Beschreibung
Cap AG (3'Acm) ist ein Cap-Analogon mit der Struktur m7(3'AcmG)(5')ppp(5')(2'0MeA)pG, die Molekülformel lautet C35H48N16O24P4 und das Molekulargewicht beträgt 1200,75. Das Produkt wird für die Transkription mit der Anfangssequenz von 5'AG3' verwendet, und die natürliche Cap1-Struktur wird durch Cap1-Transkriptions-Capping erzeugt. Im Vergleich zu Cap0, das durch traditionelle Capping-Methoden erzeugt wird, ermöglicht die durch CapAG (3'Acm) erzeugte Cap1-Struktur der mRNA eine höhere Aktivität und Translationseffizienz in vivo.
Besonderheit
Im Vergleich zu bestehenden Produkten wie CleanCap ist dieses Produkt ein 3'Acm modifiziertes mRNA-Cap-Analogon. Seine Doppelbindungsstruktur erhöht die molekulare Stabilität und macht es resistent gegen Erkennung und Hydrolyse durch Nukleasen. Mit dem 3'Acm, stabilisiert effektiv die Struktur der 5'-Endkappe, verbessert die Bindungsfähigkeit der mRNA mit dem eukaryotischen Initiationsfaktor (eIF4E) und verbessert so die mRNA-Translationseffizienz. Darüber hinaus liefert dieser Typ von Cap-Analogon vielversprechende Daten hinsichtlich der Transkriptionsausbeute in vitro und der Capping-Effizienz.
Komponenten
| Katzen-Nr. | Name | Größe |
| 10684 | LZCap AG (3'Acm) (100 mM) | 100 μL |
| 1 ml |
Produktdetails
| Summenformel | C35H48N16O24P4 (Freie Säure) |
| Molekulargewicht | 1200,75 (Freie Säure) |
| Konzentration | 100 ± 3 mM |
| Reinheit | HPLC ≥95 % |
Figur
Abbildung 1. Das LZCap-Analogon zeigte eine stärkere Affinität zu Translationsinitiationsfaktoren eIF4E, was eine effizientere Initiierung der mRNA-Translation ermöglicht. Je niedriger der Kd-Wert, desto stärker ist die Affinität des Cap-Analogons zum Cap-bindenden Protein eIF4E.
Abbildung 2. Die In-vivo-Expression von mit LZCap AG gecapterter mRNA ist viel höher als die des 3'OMe-Cap-Analogons.
Abbildung 3. Mit LZCap gecappte mRNAs sind resistenter gegen das Decapping-Enzym. Je höher der IC50-Wert, desto stärker ist die Fähigkeit des Cap-Analogons, der Spaltung durch das Decapping-Enzym zu widerstehen.
Abbildung 4. Mit LZCap gekapselte mRNA reduziert einzelne RNA-stimulierte Transkriptionsniveau des Immunfaktors in THP-1-Zellen.
Allgemeines Sicherheitsprofil
| Ergebnis Und Abschluss | |
| Zytotoxizität Prüfen | NEIN Zytotoxizität War beobachtet mit Die geändert Nukleosid In mehrere Zelle Linien |
| Polymerase Hemmung Studie | Der geändert Nukleosid Ist weder ein Hemmstoff noch A Substrat von menschlich RNA Und DNA Polymerasen Und Ist daher nicht integriert hinein Die Genom |
| Ames Prüfen* | NEIN Genotoxizität War beobachtet In Die Ames prüfen |
Lagerung
Dieses Produkt kann zwei Jahre lang bei -25–15 °C gelagert werden.
Vorsichtsmaßnahmen
- Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit beim Arbeiten mit diesem Produkt persönliche Schutzausrüstung (PSA), wie Laborkittel und Einweghandschuhe.
- Nur für Forschungszwecke.
Fragen und Antworten
1. Wie gestalten Sie das LZCap?
Enzyme haben eine relativ „spezifische“ Erkennung von Substraten. Wenn wir also eine neue Cap-Struktur entwerfen, benötigen wir einerseits neuartige Strukturmodifikationen für Patentzwecke, andererseits bemühen wir uns, die Ähnlichkeit mit natürlichen/bekannten Strukturen so weit wie möglich beizubehalten. Die natürliche Struktur hat ein Ribose-3'-OH, das modifiziert werden kann (z. B. Methylierung). Basierend auf dieser Überlegung haben wir uns entschieden, aus Patentgründen ein Kohlenstoffatom an der 3'-Position hinzuzufügen, gefolgt von einem NH, um die Wasserstoffbrückenbindung von OH nachzuahmen, und dann einer Acetylgruppe, um die Basizität von NH zu verringern und seine Wasserstoffbrückenbindungsfähigkeit zu verbessern. Die Aktivität von LzCap ist besser als Methylated natürliche Kappe, möglicherweise aufgrund erhöhter Wasserstoffbrücken. Im Vergleich zu den Methyl- und Methoxygruppen kann die Acetylaminogruppe auch die Van-der-Waals-Wechselwirkungen zwischen dem Substrat (Kappe) und dem Initiierungsfaktor (Enzym) erhöhen.
2. Ist die Acetylaminogruppe stabil?
Die Acetylaminogruppe ist bereits ausreichend stabil. Sie ist viel stabiler als die 7-Methylposition und die Phosphodiesterbindung, die die am wenigsten stabilen Teile der Kappe sind.
Veröffentlichung
- Polyvalente mpox-mRNA-Impfstoffe lösen robuste Immunreaktionen aus und bieten wirksamen Schutz gegen das Vacciniavirus, 2024, Cell Reports 43,114269
- Vorläufige Studie zur Wirksamkeit und Wirkungsdauer eines mRNA-basierten GLP-1R-Agonisten bei diabetischen Affen.2024, Diabetes, 73
Beschränkt Verwenden Lizenzerklärungent
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