Beschreibung
Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix für qPCR (gDNA Digester Plus) ist ein auf Hifair™Ⅲ Reverse Transkriptase basierender Readjust-Premix. Im Vergleich zu Hifair™Ⅱ Reverse Transkriptase weist Hifair™Ⅲ Reverse Transkriptase eine deutlich höhere thermische Stabilität auf und hält Reaktionstemperaturen bis zu 60 °C stand. Sie eignet sich für die reverse Transkription von RNA-Templates mit komplexen Sekundärstrukturen. Gleichzeitig erhöht das Enzym die Affinität zu Templates, was ideal für die reverse Transkription kleiner Template-Anzahlen und Low-Copy-Gene ist.
Der Premix enthält 5×gDNA Digester Mix und 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. 5×gDNA Digester Mix kann verbleibende genomische DNA-Verunreinigungen in RNA-Vorlagen entfernen, um zuverlässigere Folgeergebnisse zu gewährleisten. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus enthält alle für die Reverse Transkriptase erforderlichen Komponenten (Puffer, dNTP, Hifair™ Ⅲ Reverse Transkriptase, RNase-Inhibitor, Random Primer/Oligo (dT)18 Primer Mix), RNA-Vorlage und Rnase-freies H2O werden zur reversen Transkription hinzugefügt und der gDNA-Diger wird gleichzeitig beendet, um die Integrität der cDNA sicherzustellen.
Das Produkt eignet sich für die zweistufige RT-QPCR-Detektion, ist speziell für qPCR optimiert und verwendet einen proportional optimierten Random Primer/Oligo (dT)18 Primer Mix. Dadurch kann die cDNA-Synthese aus allen Bereichen des RNA-Transkripts mit gleicher reverser Transkriptionseffizienz initiiert werden. Die Authentizität und Wiederholbarkeit der qPCR-Ergebnisse sind weitestgehend gewährleistet. Das Reverse-Transkriptionsprodukt ist kompatibel mit der SYBR Green-Methode und der TaqMan-Sondenmethode qPCR, Hifair™ UNICON™ qPCR SYBR Green Master Mix, Hifair™ qPCR SYBR Green Master Mix oder Hifair™ Der qPCR TaqMan Probe Master Mix kann je nach Versuchszweck ausgewählt werden und wird in Kombination verwendet, um leistungsstarke Genexpressionsanalysen durchzuführen.
Merkmale
- Leistungsstarke Reverse-Transkription
- Erhöhen Sie die Reaktionstemperatur – Erststrang-cDNA kann im Temperaturbereich von 55 bis 60 °C synthetisiert werden
- Effiziente Entfernung genomischer Rückstände
- Breiter linearer Erfassungsbereich
Anwendungen
- Konstruktion einer cDNA-Bibliothek
- Antisense-RNA-Synthese
Technische Daten
| Art des Endprodukts | cDNA (Erststrang) |
| PCR-Methode | RT-PCR |
| Reagenztyp | Rücktranskription |
| Art der Probe | RNA |
| Optimale Reaktionstemperatur | 55℃-60℃ |
| Reverse Transkriptase | M-MLV |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100T) |
| 11141-A | RNase-freies H2O | 1 ml | 2×1 ml |
| 11141-B | 5×gDNA-Verdauungsmischung | 30 μL | 300 μl |
| 11141-C | 4×HifairTM Ⅲ SuperMix plus | 50 μl | 500 μl |
Versand und Lagerung
Das Produkt wird mit Trockeneis versendet und kann 18 Monate lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.
Zahlen
Abbildung 1. Hervorragende Effizienz der reversen Transkription, geeignet für Gene mit unterschiedlicher Expressionshäufigkeit und unterschiedlichem GC-Gehalt
Abbildung 2.Linearer Testbereich Gesamt-RNA 5 pg~5 μg
Abbildung 3. Effiziente Entfernung genomischer Rückstände
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Zitiert aus „Das Tetratricopeptid-Repeat-Protein OsTPR075 fördert die Ährenbildung durch Regulierung des Florigentransports im Reis. Plant Cell . 27. September 2022;34(10):3632-3646. doi: 10.1093/plcell/koac190.“
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