Beschreibung
Endonuclease VIII ist ein DNA-Reparaturenzym, das sowohl N-Glycosylase- als auch AP-Lyase-Aktivität besitzt. Die N-Glycosylase-Aktivität kann beschädigte Pyrimidinbasen aus doppelsträngiger DNA freisetzen, wodurch eine abasische (AP-)Stelle entsteht. Die AP-Lyase-Aktivität spaltet dann die Phosphodiesterbindung an der AP-Stelle, wodurch eine Lücke mit einem 5'-Phosphat und einem 3'-Phosphat entsteht. Zu den beschädigten Basen, die Endonuclease VIII erkennt und entfernt, gehören: Harnstoff, 5,6-Dihydroxythymin, Thyminglykol, 5-Hydroxy-5-methoxyhydantoin, Uracilglykol, 6-Hydroxy-5,6-dihydrothymidin und Methylhydroxypropanon.
Merkmale
Keine Rückstände von Exonukleasen, Endonukleasen oder RNasen
Hocheffiziente Entfernung beschädigter Beläge
Anwendungen
Einzelzell-Gelelektrophorese (Comet-Assay)
Alkalische Elution
Alkalisches Abwickeln
Technische Daten
| SQuelle | Escherichia coli |
| Molekular Bacht | 29 KDA |
| Konzentration | 10 Einheiten/μL |
| Einheit DDefinition | Eine Einheit ist definiert als die Menge an Enzym, die erforderlich ist, um 1 pmol eines 34 bp Oligonukleotidduplexes mit einer AP-Stelle* in einem 10 µM Gesamtreaktionssystem mit 10 pmol fluoreszenzmarkiertem Oligonukleotid-Duplex in 1X Endonuklease VIII RReaktionspuffer bei 37°C innerhalb 1 Stunde |
| ICHAktivierung CKonditionen | ICH10 Minuten bei 75°C nkubieren |
Komponenten
| Komponenten NEIN. | Name | 14536ES80 | 14536ES90 |
| 14536-A | Endonuklease VIII (10 U/μL) | 500 μL | |
| 14536-B | 10 × Endonuklease VIII-Reaktionspuffer | 1.5 ml | 1.5 ml |
Versand und Lagerung
Die Produkte sollten bei -25℃ ~ -15℃ für 1 Jahr.
Zahlen
Abbildung 1. Vergleich der Auswirkungen der Basisexzision auf die Reparatur
Hinweis: 20 pmol Oligonukleotide wurden durch Endonuclease VIII von Yeasen bzw. SupplierA in einem 20 µL Reaktionssystem mit der Zugabe von 5~40 U Endonuclease VIII und der äquivalenten Enzymaktivität von UDG (Cat#10303ES) katalysiert und bei 37℃ für 1 Stunde. Die Ergebnisse der Agarosegelelektrophorese zeigten, dass die Basenexzisionseffekte von Yeasens Endonuclease VIII und denen von Lieferant A konsistent waren.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
14536_Sicherheitsdatenblatt_Ver.EN20241210.pdf
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