralphotometer analysiert (siehe Abbildung 3A). Das Integritätsergebnis wurde mit einer Kapillarelektrophorese analysiert (siehe Abbildung 3B).
Zahlung und Sicherheit
Ihre Zahlungsinformationen werden sicher verarbeitet. Wir speichern weder Kreditkartendaten noch Zugriff auf Ihre Kreditkarteninformationen.
Anfrage
Sie können auch mögen
FAQ
Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von
Für bestimmte Anwendungen sind möglicherweise zusätzliche geistige Eigentumsrechte Dritter erforderlich.