Beschreibung
T4 Endonuclease V, auch bekannt als T4 PDG (Pyrimidin-Dimer-Glycosylase), ist eine bifunktionelle DNA-Glycosylase, die die Aktivitäten von DNA-N-Glycosylase und AP-Lyase kombiniert. Dieses Enzym ist in der Lage, cis-syn-Cyclobutan-Pyrimidin-Dimere, die durch ultraviolette Strahlung induziert werden, zu erkennen und sich daran zu binden. Anschließend spaltet es die glykosidische Bindung am 5'-Ende der Pyrimidin-Dimere, gibt sie frei und hinterlässt eine AP-Stelle. Anschließend nutzt es seine Endonuclease-Aktivität, um die Phosphodiesterbindung an der AP-Stelle zu spalten, wodurch eine Lücke von einem Nukleotid im DNA-Strang entsteht.
Anwendungen
DNA-Schadensstudien
Einzelzell-Gelelektrophorese (Comet-Assay)
Technische Daten
| Quelle | T4-Phage |
| Molekulargewicht | 16,1 KD |
| Konzentration | 1 U/µL |
| Einheitendefinition | Eine Einheit ist definiert als die Menge an Enzym, die die Umwandlung von 0,5 µg UV-bestrahlter superspiralisierter pUC19-DNA in > 95 % genicktes Plasmid in einem Gesamtreaktionsvolumen von 20 µL in 30 Minuten bei 37 °C katalysiert. Das Nicken wird durch Agarosegelelektrophorese beurteilt. Bestrahltes Plasmid enthält durchschnittlich 3-5 Pyrimidin-Dimere |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 14542ES76 | 14542ES80 |
| 14542-A | T4-Endonuklease V (T4-PDG) (1 U/μL) | 500 μl | 1 ml |
| 14542-B | 10 x T4 Endonuclease V(T4 PDG) Puffer | 1 ml | 2 ml |
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