MolPure^TM Magnetisches universelles Virus-DNA/RNA-Kit eignet sich zur Extraktion viraler Nukleinsäure aus Vollblut oder zellfreien Körperflüssigkeitsproben (wie Serum, Plasma, Zerebrospinalflüssigkeit, Nasen-/Rachenabstrich, Alveolarlavageflüssigkeit usw.). Diese Methode verwendet eine Magnetkügelchen-Reinigungstechnologie, ohne toxische Phenol-Chloroform-Extraktion, sicher, ungiftig und schnell. Die resultierenden Produkte können direkt für PCR, qPCR, Sequenzierung der zweiten Generation und andere Experimente verwendet werden. Mit dem automatischen Extraktionsinstrument der Magnetkügelchen-Methode kann die Hochdurchsatzextraktion von Nukleinsäure realisiert werden.

Produkt IInformationen

Komponenten

Bottled Version

Vorverpacktes VVersion

Lagerung

Teil I: Bei Raumtemperatur lagern, bei Raumtemperatur transportieren, 1 Jahr haltbar.

Teil II: Für Komponente 18521-G (Protease K) bei 2–8 °C lagern, bei Raumtemperatur transportieren.

Hinweise

1.Die verschiedenen Puffer in diesem Kit enthalten Guanidiniumsalze. Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit bitte einen Laborkittel

und Einweghandschuhe während des Betriebs. Befolgen Sie die üblichen Sicherheitsvorkehrungen, um den Kontakt mit Haut, Augen und Schleimhäuten zu vermeiden. Bei Kontakt sofort gründlich mit Wasser abspülen und einen Arzt aufsuchen.

2.Sollte es in der Lösung zu einem Niederschlag kommen, muss diese in einem Wasserbad bei 30°C erhitzt werden, bis der Niederschlag

vor Gebrauch vollständig auflösen.

3.Wenn die Magnetperlensuspension gefroren ist, verwenden Sie sie nicht.

4.Die verschiedenen Puffer in diesem Kit enthalten Guanidiniumsalze. Nicht mit oxidierenden Desinfektionsmitteln wie

wie Natriumhypochlorit, da dieses giftige Gase freisetzen kann. Sie müssen als medizinischer Abfall entsorgt werden.

5.Während der Elution können Reste magnetischer Kügelchen zurückbleiben. Versuchen Sie beim Ansaugen von Proben, das Einatmen der

magnetische Perlen.

Anweisungen

1. Verwendbare Probenarten: Vollblut, Serum, Plasma, Zerebrospinalflüssigkeit, Nasen-/Rachenabstriche,

bronchoalveoläre Lavageflüssigkeit und andere Proben.

2. Lagerung und Transport der Proben: Die Proben können sofort für Tests verwendet oder bei -70°C oder

niedriger für zukünftige Tests mit einer Haltbarkeit von 6 Monaten. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden. Proben sollten mithilfe der Kühlkettenlogistik transportiert werden.

3. Anforderungen an das Einfrieren und Auftauen: Schnelles Einfrieren und schnelles Auftauen, um wiederholte Zyklen zu vermeiden.

Bedienungsschritte

Die Lösung wurde auf Niederschlag überprüft und ob die magnetischen Perlen vor den Experimenten resuspendiert werden konnten.

Handbuch EExtraktion

1. Übertragen Sie 200-300 μL der Probe in ein 1,5 mL Zentrifugenröhrchen, fügen Sie 600 μL Lyse-Bindungsflüssigkeit hinzu,

20 μl Protease K und 20 μl Magnetkügelchen-Suspension, dann 30 Sekunden lang bei hoher Geschwindigkeit vortexen. 5–7 Minuten lang bei 50 °C unter Schütteln inkubieren; wenn der Inkubator keine Schüttelfunktion hat, während der Inkubation dreimal vortexen, jeweils 15 Sekunden lang.

2. Zur magnetischen Trennung in einen 1,5-ml-Magnetständer überführen, bis die Lösung klar und durchsichtig ist, dann die Lösung absaugen und entsorgen.

3. Geben Sie 700 µl Waschlösung A hinzu, verwirbeln Sie die Lösung 10 Sekunden lang, um die magnetischen Kügelchen zu verteilen, geben Sie sie dann zur magnetischen Trennung in den Magnetständer, bis die Lösung klar ist, und saugen Sie die Lösung ab und entsorgen Sie sie.

4. Geben Sie 700 µl Waschlösung B hinzu, verwirbeln Sie die Lösung 10 Sekunden lang, um die magnetischen Kügelchen zu verteilen, geben Sie sie dann zur magnetischen Trennung in den Magnetständer, bis die Lösung klar ist, und saugen Sie die Lösung ab und entsorgen Sie sie.

5. Wiederholen Sie Schritt 4 mit weiteren 700 μL Waschlösung B.

6. Kurz zentrifugieren, um Tröpfchen an der Röhrchenwand zu sammeln, auf den Magnetständer stellen, bis das Röhrchen klar ist, die Restflüssigkeit absaugen und entsorgen. 3–5 Minuten an der Luft trocknen lassen.

Hinweis: Ethanolrückstände können nachfolgende enzymatische Reaktionen hemmen. Stellen Sie daher sicher, dass der Ethanol beim Trocknen vollständig verdunstet. Trocknen Sie nicht zu lange, um eine Beeinträchtigung der nachfolgenden Elution zu vermeiden.

7. 50–100 μL Elutionsflüssigkeit zugeben und 2–3 Minuten bei hoher Geschwindigkeit vortexen, um die Magnetkügelchen zu verteilen. 5 Minuten bei 60 °C inkubieren, dann 60 Sekunden bei hoher Geschwindigkeit vortexen.

8. Durch kurzes Zentrifugieren können die Tropfen auf dem Röhrchendeckel im Röhrchen gesammelt und auf den Magnetständer übertragen werden, bis die magnetischen Perlen vollständig adsorbiert sind. Anschließend die Flüssigkeit vorsichtig in ein neues Zentrifugenröhrchen übertragen, um die Nukleinsäurelösung zu erhalten.

9. Die Nukleinsäurelösung kann kurzfristig bei -20 °C und langfristig bei -80 °C gelagert werden.

Automatisiert EExtraktion

Yeasen AP-96N automatisches Nukleinsäureextraktions- und -reinigungsgerät (für weitere Gerätetypen wenden Sie sich bitte an den technischen Support)

1. Vor dem Experiment Vorverpacken der Deep Hole Plate mit Kraftoszillation mehrmals, um Flüssigkeitsrückstände auf der Verschlussmembran zu vermeiden. Die Lösung wurde auf Niederschlag geprüft und ob die Magnetkügelchen resuspendiert werden konnten.

2. Legen Sie die einzelnen 96-Well-Platten der Reihe nach in das Nukleinsäureextraktionsgerät und platzieren Sie die Magnetstabhülse mit 96 tiefen Löchern.

Position 1: Bindungsplatte spalten

Position 2: Spülbrett

Position 3: Waschen + Magnetperlenplatte

Position 4: Waschplatte

Position 6: Eluatplatte

3. Geben Sie 200–300 µl der Probe und 20 µl Protease K in die Vertiefungen der Lyse-Bindungsplatte.

4. Führen Sie das folgende Verfahren aus. Übertragen Sie nach dem Verfahren das Eluat von der Elutionsplatte in ein neues Zentrifugenröhrchen. Die Lösung kann zur kurzfristigen Lagerung bei -20 °C und zur langfristigen Lagerung bei -80 °C aufbewahrt werden.

AP-96N-Kanal-Nukleinsäureextraktionsinstrumentenprogramm