Beschreibung
Escherichia coli DNA-Ligase kann die Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen den 5'-PO4-Enden und den 3'-OH-Enden benachbarter DNA-Stränge katalysieren. Es zeigt fast keine nachweisbare Aktivität für Substrat-DNA mit glatten Enden. Der optimale pH-Wert für diese Reaktion beträgt 7,5–8,0 (Tris-HCl-Puffer) und NAD wird als Coenzym benötigt. Anders als T4-DNA-Ligase, die sowohl klebrige als auch glatte Enden verbinden kann, katalysiert dieses Enzym nur die Ligation zwischen DNA-Molekülen mit kohäsiven Enden. In Gegenwart von PEG und hohen Konzentrationen monovalenter Kationen kann es jedoch auch DNA mit glatten Enden ligieren. Darüber hinaus kann dieses Produkt die Ligationen zwischen DNA und RNA oder zwischen RNA-Molekülen nicht katalysieren. Dieses Enzym kann für Ligationsreaktionen in der NGS-Methylierungsbibliothek verwendet werden und kann auch in der Okayama-Berg-Methode zum Klonen von cDNA eingesetzt werden.
Technische Daten
Konzentration | 60 U/μL |
Einheitendefinition | In einem 20 μL Ligationsreaktionssystem, die Menge an Enzym, die zur Ligation von über 90 % erforderlich istf 6 μg λ-DNA-Hind III-Fragmente bei 16°C für 30 Minuten wird als eine Aktivitätseinheit (U) definiert |
Komponenten
Name | 14955ES82 | |
14955-A | Escherichia coli DNA-Ligase (60 U/μL) | 20 μl |
14955-B | 10× Escherichia coli DNA-Ligase-Puffer | 100 μl |
14955-C | 10× KOF (0,05 %) | 100 μl |
Hinweis: BSA sollte vor wiederholtem Einfrieren und Auftauen geschützt werden. Zur kurzfristigen Lagerung kann es bei 4 °C aufbewahrt werden.
Versand und Lagerung
Die Produkte sollten bei -25℃ ~ -15℃ für 1 Jahr.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
14955_Sicherheitsdatenblatt_Ver.EN20241210.pdf
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