Polyacrylamidgel (PAGE-Gel) wird häufig für die Proteinelektrophorese verwendet, um eine Proteintrennung durchzuführen. Diese Art von Gel besteht im Allgemeinen aus konzentriertem Gel und Trenngel. Ersteres dient zum Konzentrieren von Proteinproben, während letzteres Proteine ​​unterschiedlicher Größe je nach der Konzentration des im Gel verwendeten Acrylamidmonomers und N,N-Methylenbisacrylamid (Methylenacrylamid)-Vernetzungsmittels trennt.

Dieses Kit enthält eine Vielzahl von Reagenzien, die für die schnelle Herstellung eines PAGE-Gels erforderlich sind. Benutzer müssen nur ihre eigene Gelherstellungsausrüstung vorbereiten, um das Gel herzustellen, was den Gelherstellungsprozess erheblich vereinfacht. Das mit diesem Kit hergestellte Gel kann nur zur denaturierenden PAGE-Gelelektrophorese verwendet werden. Mit dieser Spezifikation können etwa 125 Stücke Minigel hergestellt werden (berechnet auf 0,75 mm dickes Gel).

Technische Daten

Komponenten

Versand und Lagerung

Das Produkt wird mit Eisbeutel geliefert und kann bei 2 gelagert werden℃~8℃ für 1 Jahr.

Anweisungen: Es wird empfohlen, nicht zu viele Gelstücke auf einmal zu konfigurieren, um ein zu spätes Hinzufügen der oberen Lösung zu vermeiden (höchstens 2-3 Stücke werden empfohlen).

1.Wählen Sie die geeignete Gelkonzentration entsprechend dem Molekulargewicht des Zielproteins (siehe Tabelle 1)

2. Gelherstellungsprozess (nehmen Sie als Beispiel ein Stück 0,75/1,0/1,5 mm Minigel)

2.1 Nehmen Sie ein gleiches Volumen Trenngelpuffer und Trenngellösung und mischen Sie sie, d. h. nehmen Sie jeweils 2,0/2,7/4,0 ml der beiden Lösungen.

2.2 0,1 g Ammoniumpersulfat abwiegen und in 1 ml deionisiertem Wasser auflösen. Das Ammoniumpersulfat muss vom Kunden selbst beschafft werden.

2.3 Der in Schritt 1 gemischten Lösung 35/45/70 µL APS hinzufügen (bei zu schneller Verfestigung kann die verwendete APS-Menge um die Hälfte reduziert werden) und gründlich vermischen.

2.4 Injizieren Sie die Lösung aus Schritt 2 in die Glasplatte zur Gelherstellung. Beachten Sie, dass das konzentrierte Gel innerhalb von 2 Minuten nach Zugabe des Trenngels in die Gelform injiziert werden muss und dass das Eingießen des konzentrierten Gels langsam erfolgen muss, um ein Vermischen des konzentrierten Gels und des Trenngels zu verhindern. Wenn die Konfiguration für den Einzelnen schwierig ist, kann sie auch angepasst werden, um das konzentrierte Gel nach dem Versiegeln mit Ethanol zu konfigurieren.

2.5 Herstellung des konzentrierten Gels: Nehmen Sie ein gleiches Volumen konzentrierten Gelpuffers und konzentrierter Gellösung, d. h. nehmen Sie jeweils 0,5/0,75/1,0 ml der beiden Lösungen, und fügen Sie dann 10/13/18 μl APS hinzu und mischen Sie gut.

2.6 Injizieren Sie es in die Glasplatte zur Gelherstellung und setzen Sie die Kammzähne ein (wenden Sie beim vorsichtigen Einführen der Kammzähne keine übermäßige Kraft an).

2.7 Nachdem das konzentrierte Gel 15 Minuten lang ausgehärtet ist, können die Kammzähne entfernt und für die Elektrophorese verwendet werden. Hinweis: Bitte versuchen Sie, frisch zubereiteten Elektrophoresepuffer zu verwenden.

Hinweise

1. Es wird empfohlen, dass die Spannung während der Elektrophorese zwischen 100 und 120 V liegt. Wenn die Elektrophoresegeschwindigkeit beschleunigt werden muss, kann sie auf 150 V erhöht werden.

2. Bringen Sie die Gellösung vor dem Einfüllen des Gels unbedingt auf Raumtemperatur (z. B. indem Sie sie mehrere Minuten stehen lassen), um die Bildung von Blasen im Gel wirksam zu vermeiden.

3. Das Ammoniumpersulfat muss der Kunde selbst kaufen. Wir empfehlen die Verwendung des Produkts mit der Kat.-Nr. A3678 von Sigma.

4. Die Menge der Ammoniumpersulfatlösung dient nur als Referenz und die tatsächliche Menge kann je nach persönlichen experimentellen Gewohnheiten und Erfahrungen erhöht oder verringert werden. Das Hinzufügen von mehr Ammoniumpersulfat kann die Gelgeschwindigkeit beschleunigen und umgekehrt. Die Gerinnungsrate des PAGE-Gels hängt eng mit der Temperatur und der Menge an Ammoniumpersulfat zusammen.

5. Diesem Produkt wurde eine entsprechende Menge TEMED-Ersatzstoffe zugesetzt. Wenn die Gelgeschwindigkeit weiter beschleunigt werden muss, kann vor der Abgabe je nach Bedarf eine entsprechende Menge TEMED zugesetzt werden.

6. Es besteht eine signifikante positive Korrelation zwischen Gelverfestigung und Temperatur. Unter gleichen Bedingungen ist die Verfestigungsgeschwindigkeit umso schneller, je höher die Temperatur ist.

7.Farbkonzentratgel kann während der Lagerung eine kleine Menge Niederschlag bilden, was ein normales Phänomen ist. Bitte verwenden Sie es bedenkenlos.

8. Das APS wurde bei -20 gelagert℃. Der Einfachheit halber kann das geöffnete und in Gebrauch befindliche APS bei 4 gespeichert werden℃.

9. Bitte tragen Sie die notwendige persönliche Schutzausrüstung wie Laborkittel und Handschuhe, um Ihre Gesundheit und Sicherheit zu gewährleisten!

10. Nur für Forschungszwecke!

Tabelle 1 Referenztrennbereich von SDS-PAGE-Gelen mit unterschiedlicher Konzentration

Unterlagen:

Sicherheitsdatenblatt

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20327-B-MSDS-CN20250110

20327-C-MSDS-CN20250110

20327-D-MSDS-CN20250110

Benutzerhandbücher

20327_Manual_CN20241219_DE