Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Low Rox) ist eine Vorlösung für die 2× quantitative PCR-Amplifikation in Echtzeit mit hoher Fluoreszenzintensität, hoher Sensitivität und Spezifität sowie hoher Amplifikationsausbeute. Die Kernkomponente, Hieff UNICON™ Taq DNA-Polymerase, wird durch die Antikörpermethode heißgestartet, wodurch unspezifische Amplifikationen, die durch Primer-Annealing während der Probenvorbereitung verursacht werden, wirksam gehemmt werden können. Gleichzeitig fügt die Formel Faktoren hinzu, die die Amplifikationseffizienz der PCR-Reaktion verbessern, und erleichtert die Amplifikation von Genen mit unterschiedlichem GC-Gehalt (30–70 %), sodass die quantitative PCR in einem breiten Bereich quantitativer Regionen eine gute lineare Beziehung erzielen kann. Das Produkt nutzt die gemischte Farbwechselreaktion verschiedener Farbstoffe, um den Pipettiervorgang zu überwachen, wodurch das Auftreten von Pipettierfehlern wirksam reduziert wird.

Merkmale

Pipettierverfolgung: Reduzieren Sie das Risiko von übersehenen/Zugabefehlern

Hervorragende Verstärkung: Gute Linearität über einen weiten linearen Bereich

Hohe Präzision: Kann Vorlagen mit einem 2-fachen Konzentrationsunterschied genau unterscheiden

Gute Wiederholbarkeit: Geringe Variabilität zwischen den Vertiefungen in Replikationsvertiefungen, was zu einer besseren Wiederholbarkeit führt

Stabil und zuverlässig: Das Reaktionssystem kann 24 Stunden bei Raumtemperatur gelagert werden und das Produkt bleibt nach 20 Gefrier-Auftau-Zyklen unverändert

Anwendungen

Analyse der Genexpression-Unterschiede

Absolute quantitative Analyse

Technische Daten

Komponenten

Versand und Lagerung

Dieses Produkt sollte 1 Jahr lang bei -25–15 °C gelagert werden.

Zahlen

Abbildung 1. Innerhalb des Dynamikbereichs können zuverlässige Ergebnisse erzielt werden.

Mithilfe von 2 µL Plasmidvorlagen mit einem Gradienten von 10^1-10^7 wurden die entsprechenden Gene amplifiziert. Hieff UNICON™ Der ColorGPS-Mastermix kann einen Vorlagenmengenbereich von 7 Größenordnungen effektiv erkennen und erreicht eine gute Linearität innerhalb eines breiten linearen Bereichs.

Figur2. Kann Konzentrationsunterschiede der Vorlage von bis zu 2-fach genau unterscheiden.

Unter Verwendung von 2 µL Plasmid, verdünnt in einem 2-fachen Gradienten, als Vorlage wurden die entsprechenden Gene amplifiziert. Hieff UNICON™ Der ColorGPS-Mastermix kann Konzentrationsunterschiede in der Vorlage präzise auflösen.

Figur3. Es wird eine geringe Variabilität zwischen den Vertiefungen beobachtet, was auf eine bessere Wiederholbarkeit hinweist.

Unter Verwendung von Dutzenden von Plasmidkopien als Vorlage wurde die Amplifikation mit verschiedenen fluoreszierenden quantitativen Reagenzien gemäß den in den jeweiligen Bedienungsanleitungen angegebenen Verfahren durchgeführt. Die SD-Werte zeigen, dass das neue Produkt im Vergleich zu anderen Reverse-Transkriptionsreagenzien kleinere Unterschiede zwischen Replikationsvertiefungen und eine bessere Wiederholbarkeit aufweist.

Figur4. Flexibler, für Standard- oder Schnellverfahren geeignet.

Beim Standardverfahren werden die Denaturierungszeit und die Verlängerungszeit auf 10 Sekunden bzw. 30 Sekunden eingestellt, während beim Schnellverfahren die Denaturierungszeit und die Verlängerungszeit auf 3 Sekunden bzw. 10 Sekunden eingestellt werden, um die Ct-Werte zu ermitteln, die 10 Zielgenen entsprechen. Die Ergebnisse zeigen, dass die mit dem neuen Produkt sowohl im Standard- als auch im Schnellverfahren erzielten Ct-Werte stark korrelieren und das neue Produkt im Schnellverfahren gute Ergebnisse erzielen kann.

Figur5. Nachdem das Reaktionssystem hergestellt wurde, kann es 24 Stunden lang bei Raumtemperatur stabil bleiben.

Unter Verwendung verschiedener Gene von Mäusen, menschlichen 293-Zellen und Arabidopsis thaliana als Ziel wurde das Reaktionssystem nach der Vorbereitung vor der Erkennung 24 Stunden lang bei unterschiedlichen Temperaturen im Dunkeln aufbewahrt. Im Vergleich zur sofortigen Verarbeitung überschreitet der Erkennungsunterschied für verschiedene Gene 0,5 Ct nicht, was darauf hindeutet, dass auch bei lang andauernden Operationen stabile Ergebnisse erzielt werden können.

Unterlagen:

Benutzerhandbücher

11189_Handbuch_Ver.EN20241218.pdf