Beschreibung
Exonuklease I, gewonnen aus einem gentechnisch veränderten Escherichia coli Stamm, der das Exo I-Gen exprimiert, weist Exonukleaseaktivität auf, die einzelsträngige DNA vom 3'- bis zum 5'-Ende verdaut. Es setzt sequenziell Desoxyribonukleotid-5'-Monophosphate frei und bewahrt so die Integrität der 5'-terminalen Dinukleotide. Dieses Enzym wird hauptsächlich zum Abbau und zur Entfernung von Primern nach der PCR-Amplifikation verwendet. Es bleibt gegenüber doppelsträngiger DNA und DNA-Strängen mit 3'-Hydroxylenden, die durch Phosphorylierung oder Acetylierung blockiert sind, inaktiv.
Merkmale
Keine Reste von Exonuklease (doppelsträngig), Endonuklease oder RNase
Inaktivierung durch einfache Behandlung bei 80°C für 15 Minuten
Anwendungen
Entfernen Sie einzelsträngige Primer aus dem PCR-Reaktionssystem vor der Sanger-DNA-Sequenzierung oder SNP-Analyse
Entfernen Sie einzelsträngige Primer aus dem verschachtelten PCR-Reaktionssystem
Eliminieren Sie lineare einzelsträngige DNA aus der Probe und hinterlassen Sie doppelsträngige DNA
Technische Daten
| SQuelle | Escherichia coli |
| Molekulargewicht | 55 KDA |
| Konzentration | 20 U/µL |
| Einheit DDefinition | Eine Einheit ist definiert als die Menge an Enzym, die erforderlich ist, um die Freisetzung von 10 nmol säurelöslicher Nukleotide aus einzelsträngiger [3H]-DNA bei einer Konzentration von 0,17 mg/ml in einem 50 μM Reaktionssystem mit 1X Exonuklease I Reaktionspuffer bei 37°C innerhalb von 30 Minuten |
Komponenten
| Komponenten NEIN. | Name | 14535ES80 | 14535ES90 |
| 14535-A | Exonuklease ICH (20 U/µL) | 250 μl | |
| 14535-B | 10×Exonuklease I Reaktionspuffer | 1 ml | 1 ml |
Versand und Lagerung
Dieses Produkt sollte bei -25 ~ -15 gelagert werden℃ für 2 Jahre.
Zahlen
Abbildung 1. Verdauungsleistung von Exonuklease I auf einzelsträngiger DNA
Hinweis: In einem 20-μL-Reaktionssystem wurde eine Endkonzentration von 15 pmol/μL einzelsträngigem DNA-Substrat hinzugefügt. Es wurden unterschiedliche Mengen (0,63, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 U) der Exonuklease I von Yeasen und Lieferant A verwendet und 15 Minuten lang bei 37 °C inkubiert, gefolgt von einer Hitzeinaktivierung bei 80 °C für 15 Minuten. Zur Erkennung des Abbaus einzelsträngiger DNA wurde Polyacrylamid-Gelelektrophorese eingesetzt. Die Ergebnisse zeigten, dass die Exonuklease I von Yeasen die gleiche Fähigkeit besitzt, einzelsträngige DNA zu verdauen wie Lieferant A.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
14535_Sicherheitsdatenblatt_Ver.EN20241210.pdf
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