Beschreibung
Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix für qPCR (gDNA Digester Plus) ist ein neu angepasster Premix, der auf Basis von Hifair™ⅢReverse Transcriptase entwickelt wurde. Im Vergleich zu Hifair™ ⅡReverse Transcriptase hat Hifair™ Ⅲ Reverse Transcriptase eine deutlich höhere thermische Stabilität und kann Reaktionstemperaturen bis zu 60℃ standhalten und eignet sich für die Reverse Transkription von RNA-Vorlagen mit komplexen Sekundärstrukturen. Gleichzeitig erhöht das Enzym die Affinität zu Vorlagen, was ideal für die Reverse Transkription einer kleinen Anzahl von Vorlagen und Genen mit geringer Kopienzahl ist.
Der Premix enthält 5×gDNA Digester Mix und 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. 5×gDNA Digester Mix kann restliche genomische DNA-Verunreinigungen in RNA-Vorlagen entfernen, um zuverlässigere Folgeergebnisse zu gewährleisten. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus enthält alle für die Reverse Transkriptase erforderlichen Komponenten (Puffer, dNTP, Hifair™ Ⅲ Reverse Transkriptase, RNase-Inhibitor, Random Primer/Oligo (dT)18 Primer Mix), RNA-Vorlage und Rnase-freies H2O werden zur reversen Transkription hinzugefügt und der gDNA-Diger wird gleichzeitig beendet, um die Integrität der cDNA sicherzustellen.
Das Produkt eignet sich für die zweistufige RT-QPCR-Erkennung, ist speziell für qPCR optimiert und verfügt über einen proportional optimierten Random Primer/Oligo (dT)18 Primer Mix, der die Einleitung der cDNA-Synthese aus allen Bereichen des RNA-Transkripts mit derselben Reverse-Transkriptionseffizienz ermöglicht. Die Authentizität und Wiederholbarkeit der qPCR-Ergebnisse sind in höchstem Maße gewährleistet. Das Reverse-Transkriptionsprodukt ist kompatibel mit der SYBR Green-Methode und der TaqMan-Sondenmethode qPCR, Hifair™ UNICON™ qPCR SYBR Green Master Mix, Hifair™ qPCR SYBR Green Master Mix oder Hifair™ qPCR TaqMan Probe Master Mix kann je nach Versuchszwecken ausgewählt werden und wird in Kombination verwendet, um leistungsstarke Genexpressionsanalysen durchzuführen.
Merkmale
- Leistungsstarke Reverse-Transkription
- Erhöhung der Reaktionstemperatur - Erststrang-cDNA kann im Temperaturbereich von 55 bis 60°C synthetisiert werden
- Effiziente Entfernung genomischer Rückstände
- Breiter linearer Erfassungsbereich
Anwendungen
- Aufbau einer cDNA-Bibliothek
- Antisense-RNA-Synthese
Technische Daten
| Art des Endprodukts | cDNA (Erststrang) |
| PCR-Methode | RT-PCR |
| Reagenztyp | Rücktranskription |
| Art der Probe | RNA |
| Optimale Reaktionstemperatur | 55℃-60℃ |
| Reverse Transkriptase | M-MLV |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100T) |
| 11141-A | RNase-freies H2O | 1 ml | 2×1 ml |
| 11141-B | 5×gDNA-Verdauungsmischung | 30 μl | 300 μl |
| 11141-C | 4×HifairTM Ⅲ SuperMix plus | 50 μl | 500 μl |
Versand und Lagerung
Das Produkt wird mit Trockeneis versendet und kann 18 Monate lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1.Hervorragende Reverse-Transkriptionseffizienz, geeignet für Gene mit unterschiedlicher Expressionshäufigkeit und unterschiedlichem GC-Gehalt
Abbildung 2. Linearer Testbereich Gesamt-RNA 10 pg~5 μg
Abbildung 3. Effiziente Entfernung genomischer Rückstände
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