Beschreibung
Nirgendjemand-Tn5 ist eine rekombinante Tn5-Transposase verschmolzen mit Nanokörpery, das spezifisch binden kann mit Primärantikörper von zwei verschiedenen Spezies (Maus und Kaninchen).
PProdukt ICHInformationen
| Katalog NEIN. | 12595ES01/12595ES02/12595ES03 |
| Spezifikationen | 10 μL/ 80 μL/ 100 μL |
Produkt KomponenteS
| Komponente NEIN. | Komponentenname | 12595ES01 | 12595ES02 | 12595ES03 |
| 12595-A | Anti-Maus Tn5 | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
| 12595-B | Anti-Kaninchen Tn5 | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
| 12595-C | Puffer zusammenbauen | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
Versand und SLagerung
Gespeichert bei -85° ～ -65℃ für eins Jahr.
Zahlen
H3K4me1:
H3K4me3
H3K9me3
H3K27ac
H3K27me3
H3K27me3
Kontrolle: Konventionelles pA/G-Tn5, Cut&Tag Multi Cut&Tag: Nanobody Tn5
Anweisung
Nehmen Sie eine Hochdurchsatz-Sequenzierungsbibliothek Vorbereitung Lesen Sie beispielsweise vor der Verwendung die Anleitung sorgfältig durch.
1. Adapter Vorbereitung
1) Referenz Oligo Name und Reihenfolge der Illumina-Plattform:
Oligo A-1:5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-2: 5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-3:5'-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo B: 5'-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo C: 5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2) Auflösen der Oligo A, Oligo B und Oligo C bis 200 μM.
3) Es werden jeweils folgende Reaktionssysteme formuliert:
| Komponente | Reaktion 1 |
| Oligo B （200 μM） | 10 μl |
| Oligo C （200 μM） | 10 μl |
| gesamt | 20 μl |
| Komponente | Reaktion 2 |
| Oligo A-1 oder A-2 oder A-3 (200 μM) | 10 μl |
| Oligo C （200 μM） | 10 μl |
| gesamt | 20 μl |
4) Mischen Sie Reaktion 1 und 2 und zentrifugieren Sie kurz, um die Lösung wieder auf den Boden des Röhrchens zu bringen. Platzieren Sie sie im PCR-Gerät. folgendes Programm einrichten und ausführen: heißer Deckel bei 105°C,und dann erhitzen bei 94℃ für 2 min. Nach Ablauf der Zeit wurde der Reaktionsvorgang abgebrochen, ohne den heißen Deckel zu öffnen.Das PCR-Röhrchen wurde 2 Stunden lang im PCR-Instrument natürlich gekühlt und dann 5 Minuten lang bei 4 °C aufbewahrt.
5) Nach der Reaktion mischen Sie die gleichen Volumina von RAktion 1 und Reaktion 2. Benannt Anzeige Adapter mischen und bei –25 bis –15℃ lagern.
2. zur Transposon-Erzeugung
1) So konfigurieren Sie das folgende Reaktionssystem:
| Komponente | Volumen (μL) |
| Anti-Maus Tn5 oder Anti-Kaninchen Tn5 | 10 |
| Adaptermischung (50 μM) | 0.5 |
| Puffer zusammenbauen | 0,5 |
2) Reaktionsbedingungen: Mit der Pipette leicht blasen und gut vermischen. Führen Sie den Reaktion bei 25℃ 1 h (heißer Deckel ab). Die Produkte von Reaktion kann direkt auf die Bibliothek angewendet werden Vorbereitung oder gespeichert von -25 bis -15℃.
Hinweise
1. Transposase ist temperaturempfindlich, daher wird empfohlen, die Adapter Einbettung so schnell wie möglich. Das generierte Transposon kann bei -25 bis -15 °C gelagert werden und hat eine Gültigkeitsdauer von 1 Jahr.
2. Dieses Produkt wird nur für wissenschaftliche Forschungszwecke verwendet.
3. Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit Laborkleidung und Einweghandschuhe.
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