Beschreibung
Die BCA-Methode (Bicinchoninsäure) ist eine derzeit weit verbreitete Methode zur Bestimmung der Proteinkonzentration. Basierend auf der Biuretreaktion, d. h. in einer alkalischen Umgebung, reduziert das Protein Cu2+ nach Cu+, wodurch ein violett-blauer Komplex entsteht, der einen hohen Absorptionswert bei 562 nm aufweist. Die Menge des Reaktionsprodukts ist proportional zur Proteinkonzentration. Die BCA-Methode zur Bestimmung der Proteinkonzentration ist einfach, empfindlich, schnell und stabil. Der im Kit enthaltene Proteinstandard ermöglicht es Benutzern, bequem Standardkurven zu erstellen.
Das BCA-Proteinkonzentrationsbestimmungskit kann für kolorimetrische Tests und Mikroplattentests verwendet werden. Für erstere wird eine große Menge (100 μl) Proteinprobe benötigt. Das Verhältnis von Proteinprobe zu BCA-Arbeitslösung beträgt 1:20 (v/v), was den Einfluss störender Substanzen verringert. Letzteres ist einfach und bequem zu handhaben und erfordert nur eine kleine Menge (10-25 μl) Proteinprobe. Da das Verhältnis von Proteinprobe zu BCA-Arbeitslösung jedoch 1:8 (v/v) beträgt, ist die Toleranzkonzentration störender Substanzen bis zu einem gewissen Grad begrenzt und das Mindestnachweisniveau wird reduziert. Unser Unternehmen bietet BCA-Proteinkonzentrationsbestimmungskits in drei Größen an. Die kolorimetrische Methode kann jeweils 50-mal, 250-mal und 500-mal verwendet werden. Die Enzymmarkierungsmethode kann jeweils 500-mal, 2500-mal und 5000-mal verwendet werden.
Merkmale
- Hohe Empfindlichkeit mit einem minimalen Nachweisprotein von 0,2 μg. Die untere Nachweiskonzentrationsgrenze beträgt 10 μg/ml.
- Es ist schneller und benötigt weniger Zeit zur Farbentwicklung als das allgemeine BCA-Kit zur Proteinkonzentrationsbestimmung. Es ist etwa viermal schneller als die herkömmliche Lowry-Methode.
- Breiter linearer Bereich, es gibt einen guten linearen Bereich im Konzentrationsbereich von 20–2000 μg/ml.
- Es wird durch die Chemikalien in den meisten Proben nicht beeinträchtigt.
Anwendung
- Proteinquantifizierung
Technische Daten
| Untersuchung | BCA Untersuchung |
| Produkttyp | Proteinquantifizierungstest |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Lösungsbasierte Detektion, Absorption |
| Zur Verwendung mit (Gerät) | Spektralphotometer, Mikroplatten-Lesegerät |
| Spezifität | Nicht zielspezifisch |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 20201ES76 (500 T) | 20201ES86 (2500 T) | 20201ES90 (5000 T) |
| 20201-A | BCA-Reagenz A | 100 ml | 500 ml | 2×500 ml |
| 20201-B | BCA-Reagenz B | 3 ml | 15 ml | 2×15 ml |
| 20201-C | Proteinstandard (BSA) | 5×1 ml (2 mg/ml) | 10×1 ml (2 mg/ml) | 10×2 ml (2 mg/ml) |
Lagerung
Reagenz A und Reagenz B im Kit sollten bei Raumtemperatur oder 2 °C bis 8 °C gelagert werden. Der Proteinstandard (BSA) kann 12 Monate lang bei -25 °C bis -15 °C gelagert werden, wenn er längere Zeit nicht verwendet wird.
Zahlen
Abbildung 1.Guter linearer Bereich, der R2 Die Werte der Standardkurven verschiedener Chargen lagen alle über 0,995.
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