Beschreibung
Endonuclease IV kann auf eine Vielzahl von oxidativen Schäden in der DNA einwirken. Das Enzym ist eine Apurin-/Apyrimidin-Endonuklease (AP), die intakte AP-Stellen in der DNA hydrolysiert. AP-Stellen werden an der ersten Phosphodiesterbindung gespalten, die sich 5‘ zur Läsion befindet, wobei eine Hydroxylgruppe am 3‘-Terminus und ein Desoxyribose-5‘-Phosphat am 5‘-Terminus zurückbleiben. Das Enzym hat auch eine 3‘-Diesterase-Aktivität und kann Phosphoglycolaldehyd, intaktes Desoxyribose-5‘-Phosphat und Phosphat vom 3‘-Ende der DNA freisetzen.
Anwendungen
Einzelzell-Gelelektrophorese (Comet-Assay)
Alkalische Elution
Alkalisches Abwickeln
Technische Daten
| Quelle | E.coli |
| Molekulargewicht | 32,5 KD |
| Konzentration | 10 U/µL |
| Einheitendefinition | Eine Einheit ist definiert als die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 1 pmol eines 34-Mer-Oligonukleotidduplexes mit einer einzelnen AP-Stelle in einem Gesamtreaktionsvolumen von 10 µl in 1 Stunde bei 37 °C zu spalten. Eine AP-Stelle wird erzeugt, indem 10 pmol eines 34-Mer-Oligonukleotidduplexes mit einem einzelnen Uracilrest 2 Minuten lang bei 37 °C mit 1 Einheit Uracil-DNA-Glycosylase (UDG) behandelt werden. |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 14543ES80 | 14543ES90 |
| 14543-A | Endonuklease IV (10 U/μL) | 100 μL | 500 μL |
| 14543-B | 10 x Endonuklease IV-Puffer | 0,8 ml | 1,25 ml |
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