Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix für qPCR stellt eine verbesserte Iteration des Hifair™ dar. Ⅲ SuperMix für die Synthese des 1. Strangs cDNA für qPCR (gDNA Digester Plus). Es wurde entwickelt, um die Anforderungen an die Durchführung von Reverse-Transkription- und Genomentfernungsreaktionen in einem einzigen Röhrchen zu erfüllen. Darüber hinaus rationalisiert es den Reaktionsprozess, verkürzt die Reaktionszeit erheblich und erhöht die Ausbeute des Reverse-Transkriptionsprodukts. Der 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix umfasst alle wesentlichen Reagenzien für die Reverse-Transkriptionsreaktion. Während der Reaktion müssen Sie ihn lediglich mit dem gDNA Remover Mix, Template-RNA und Wasser ergänzen, um den ersten Strang der cDNA effizient zu synthetisieren und gleichzeitig die Kontamination mit genomischer DNA zu beseitigen. Dieses Produkt eignet sich gut für die Reverse-Transkription komplexer RNA-Templates und erweist sich als äußerst effektiv für die Reverse-Transkription mit geringen Template-Mengen und Genen mit geringer Kopienzahl.

Das von diesem Produkt erzeugte Reverse-Transkriptionsprodukt ist sowohl mit den sondenbasierten als auch mit den farbstoffbasierten qPCR-Methoden vollständig kompatibel. Für sondenbasierte qPCR empfehlen wir die Verwendung des Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (Kat.-Nr. 11211), während für farbstoffbasierte qPCR der Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Kat.-Nr. 11184) die empfohlene Wahl für eine leistungsstarke Genexpressionsanalyse ist.

Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass das von diesem Produkt erzeugte Reverse-Transkriptionsprodukt nicht für nachfolgende Anwendungen wie die Amplifikation langer Fragmente geeignet ist. Wenn Sie für diese Zwecke eine effiziente Reverse-Transkription benötigen, empfehlen wir die Verwendung des Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150).

Merkmale

• 5 Minuten RT

• Integrierte RT- und gDNA-Verdauung in einem Röhrchen

Anwendungen

• RT-qPCR
  
• Antisense-RNA-Synthese

Technische Daten

Komponenten

Versand und Lagerung

Das Produkt wird mit Trockeneis versendet und kann 12 Monate lang bei -15 °C bis -25 °C gelagert werden.

Gebrauchsanweisung

Auftauen Die 11151-A/B/C-Komponenten auf Eis legen, vorsichtig schütteln und jede Reagenzkomponente gründlich mischen. Anschließend die folgenden Komponenten in einem RNase-freien Röhrchen:

Tabelle 1: Reaktionsvorbereitung

*Wir empfehlen, die Gesamt-RNA-Eingabemenge nicht über 2 μg zu überschreiten. Bei geringer Expressionshäufigkeit des Zielgens kann die Gesamt-RNA-Eingabe auf maximal 5 μg erhöht werden.

Tabelle 2: Reaktionsprotokolle

*Dieser Prozess umfasst sowohl die Reverse Transkription als auch die gDNA-Verdauung.

Das Reverse-Transkriptionsprodukt ist für den sofortigen Einsatz in qPCR-Reaktionen geeignet oder kann für kurze Zeit bei -20 °C gelagert werden. Für eine längere Lagerung empfehlen wir, es in Aliquots aufzuteilen und bei -80 °C aufzubewahren, um mehrere Gefrier-Auftau-Zyklen zu vermeiden.

Vorsichtsmaßnahmen:

1. Alle Verfahren sollten auf Eis durchgeführt werden. Um eine RNase-Kontamination zu verhindern, ist äußerste Vorsicht geboten.

2. Sorgen Sie für Ihre Sicherheit und Ihr Wohlbefinden, indem Sie einen Laborkittel und Einweghandschuhe tragen.

3. Dieses Produkt ist ausschließlich für wissenschaftliche Forschungszwecke bestimmt und sollte nicht anderweitig verwendet werden.