Beschreibung
Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix für qPCR (gDNA digester plus) ist eine aktualisierte Version von Hifair™ Ⅲ 1. Strang cDNA Synthese SuperMix für qPCR (gDNA Digester plus). Im Vergleich zur vorherigen Generation Hifair™ Ⅲ Reverse Transkriptase. Dieses Produkt weist eine verbesserte Toleranz gegenüber Inhibitoren, eine schnellere Reverse-Transkriptionsgeschwindigkeit und eine höhere cDNA-Ausbeute auf und eignet sich daher für Reverse-Transkriptionsreaktionen von RNA von Tieren, Pflanzen und Mikroorganismen. Der in diesem Produkt enthaltene gDNA Digester Mix -V2 wurde in seiner Fähigkeit zur Entfernung von Rest-DNA deutlich verbessert. Er verdaut effektiv bis zu 1000 ng DNA und sorgt so für zuverlässigere Ergebnisse durch die Eliminierung von DNA-Verunreinigungen in RNA-Vorlagen.
Hifair™ AdvanceFast SuperMix enthält alle Komponenten, die für die reverse Transkription benötigt werden. Fügen Sie einfach RNA-Template und RNase-freies H hinzu2O, um die Reaktion zu starten und gleichzeitig die Aktivität des gDNA-Digesters zu beenden, um die cDNA-Integrität sicherzustellen.
Die Reverse-Transkriptionsprodukte eignen sich für farbstoff- und sondenbasierte qPCR. Sie werden jedoch nicht für die Amplifikation langer Fragmente, wie z. B. das Klonen von Genen, empfohlen. Für solche Anwendungen bietet Hifair™ Für eine hocheffiziente Reverse Transkription wird das AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Kat.-Nr. 11150ES) empfohlen.
Technische Daten
| Kat.-Nr. | 11155ES10 / 11155ES60 |
| Größe | 10 T / 100 T |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 11155ES10 | 11155ES60 |
| 11155-A | Hifair™ AdvanceFast SuperMix | 60 μl | 600 μL |
| 11155-B | gDNA-Verdauungsmix -V2 | 20 μL | 200 μL |
| 11155-C | RNase-freies H2O | 200 μl | 2×1 ml |
Lagerung
Dieses Produkt sollte bei -25~-15℃ gelagert werden für 1 Jahre.
Anweisungen
1. Wenn eine DNA-Entfernung erforderlich ist
1) DNA-Verdauung
Bereiten Sie die folgende Mischung in einem RNase-freien Mikrozentrifugenröhrchen vor, mischen Sie sie vorsichtig durch Pipettieren und inkubieren Sie sie 2 Minuten lang bei 37 °C:
| Komponenten | Volumen(μL) |
| gDNA-Verdauungsmix -V2 | 2 |
| Gesamt-RNA | 10 pg–2 µg* |
| oder mRNA | 10 pg–500 ng |
| RNase-freies H2O | Bis zu 14 |
*Es wird empfohlen, ≤ 2 µg Gesamt-RNA zu verwenden. Bei geringer Zielgenexpression kann die Menge auf bis zu 5 µg Gesamt-RNA erhöht werden.
2) Aufbau der Reverse-Transkriptionsreaktion (20-µL-System):
| Komponenten | Volumen(μL) |
| Reaktionsmischung aus Schritt 1 | 14 |
| Hifair™ AdvanceFast SuperMix | 6 |
3) Reaktionsprogramm:
| Temperatur | Zeit |
| 50℃ | 5 Minuten |
| 85℃ | 5 Sek. |
2. Wenn die DNA-Entfernung Nicht Erforderlich
1) Aufbau der Reverse-Transkriptionsreaktion (20-µL-System):
| Komponenten | Volumen(μL) |
| Hifair™ AdvanceFast SuperMix | 6 |
| Gesamt-RNA | 10 pg–2 µg* |
| oder mRNA | 10 pg–500 ng |
| RNase-freies H2O | Bis zu 20 |
*Es wird empfohlen, ≤ 2 µg Gesamt-RNA zu verwenden. Bei geringer Zielgenexpression kann die Menge auf bis zu 5 µg Gesamt-RNA erhöht werden.
2) Reaktionsprogramm:
| Temperatur | Zeit |
| 50℃ | 5 Minuten |
| 85℃ | 5 Sek. |
Hinweise
1. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt.
2. Bitte operieren Sie mit Laborkittel und Einweghandschuhen，zu Ihrer Sicherheit.
3. Führen Sie alle Pipettier- und Mischschritte auf Eis durch, um die Probenintegrität zu wahren.
4. Um eine ordnungsgemäße Mischung zu gewährleisten, drehen Sie jede Komponente vor Gebrauch vorsichtig um und zentrifugieren Sie sie bei niedriger Geschwindigkeit.
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Zahlung und Sicherheit
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FAQ
Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von
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