Beschreibung
HifairTM Lyo Multiplex Ein-Schritt RT-qPCR Kit ist ein Multiplex-Quantitative-PCR-Kit, das auf RNA als Vorlage basiert. Während des Experiments wurden Reverse-Transkription und quantitative PCR im selben Röhrchen durchgeführt, was den Versuchsablauf vereinfachte und das Kontaminationsrisiko verringerte. Das einzigartige Puffer- und Enzymdesign gewährleistet, dass es bei der Herstellung und dem Produktdesign von einstufigen RT-qPCR-lyophilisierten Reaktionssystemen verwendet werden kann.
In diesem Kit wurde der Erststrang der cDNA effizient mit hitzebeständigen HifairTM V Reverse Transkriptase und quantitativ amplifiziert durch UniconTM HotStart Taq DNA Polymerase. Das Kit enthält hauptsächlich optimierte lyophilisierbar Puffer, Enzymmischung usw. Darüber hinaus werden Faktoren hinzugefügt, die die unspezifische PCR-Amplifikation wirksam hemmen und die Amplifikationseffizienz mehrerer qPCR-Reaktionen verbessern können, wodurch die Amplifikationseffizienz sichergestellt und bis zu mehrere Amplifikationsreaktionen durchgeführt werden können.
Dieses Kit ist ausgestattet mit Gefriertrocknungsmittel die zur Gefriertrocknung verwendet werden können.
Technische Daten
| Heißstart | Eingebauter Heißstart |
| Nachweisverfahren | Primer-Sonde-Erkennung |
| PCR-Methode | Einstufige RT-qPCR |
| Art der Probe | RNA |
| Anwendungsgeräte | Ausrüstung mit Rox:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™ Ausrüstung mit Low Rox:ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 und 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™ Ausrüstung ohne Rox: Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Optikon® 2, Chromo4™ Eppendorf Meistercycler® ep-Realplex, Realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gen® 3000, Rotor-Gen® 6000 Roche Angewandte Wissenschaft Lichtcycler® 480, Lichtcycler® 2.0, Lichtcycler® 96 Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheiden SmartCycler®; Illumina Öko qPCR |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 11831ES60 (100T) | 11831ES80 (1.000 t) | 11831ES92 (10.000 t) |
| 11831-A | 4×HifairTM V Lyo-Puffer | 600 μl | 6 ml | 60 ml |
| 11831-B | HifairTM Lyo-Enzym-Mischung | 100 μl | 1 ml | 10 ml |
| 11831-C | Lyoprotektor | 800 μl | 8 ml | 80 ml |
Lagerung
Teil 1: 11831-A 【4 × Hifair V Lyo-Buffer】sollte gelagert werden bei -25℃ ~ -15℃ für 1 Jahr.
Teil 2: 11831-B【HifairTM Lyo-Enzym-Mischung】 sollte gelagert werden bei 2℃ ~ 8℃ für 6 Monate.
11831-C【Lyoprotektivum】sollte gelagert werden bei -25℃ ~ -15℃ für 1 Jahr.
Figur
Perlenleistung
Multiplex-PCR
Perlen Produktanfrage
Anweisungen
- Reaktion Zusammensetzung
| Komponenten | Volumen (μl) | Endkonzentration |
| 4×HifairTM V Lyo-Puffer | 6 | 1× |
| HifairTM Lyo-Enzym-Mischung | 1 | - |
| Lyoprotektor | 8 | - |
| Primer-Mix (10 μM) | 1 | 0,1-1 μM |
| Sondenmischung (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Vorlagen-RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | bis 25 | - |
Hinweis: Vor Gebrauch gut vermischen und übermäßige Blasenbildung durch heftige Vibrationen vermeiden.
- Optimiertes Fahrradprotokoll
|
| Reaktionsphase | Temperatur | Zeit | Zyklus |
| 1 | Umgekehrte Transkription | 50°CA | 10 Minuten | 1 |
| 2 | Erste Denaturierung | 95°C | 2 Sek | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C |
| 45 Zyklen |
| 60°CB | 13 SekC |
Hinweise
a) Reverse Transkription: Die Temperatur kann 42°C wählen oder 50°C für 10-15 Minuten.
b) Amplifikationsreaktion: Die Temperatur wird entsprechend dem Tm-Wert der entwickelten Primer angepasst.
C) Fluoreszenzsignalerfassung: Bitte stellen Sie den Versuchsablauf entsprechend den Vorgaben im Gerätehandbuch ein.
Zahlung und Sicherheit
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Anfrage
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